Продолжение · 12

7.2.1.1. Оценка лютеолитической активности различных доз анипроста в сравнении с другими препаратами простагландина

Для опыта были сформированы 9 групп телок по 3 головы в каждой группе. На 9-10 день полового цикла животным вводили различные препараты простагландина в разных дозах.

Кровь для анализа на прогестерон у телок брали перед и через 24, 48 и 72 часа после введения простагландинов.

Контрольным животным инъецировали физраствор.

По скорости снижения концентрации прогестерона судили о лютеолитической активности препаратов. Результаты опыта представлены в таблице 1 и на рисунках 3 и 4.

Через 24-72 часа после введения препаратов происходило снижение уровня прогестерона в крови телок. Наблюдалась прямая связь между дозой препарата и скоростью снижения концентрации прогестерона в крови [8].

В этой связи интересно проследить динамику снижения концентрации прогестерона в крови при использовании анипроста в различных дозах (табл. 2).

Увеличение дозировки анипроста с 50 до 240 мкг ускорило снижение концентрации прогестерона в крови у телок в течение суток с 59,9 до 85,3%.

У телок I-III групп (табл. 1) увеличение концентрации прогестерона через 48 и 72 часа после инъекции (в сравнении с концентрацией через 24 часа), по-видимому, связано с недостаточностью дозировок для вызывания полного лютеолиза.

Таблица 1

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок после введения различных простагландинов

х – Р <0,05; хх – Р <0,01

Отмечены некоторые особенности снижения концентрации прогестерона под действием эстрофана и анипроста в дозе 240 мкг. Концентрация прогестерона в крови под действием эстрофана и анипроста через 24 часа понизилась на 55,1 и 85,4%, через 48 – 70,7 и 92,7%, через 72 – 71,1 и 99,0% от исходного уровня соответственно.

Через 24, 48 и 72 часа после инъекции полного аналога нативного ПГF_2α, концентрация прогестерона понизилась на 55,2; 52,8 и 55,8% соответственно.

Таблица 2

Характер снижения концентрации прогестерона в сыворотке крови телок через 24 часа после инъекции анипроста в разных дозах

Инъекция допростона-В телкам не вызывала значительных изменений содержания прогестерона в крови.

На основании проведенных радиоиммунологических исследо-ваний нами установлена высокая лютеолитическая активность анипроста.

7.2.1.2. Синхронизирующий эффект различных препаратов

простагландинов

Для более полной оценки биологических свойств отдельных простагландинов нами были проведены исследования на циклирующих телках случного возраста.

Для исследований были сформированы 10 групп по 5-6 телок.

На 9-10 день полового цикла телкам инъецировали испытуемые препараты в разных дозах, и в течение 5 дней проводили выборку в охоте. У животных, пришедших в синхронизированную охоту, учитывали продолжительность полового цикла.

Результаты опыта приведены в таблице 3 и на рисунке 5.

Рис. 5. Приход в охоту телок после введения различных простагландинов

Проведенные исследования показали, что допростон-В не обладает

Таблица 3

Приход телок в охоту после введения различных препаратов простагландинов

синхронизирующим эффектом, даже при увеличении дозы в два раза.

Внутримышечное введение телкам ПГF_2α Латвийского производства сихронизировала охоту у 50-60% животных.

При инъекции смеси допростона-В и ПГF_2α телкам, синхронность прихода в охоту была очень низкой.

Так инъекция смеси допростона-В и ПГF_2α телкам синхронизировала охоту лишь у 16,7% животных.

Высокая синхронность по приходу в охоту (80,0-83,4%) получена при использовании анипроста.

Повышение дозы анипроста ускоряет наступление охоты у телок: при дозах 100 и 140 мкг пик охоты приходится на 96-120 часов, а при дозах 200 и 240 мкг – 48-72 часа.

7.2.1.3. Испытание различных препаратов простагландинов по скорости снижения уровня прогестерона в сыворотке крови у телок

Для подтверждения полученных в предыдущих опытах данных были проведены дополнительные исследования.

