Продолжение · 22
Таблица 29
Оплодотворяемость многократно перегуливающих телок после инъекции допростона-В перед осеменением
Группы | Препарат и доза | Число телок в группе | Стельных от первого осеменения | Стельных за два цикла | ||
телок | % | телок | % | |||
I | Контроль | 25 | 9 | 36±9,6 | 17 | 68±9,3 |
II | Допростон-В, 25 мг | 25 | 10 | 40±9,8 | 20 | 80±8,0 |
Инъекция допростона-В телкам перед осеменением повысила оплодотворяемость от первого осеменения на 4%, за два цикла на 12%, по сравнению с контролем.
Очевидно, допростон-В стимулирует разрыв фолликула, и выход из него яйцеклетки.
Введение анипроста перед осеменением, впервые осеменяемым телкам
В ряде опытов было изучено влияние анипроста на оплодотворя-емость телок при его введении непосредственно перед осеменением.
Первый опыт провели в августе на впервые осеменяемых телках. Анипрост вводили внутримышечно за 15-20 минут до осеменения (табл. 30).
Таблица 30
Оплодотворяемость телок после введения анипроста перед осеменением
Группы | Препарат и доза | Число телок в группе | Стельных от пер-вого осеменения | Стельных за два цикла | ||
телок | % | телок | % | |||
I | Контроль | 20 | 9 | 45±11,1 | 10 | 50±11,2 |
II | Анипрост, 200 мкг | 20 | 10 | 50±11,2 | 13 | 65±10,7 |
Оплодотворяемость телок опытной группы была выше, чем в контроле на 5% от первого осеменения и на 15% за 2 цикла.
Инъекция анипроста перед осеменением, многократно перегуливающим телкам
Научно-производственный опыт по изучению влияния анипроста на оплодотворяемость многократно перегуливающих телок проведен в сентябре.
Таблица 31
Оплодотворяемость многократно перегуливающих телок после инъекции анипроста перед осеменением
Группы | Препарат и доза | Число телок в группе | Стельных от первого осеменения | Стельных за два цикла | ||
телок | % | телок | % | |||
I | Контроль | 25 | 10 | 40±9,8 | 12 | 48±10,0 |
II | Анипрост, 200 мкг | 25 | 13 | 52±10,0 | 15 | 60±9,8 |
Среднее число перегулов у подопытных телок составило 3,5 цикла на животное.
Препарат вводили внутримышечно в дозе 200 мкг (табл. 31).
Оплодотворяемость телок опытной группы составила 52% от первого осеменения и 60% за два цикла, в контроле – 40 и 48% соответственно. По влиянию на оплодотворяемость за два цикла эффективность применения 200 мкг анипроста и 25 мг допростона-В была одинакова, хотя после первого осеменения оплодотворяемость при введении анипроста повысилась на 12%, допростона-В – на 4%.
Оплодотворяемость впервые осеменяемых телок после введения им эстрофана перед осеменением
Опыт проведен в сентябре и октябре. Телкам опытной группы инъецировали по 500 мкг эстрофана перед осеменением (табл. 32).
Оплодотворяемость после введения эстрофана перед осеменением повысилась по сравнению с контролем на 16,7% от первого осеменения и на 20% (Р <0,05) за два цикла.
Все испытанные препараты простагландинов (табл. 29-32) увеличивали количество стельных животных, что свидетельствует о непосредственном участии простагландинов в овуляции и оплодотворении.
Наиболее эффективным по влиянию на оплодотворяемость оказался эстрофан в дозе 500 мкг, применение которого повысило оплодотворяемость от первого осеменения на 16,7% и за два цикла на 20,0% (Р <0,05) (табл. 29-32).
Таблица 32
Оплодотворяемость телок после инъекции эстрофана перед осеменением
Группы | Препарат и доза | Число телок в группе | Стельных от первого осеменения | Стельных за два цикла | ||
телок | % | телок | % | |||
I | Контроль | 30 | 19 | 63,3±8,8 | 22 | 73,3±8,1 |
II | Эстрофан, 500 мкг | 30 | 24 | 80,0±7,3 | 28 | 93,3±4,6х |
х – Р <0,05
Влияние инъекции простагландинов перед осеменением на течение беременности и развитие плода
Нами было изучено влияние простагландинов перед осеменением на течение последующей беременности, продолжительность стельности, пол и живую массу телят при рождении (табл. 33). В опытных группах первотелок не зарегистрировано ни одного случая аборта и мертворождения, в то время, как в контрольной группе эти показатели составили 3,8 и 4,0 соответственно.