За подопытными телками вели наблюдение в течение двух половых циклов, что позволило точно определить продолжительность полового цикла каждого из них.

Было сформировано 4 группы по 8 телок, каждая группа была разделена на подгруппы «а» и «б».

На 9 день полового цикла и повторно через 11 дней телкам подгрупп «а» вводили различные препараты простагландинов, кровь брали перед и через 24, 48 и 72 часа после инъекции, телкам подгруппы «б» препараты вводили, начиная со второго цикла.

У животных контрольной группы кровь брали на 9 день и повторно в середине следующего полового цикла.

Результаты опыта представлены в таблицах 4 и 5 и на рисунках 6-8.

Таблица 4

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок после введения различных простагландинов

х – Р <0,05; хх – Р <0,01

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок контрольной группы в течение опытного периода существенно не изменялась. Инъекция анипроста телкам в первый цикл вызвала более резкое снижение концентрации прогестерона в крови через 24, 48 и 72 часа на 78, 93 и 97%, чем инъекция эстрофана на 64, 66 и 75% соответственно.

При повторной инъекции, через 24 часа анипрост вызывал более резкое снижение концентрации прогестерона, чем эстрофан, однако через 48 и 72 часа скорость снижения содержания прогестерона у телок, обработанных анипростом, была ниже, чем эстрофаном.

Так, если через 48 и 72 часа после инъекции эстрофана в крови у телок выявлены лишь следы прогестерона, то после введения анипроста остаточный уровень прогестерона у телок составил 15,6 и 11,0% соответственно.

Рис. 7. Уровень прогестерона в сыворотке крови телок в нг/мл после введения различных простагландинов (II-й цикл)

Инъекция допростона-В не влияла на содержание прогестерона в крови телок.

Во второй цикл у некоторых животных уменьшалось содержание прогестерона, у других увеличивалось.

В лютеальную фазу индуцированного цикла, содержание прогестерона в крови телок, обработанных эстрофаном и анипростом, было выше на 30 и 45% соответственно, по сравнению с контролем.

Пик прихода телок в синхронизированную внутримышечным введением эстрофана и анипроста охоту приходился на 48 часов и составил 66,7 и 75,0% соответственно.

Таблица 5

Приход телок в охоту после введения различных препаратов простагландинов

Синхронность прихода в охоту телок после инъекции эстрофана и анипроста составила по 91,7%.

Средняя продолжительность полового цикла телок сихронизи-рованных введением эстрофана и анипроста составила по 11,3 дня.

После введения допростона-В телки признаков синхронизированной охоты не проявили.

Разницы по синхронности прихода в охоту и продолжительности полового цикла у телок, обработанных эстрофаном и анипростом, не обнаружено (табл. 5).

Результаты исследований подтвердили высокую лютеолитическую активность анипроста в дозе 250 мкг.

• • • 1. Сравнительная оценка лютеолитической активности

анипроста и аналогов ПГF_2α зарубежного производства

Для сравнительной оценки лютеолитической активности анипроста с препаратами ПГF_2α зарубежного производства в рекомендуемых дозах был проведен следующий опыт.

Были отобраны 4 группы по 3 телки в каждой. На 9-10 день полового цикла телкам вводили различные препараты простагландинов, и брали пробы крови перед и через 12, 24, 48 и 72 часа после инъекции.

У телок контрольной группы кровь брали в те же сроки.

В образцах крови радиоиммунологическим методом определяли содержание прогестерона (табл. 6 и рис. 5).

Все использованные аналоги ПГF_2α вызывали снижение концентрации прогестерона в сыворотке крови телок через 12-78 часов (табл. 6 и рис. 9).

Таблица 6

Динамика прогестерона в сыворотке крови телок после обработки различными препаратами простагландина F_2α

Продолжение · 13

Уровень прогестерона в сыворотке крови контрольных телок незначительно вырос за период опыта. Наиболее резкое снижение концентрации прогестерона в крови телок через 12 часов после инъекции вызывали лютализ и анипрост – на 62 и 61% соответственно.

Из использованных препаратов простагландинов наиболее

высокой скоростью снижения прогестерона через 24, 48 и 72 часа обладал лютализ (69,7; 81,6 и 80,9% соответственно).

Концентрация прогестерона у телок инъецированных

анипростом снизилась через 24, 48 и 72 часа на 61,7; 69,6 и 74,6%

соответственно.

7.2.1.5. Испытание различных доз анипроста для синхронизации охоты и овуляции у телок

После определения оптимальных доз анипроста в предварительных опытах, нами были проведены научно-производственные испытания эффективных доз анипроста.

Для опытов отбирали телок с хорошо пальпируемыми желтыми телами в яичниках.

Телок, не пришедших в охоту в течение 5 дней после первой инъекции, через 11 дней обрабатывали повторно.

В контрольную группу вошли телки в течение опытного периода

пришедшие в спонтанную охоту.

Стельность учитывали за два половых цикла. Первый опыт по сравнительному испытанию анипроста в дозе 240 мкг и эстрофана в дозе 500 мкг был проведен в мае на трех группах по 20 телок в каждой (табл. 7 и рис. 10).

Инъекция эстрофана и анипроста синхронизировала охоту у 90 и 95% телок соответственно.

Пик прихода в охоту телок после внутримышечного введения эстрофана и анипроста приходился 3 день и составил 50,0 и 60,0% соответственно.

После двух инъекций эстрофана и анипроста проявили признаки охоты все опытные телки.

Оплодотворяемость от осеменения в первый и за два цикла была выше у телок II-й и III-й групп соответственно на 5,0; 20,0% и 10,0; 10,0%, чем I-й.

Процент стельных телок в контрольной группе за первое и повторное осеменение составил 55,0 и 65,0% соответственно.

Во втором опыте дозу анипроста снизили до 200 мкг.

Опыт проведен в августе (табл. 8 и рис. 10). Приход в охоту после первой и за две инъекции составил 67,5 и 95,0% соответственно.

Рис. 10. Приход в охоту телок после инъекции различных простагландинов

Наличие большого разброса процента прихода в охоту телок после введения 200 мкг анипроста, вероятно, свидетельствует о недостаточной дозе препарата.

Таблица 7

Синхронизация охоты и овуляции у телок эстрофаном и анипростом

Таблица 8

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после инъекции анипроста

Оплодотворилось от первого осеменения и за два цикла 47,4 и 57,9% (в контроле – 45,0 и 50%) соответственно.

Таким образом, в опытах на большом поголовье телок было под-тверждено, что оптимальной дозой анипроста является 240-250 мкг.

7.2.2. Использование простагландинов для повышения оплодотворяемости у телок

7.2.2.1. Применение анипроста для синхронизации охоты и овуляции у телок

После определения оптимальной дозы анипроста нами были проведены научно-производственные опыты, по синхронизации охоты и овуляции у телок.

У телок имелись желтые тела на разных стадиях развития (образования, расцвета, регрессии), у некоторых – фолликулы, у части – гипофункция яичников.

Телок, не пришедших в охоту после 1-ой обработки, обрабатывали повторно через 11 дней.

Осеменяли телок в индуцированную охоту.

Таблица 9

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после введения анипроста

В контрольную группу вошли телки, пришедшие в спонтанную охоту в течение опытного периода.

Первый опыт был проведен в марте.

Результаты синхронизации охоты и овуляции у телок анипростом представлены в таблице 9.

Приход телок в охоту после первой и за две инъекции составил 83,3 и 100,0% соответственно.

В контрольной группе оплодотворилось от первого осеменения 50,0% телок, а за два цикла 60,0%.

Оплодотворяемость телок опытной группы была выше, от осеменения в первый цикл на 13.3% и за два цикла на 6,7% по сравнению с контролем.

Следующий опыт по синхронизации охоты и овуляции телок анипростом был проведен в мае.

Для опыта были сформированы две группы по 30 телок.

После ректального обследования телкам опытной группы вводили по 250 мкг анипроста (табл. 10).

Таблица 10

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после обработки анипростом

В течение опытного периода пришли в охоту после первой обработки – 86,7%, после двух – 100,0% телок.