Таблица 33
Влияние простагландинов на течение беременности и развитие плода
Показатели | Препараты и дозы | ||
Контроль | Допростон-В 25 мг | Анипрост 200 мкг | |
Учтено по результатам отелов (голов) | 26 | 10 | 13 |
Абортировало от общего числа стельных телок (%) | 3,8 | - | - |
Родилось телят, всего | 25 | 10 | 13 |
В том числе (%): | |||
бычков | 48,0 | 50,0 | 38,5 |
телочек | 48,0 | 50,0 | 61,5 |
мертвых | 4,0 | - | - |
Средняя живая масса теленка при рождении (кг) | 25,6±0,66 | 27,9±1,07 | 23,9±1,22 |
Продолжительность стельности (дней): | 276,5±1,29 | 277,9±2,25 | 280,0±3,14 |
Низкая средняя живая масса телят при рождении – 93,4% (от массы телят контрольных первотелок) была у первотелок инъецированных анипростом в дозе 200 мкг, а высокая – 109,0% у инъецированных допростоном-В.
Высокая продолжительность стельности – 101,3% (по сравнению с контрольными первотелками) была у первотелок инъецированных анипростом в дозе 200 мкг, низкая – 100,5% у инъецированных эстрофаном.
Достоверной разницы по живой массе телят при рождении и продолжительности стельности между группами не обнаружено.
7.2.2.6. Восстановление активности яичников при гипофункции
Обследованиями поголовья проблемных по воспроизводству коров симментальской породы как отечественной, так и зарубежной селекции установлено, что основной причиной депрессии показателей воспроизводительной активности в условиях Республики Башкортостан является гипофункция яичников.
В ряде случаев гипофункциональное состояние яичников может сохраняться на протяжении 6-8 месяцев. В большинстве случаев оно характерно для первотелок либо коров по второй лактации.
Распространенность гипофункции яичников по стаду, прежде всего, зависит от качества технологии кормления и, особенно, его соответствия лактационной кривой, другим физиологическим составляющим и сезону года.
В ОПХ «Баймакское» в течение 2001 года из 280 обследованных коров у 25,8% имело место проявление гипофункции яичников на различных стадиях.
Проявление этой формы овариопатологии имеет место во всех хозяйствах и характерно для всех пород животных.
В отдельных комплексах и хозяйствах, даже при регулярном и тщательном проведении специалистами соответствующих мероприятий и обеспечении качественного кормления патология, хотя и в меньшей степени, но имеет проявление.
Самые неблагоприятные для воспроизводства периоды в условиях Баймакского района Республики Башкортостан приходятся на годы с летними месяцами, сопровождающимися сухой жаркой погодой.
Животные проявляют охоту со слабо выраженными клиническими признаками. Результативность осеменений не превышает 10–30%. Ректальными исследованиями маточного поголовья в условиях максимального пика летней температуры воздуха выявили тенденцию к изменениям морфологического характера — уменьшению размеров матки и яичников — до 2-х раз ниже нормы. Большие трудности испытали при дифференциации функциональных образований в яичниках.
В подобных условиях у значительной части обследованных коров диагностировали глубокую гипофункцию яичников, наступившую под влиянием стрессового повышения температуры окружающей среды.
Есть все основания констатировать, что гипофункция яичников в неблагоприятные периоды года является следствием негативного влияния в большой степени экзогенных и в меньшей степени эндогенных факторов. Наиболее часто неактивные яичники диагностировали у молодых коров между 43 и 60 днями после отела; в 38-70% случаев гипофункцию регистрировали по 1 и 2-ой лактациям и в гораздо меньшей степени – по 3-ей. Принимая во внимание данные литературы, мы поставили цель на основании анализа полученных данных сформулировать методическую основу, которая позволяла бы более эффективно восстанавливать репродуктивную функцию коров при гипофункции яичников.
Для опытов отбирали коров симментальской породы с гипофункцией яичников по 2-ой лактации. В процессе отбора регулярно проводили наблюдения за динамикой полового цикла и параллельно — ректальные исследования. При отсутствии поведенческих проявлений половой цикличности, небольших размерах яичников (0,5-1,5 см в диаметре) и плотной консистенции с гладкой поверхностью ставили диагноз гипофункции. Кормление и эксплуатацию животных во время проведения опытов провели в соответствие общепринятым детализированным зоотехническим нормам.
Четырем группам отобранных коров (по 20 голов) в/м вводили ГСЖК по 1000, 1500, 2000 и 2500 ИЕ, соответственно по группам и всем животным по 500 мкг эстуфалана.
Изменения морфологического состояния яичников определяли ректально с 1-дневными интервалами в течение 10 дней после обработки.
Фиксировали: число коров с наличием в яичниках фолликулов, число проявивших признаки охоты и наличие полноценных и неполноценных желтых тел на 10 день после обработки.
Качество желтых тел определяли по соответствию концентрации прогестерона в крови значению, которое считают нормой для лютеальной стадии полового цикла.
Через 2-3 дня у положительно прореагировавших на гонадотропин животных всех 4 групп обнаружили рост фолликулов, овуляцию и проявление признаков охоты.
На 10 день у большинства коров зафиксировали наличие желтых тел, однако, более чем половины животных они были отнесены к категории неполноценных (табл. 34).
Квалификацию желтых тел неполноценными аргументировали их небольшими размерами и соответствующей этому низкой концентрацией прогестерона – 0,2±0,06 – 0,7±0,10 нг/мл, в то время как полноценные желтые тела имели характерные морфологические признаки, а в крови – соответствующую норме концентрацию прогестерона – 3,9±1,19 – 5,0±0,33 нг/мл.
Таблица 34
Эффективность стимулирования овариальной активности
Группа | Число коров с фолликулами в яичниках | Проявило признаки охоты | Количество желтых тел в яичниках и концентрация прогестерона в крови коров на 10-й день после обработки | Количество безрезультативных обработок | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Полноценное желтое тело | Неполноценное желтое тело | |||||||||||
n | % | n | % | n | % | M±m | n | % | M±m | n | % | |
I группа, n=20 | 13 | 65,0±10,67 | 9 | 45,0±14,22 | 6 | 30,0±10,25 | 5,0±0,33 | 6 | 30,0±10,25 | 0,2±0,06 | 8 | 40,0±10,95 |
II группа, n=20 | 15 | 75,0±9,68 | 11 | 55,0±14,12 | 6 | 30,0±10,25 | 3,9±0,20* | 10 | 50,0±11,18 | 0,7±0,10** | 4 | 20,0±8,94 |
III группа, n=20 | 16 | 80,0±8,94 | 11 | 55,0±11,12 | 6 | 30,0±10,25 | 3,9±0,19* | 8 | 40,0±10,95 | 0,5±0,11* | 4 | 20,0±8,94 |
IV группа, n=20 | 20 | 100,0±0,00 | 10 | 50,0±11,28 | 10 | 50,0±11,18 | 4,93±0,38 | 10 | 50,0±11,18 | 0,6±0,08** | – | – |
Всего по группам: | 64 | 80,0±4,47 | 42 | 52,5±5,58 | 28 | 35,0±5,33 | – | 34 | 42,5±3,53 | – | 16 | 22,5±4,67 |
* – P <0,05; ** – P <0,01
Анализ данных показывает, что образование фолликула после обработки не гарантирует проявления клинических признаков охоты, в то же время наличие признаков охоты не означает ее нормального течения, что и подтверждается образованием неполноценных желтых тел.
Вследствие этого будет правильным констатировать лишь 35%-ную эффективность проведенных обработок, отражающую долю коров с полноценным желтым телом в одном из яичников.
Причем эффективность обработок не зависела от дозы вводимого препарата.
Учитывая данное обстоятельство, мы предположили, что результат обработок будет находиться в зависимости от стадийности деструктивных процессов в яичниках проблемных коров, которая обусловит специфику уровней концентрации прогестерона.