Оплодотворяемость в опытной группе от первого осеменения и за два цикла составила 63,3 и 76,7%, в контроле – 60,0 и 70,0% соответственно.

Таким образом, однократная обработка анипростом синхронизировала охоту у 83,3-86,7% телок.

Оплодотворяемость от первого осеменения телок выше в первом опыте на 6,0%, во втором – 1,5%, чем в контроле.

За два цикла оплодотворилось телок в первом и во втором опыте по 76,7%, против контроля – по 70,0%.

7.2.2.2. Изучение влияния многократных инъекций анипроста и эстрофана на дальнейшую воспроизводительную функцию у телок

Функция размножения направленная на сохранение и развитие вида является одной из важнейших в животном организме.

Лишь при стабильном воспроизводстве скота возможно обеспечение эффективности отрасли и удовлетворение потребностей населения в продуктах питания и промышленности в сырье.

В настоящее время широкое использование для направленной регуляции функции размножения и устранения патологий органов репродуктивной системы животных нашли синтетические аналоги простагландина F₂α [58; 96].

Хотя литературные данные о степени их эффективности и целесообразности применения противоречивы [62].

Вероятно, это связанно с возможностью негативных последствий вследствие вмешательства в гомеостаз животного.

Этот вопрос недостаточно изучен, однако, по мнению многих исследователей необоснованно частое использование гормональных препаратов способствует к угнетению функции гипофиза и половых органов, участвующих в выработке гормонов полового цикла.

Считают, что активность эндокринных желез снижается вследствие экзогенного введения аналогов производимых ими гормонов.

Однако есть мнение о том, что аналоги простагландинов безвредны и не обладают побочным действием [62; 41].

С целью изучения влияния многократных введений телкам аналогов простагландина F₂α на дальнейшую их воспроизводительную функцию нами были проведены исследования.

Местом проведения исследований был комплекс по выращиванию нетелей «Кутьино» (бывшего ОПХ «ВИЖа агрофирмы «Щапово») Подольского района Московской области. Для исследований были использованы 30 клинически здоровых телок голштинизированной черно-пестрой породы, которые по принципу аналогов по возрасту (14 месяцев) и весу (300-310 кг) были разделены на три группы по 10 голов в каждой.

Телки опытных групп имели хорошо пальпируемые желтые тела в яичниках, а контрольной были на разных стадиях полового цикла.

Телкам первой опытной группы вводили по 500 мкг эстрофана, а второй опытной – по 250 мкг анипроста.

Таблица 11

Время прихода в охоту после инъекции простагландина в течение 10 циклов по каждой телке

Время прихода в охоту после инъекции простагландина в течение 10 циклов по каждой телке

Через каждые одиннадцать дней инъекции повторяли на протяжении десяти индуцированных половых циклов.

Перед каждой обработкой проводили ректальное обследование половых органов.

В течение всего опытного периода регистрировали приход в охоту.

В период 4; 7 и 10 инъекций у 9 телок (по три головы из каждой группы) до инъекции и через 24; 48 часов после введения простагландина брали кровь. У контрольных животных кровь брали в лютеиновую фазу цикла, в те же сроки.

Содержание прогестерона в плазме крови определяли радиоиммунологическим методом в отделе эндокринологии сельскохозяйственных животных ВГНИИЖа.

После десятого введения простагландина F₂α все животные были осеменены, по приходу в охоту.

Данные по приходу в охоту приведены в таблицах 11-12 и на рисунках 11.

У некоторых телок наблюдали, высокое постоянство времени прихода в охоту после последовательных инъекций простагландина F₂α.

Так, время прихода в охоту после инъекций простагландина у телок 0022 в 90%, 0020 и 0029 в 80% случаев составила 48 часов.

Пик прихода в охоту приходился на 48-72 часы после инъекции простагландина.

Так, пришло в охоту через 48 часов 58 и 56% телок, обработанных соответственно эстрофаном и анипростом, а через 72 часа – 23 и 12%.

В течение 5 инъекций (табл. 12 и рис. 11) все телки синхронно приходили в охоту через 48-120 часов после инъекции.

Таблица 12