При значении концентрации более 1,0 и от 0,5 до 1,0 патологию следует дифференцировать как начальную и промежуточную стадию, соответственно, а значения до 0,5 нг/мл соответствуют конечной стадии структурных и функциональных изменений.
Три группы коров, распределенных по этим признакам, мы обработали внутримышечно инъекциями ГСЖК (1200 ИЕ) и эстуфалана (500 мкг).
В этом опыте всех коров, проявивших признаки охоты, мы искусственно осеменили. Результат подтвердил наше предположение: если в 1 и 2 группе мы получили положительные результаты, то в 3-ей – показатели, как по числу проявивших признаки охоты, так и числу плодотворно осемененных коров оказались негативными. Объективно это подтверждают и соответствующие значения концентраций прогестерона (табл. 35 и рис. 19).
Дополнительно необходимо подчеркнуть, что коровы 1 и 2-ой групп, не ставшие стельными после первого осеменения, были плодотворно осеменены в последующую, спонтанную охоту, в то время как аналогичные представители 3-ей группы остались бесплодными. Учитывая низкую эффективность примененного метода на животных 3-ей группы, мы модифицировали воздействие дополнительным включением в схему хориогонического гонадотропина (ХГЧ) в дозе 1000 ед. за 9 дней до введения ГСЖК и эстуфалана. Модификация, примененная на 13 коровах с гипофункцией яичников на 3-ей стадии, привела к возобновлению цикличности у 66,7% и плодотворному осеменению 58,3% от числа пришедших в охоту.
Таблица 35
Стимулирование овариальной активности на разных стадиях патогенеза
Стадии развития | Исходная концентрация прогестерона | Результативность стимуляции | Уровень оплодотворяемости от 1 осеменения | Средняя концентрация прогестерона (нг/мл) на 13-й день | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
Проявившие признаки охоты | стельные | не стельные | при негативной реакции на обработку | ||||||
нг/мл | n | % | n | % | M±m | M±m | M±m | M±m | |
I группа, n=20 | более 1,0 | 18 | 71,0±10,15 | 10 | 50,0±11,18 | 3,9±0,31 | 5,1±0,90 | 2,8±0,20 | 1,0±0,11 |
II группа, n=20 | 0,5 – 0,99 | 17 | 80,9±8,79* | 10 | 50,0±11.18 | 3,8±0,30 | 5,0±0,61 | 2,1±0,16* | 0,8±0,08 |
III группа, n=20 | до 0,5 | 9 | 45,0±11,12 | 3 | 37,5±10,83 | 3,3±0,80 | 4,9±1,11 | 1,8±0,23* | 0,5±0,11** |
Продолжение · 23
* – P <0,05; ** – P <0,01
Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что при определении способа стимуляции яичников при гипофункции следует учитывать уровень концентрации прогестерона.
Рис. 19. Содержание прогестерона в сыворотке крови коров на 13-й день инъекции
Использование ГСЖК и эстуфалана эффективно при значениях не ниже 0,5 нг/мл. При более низких концентрациях в схему обработки целесообразно включать ХГЧ в дозе 1000 ед.
7.2.2.7. Использование простагландинов для восстановления циклической активности яичников коров после отела
С точки зрения теории и практики большую проблему представляет собой то-обстоятельство, что уровень молочной продуктивности коров в значительной степени влияет на их репродуктивную активность в первые месяцы после отела.
При этом высокая молочная продуктивность отрицательно сказывается на результативности ранних после отела осеменений, что удлиняет сервис-период, увеличивает число дней бесплодия, а, в конечном счете, приводит к значительным финансово-экономическим издержкам.
Низкую оплодотворяемость коров при первом после отела осеменении (характерную даже для стран с высокоразвитым животноводством и, в лучшем случае, не превышающую 62%) во многом объясняют наличием субклинической патологии гениталий, включающую гипофункциональное состояние яичников и неполноценные половые циклы: анэстральный, ареактивный, алибидный и ановуляторный [244; 216].
При этом полная инволюция матки может задерживаться в зависимости от продуктивности коров на 2 – 3 и больше месяцев.
Результативность осеменений возрастает с увеличением периода от отела до осеменения: если в первый месяц показатель результативности может не превышать 10,0-36,5%, то через три месяца этот показатель возрастает до 63-66%.
Однако это не означает, что перенос сроков осеменения на более поздний период, т.е. направленное удлинение продолжительности сервис-периода, положительно скажется на производственных показателях в целом по всему стаду.
Удлинение сервис-периода приводит к увеличению межотельного интервала, что отрицательно сказывается, во-первых, на производстве молока (из расчета на один день межотельного периода), а, следовательно, на продуктивности всего стада.
Во-вторых, удлинение сервис-периода сверх оптимального будет отрицательно отражаться на воспроизводстве совокупного стада, что не способствует его расширенному воспроизводству [90].
Таким образом, в настоящее время вопросы о сроках осеменения коров после отела и о стимуляции возобновления циклической функции яичников остаются открытыми [110; 111].
Как правило, на 12-е сутки после овуляции наступает регрессия желтого тела, сопровождающаяся постепенным снижением его эндокринной функции, которая до наступления этого срока носит патологический характер.
Данное нарушение функции желтого тела чаще наблюдают в период становления циклической активности яичников после отела (частота данной патологии в ранний период отела может достигать 14,2%, в поздние сроки – до 3,6%).
После отела коров методом ректальной пальпации, т.к. они плохо выражены в связи со структурной и функциональной недостаточностью, желтых тел в яичниках не находят. В свою очередь недостаточная функциональная активность желтого тела после ранней охоты (которая, как правило, проходит без клинически выраженных признаков), тормозит нормальную инволюцию воспроизводительной функции [144; 98].
Учитывая, что «пусковым механизмом» подавляющего большинства нарушений воспроизводительной функции коров являются тяжелые роды, большое внимание уделяют изучению проблем, связанных с осложнениями воспалительного характера, протекающими на всем продолжении послеродового периода и после его окончания.
После тяжелых отелов коровы, как правило, имеют осложнения в виде острых эндометритов, переходящих в хронические.
Изучение проблемы послеотельных и более поздних нарушений воспроизводительной функции проводят дифференцированно, учитывая два относительно самостоятельных направления - структурные нарушения воспалительного характера и нарушения генеративной функции яичников.
Распространенность нарушений послеродового периода (инволюция матки, эндометриты) может достигать 70%.
Изучение распространенности эндометритов у коров свидетельствует, что наиболее часто в послеродовой период регистрируют следующие патологии: субинволюцию матки (41,6%) и эндометриты (36,5%), которые возникают, как правило, вследствие задержания последа.
Установлена сезонность этих заболеваний. Чаще послеродовым эндометритом болеют коровы в летне-осенний период, что составляет 40,4 – 50,1% от всех заболевших в течение года.
Это, по-видимому, обусловлено периодическим повышением температуры окружающей среды, что, как известно, способствует снижению резистентности организма животных.
Особую проблему представляют коровы, у которых процесс принял субклиническую форму течения.
Учитывая, что диагностика субклинической формы эндометрита возможна только гистологическим исследованием биоптатов эндометрия, а это в производственных условиях проблематично, на фермах накапливается большое число бесплодных коров, у которых отсутствуют клинические признаки патологии репродуктивной системы. В подобной ситуации стимулированный эструс рассматривают как существенный фактор восстановления эндометральных структур [64; 206].
Поэтому большой интерес представляют биотехнические мероприятия по гормональной стимуляции начала циклической активности яичников, что в определенном смысле можно рассматривать как метод лечения и профилактики эндометритов.
Для стимуляции эструса применяют аналоги простагландина F2α. Было установлено, что в результате сокращения маточной мускулатуры под действием экзогенных простагландинов достигается высокая степень санирующего эффекта полости матки.
Это происходит благодаря тому, что течковая слизь при стимулированном простагландинами эструсе обладает высокими бактериостатическими и бактерицидными свойствами [258]. Для обработки предусмотренных животных в комплексе с другими биорегуляторами аналоги простагландина вводили при наличии хорошо выраженного желтого тела в одном из яичников.
Клиническими симптомами эндометрита считали значительное увеличение обхвата матки при одновременном персистентном желтом теле.
При анализе результатов учитывали долю животных, возобновивших половую цикличность, эффективность двух осеменений, интервалы от отела до начала обработок и от начала обработок до плодотворного осеменения.
Проведенные исследования показали, что фактически число коров в состоянии анэструса в отдельных хозяйствах может достигать 10-60% и выше от числа лактирующих коров, до 52% после отела и до 68% после безрезультатных осеменений.
Из 534 обработанных простагландинами коров восстановили половую цикличность 82,2% (Р <0,001), 54,7% (Р <0,001) были плодотворно осеменены в среднем в течение 21,6 дней (табл. 36 и рис. 20-22).
Использование традиционных методов позволило восстановить половую цикличность лишь у 205 коров из 340.
Оплодотворяемость после двух осеменений у коров составило 35,4%, а средний интервал в днях от обработок до оплодотворения составил 29,3. Введение простагландина коровам при отсутствии половой цикличности после осеменения положительно влияло на восстановление половой цикличности и эффективность осеменения [10].
Так использование простагландина позволило восстановить половую цикличность у 184 коров из 220, оплодотворяемость после двух осеменений составило 52,6% (Р <0,001).
При использовании традиционных методов восстановили половую цикличность лишь половина из обработанных животных, оплодотворилось при этом лишь 41 корова (29,2%).
Хорошие результаты были получены после применения простагландина эндометритным коровам. Так при использовании простагландинов оплодотворились после двух осеменений из 70
Таблица 36
Данные по применению аналога простагландина F2α в сравнении с традиционными методами лечения
Показатель | Традиционные методы технологии воспроизводства | Простагландин F2α |
Отсутствие половой цикличности после отела | ||
Число коров, n | 340 | 534 |
Восстановление половой цикличности, % | 60,4±2,65 | 82,2±1,66*** |
Общий показатель оплодотворяемости после 2-х осеменений, % | 35,4±2,59 | 54,7±2,15*** |
Средний интервал в днях от отела до начала обработок, M±m* | 77,2±85,6 | 95,2±10,14 |
Средний интервал в днях от обработок до оплодотворения, M±m* | 29,3±4,21 | 21,6±3,41 |
Отсутствие половой цикличности после осеменения | ||
Число коров, n | 140 | 220 |
Восстановление половой цикличности, % | 50,7±4,23 | 83,5±2,50*** |
Общий показатель оплодотворяемости после 2-х осеменений, % | 29,2±3,84 | 52,6±3,37*** |
Средний интервал в днях от отела до начала обработок, M±m* | 114,0±20,11 | 140,0±28,03 |
Средний интервал в днях от обработок до оплодотворения, M±m* | 38,0 ± 4,63 | 12,9±2,36*** |
Эндометриты | ||
Число коров, n | 57 | 76 |
Общий показатель оплодотворяемости после 2-х осеменений, % | 34,0 ± 6,12 | 60,0 ±5,62** |
Средний интервал в днях от отела до начала обработок, M±m* | 71,4±7,52 | 73,9±8,62 |
Средний интервал в днях от обработок до оплодотворения, M±m* | 76,0±6,99 | 42,8±49,97** |
* - P <0,05; ** - P <0,01; *** - Р <0,001
эндометритных коров 46, а при использовании традиционных методов лечения 19 из 57 голов.
Средний интервал в днях от обработок до оплодотворения при использовании простагландинов составил 42,8, а при традиционных методах – 76,0.
Сравнение с приводимыми в литературе аналогичными показателями выявило значительное преимущество применения простагландина [11].
С практической точки зрения контроль за течением послеродового периода обусловлен необходимостью ускорить подготовку организма коров к очередному циклу воспроизводства.
В этом смысле большое значение приобретает направленная инициация циклической активности яичников.
Установлено, что начало циклического функционирования яичников через промежуток времени, равный продолжительности полового цикла, то есть на 18-24 день после отела, обусловливает оптимальную гормональную ситуацию, которая, в свою очередь, обеспечивает окончательную инволюцию половых органов и готовность репродуктивной системы к плодотворному осеменению и новой стельности.
Однако проведением регулярных ректальных исследований нами было установлено, что первая овуляция наступает в среднем на
14-40 день после отела и клинически выраженными признаками может не проявляться у 50% коров.
Яичники в состоянии функционального покоя, регистрировали у 35-40% коров.
Ряд исследователей рассматриваемое состояние квалифицируют, как временный застой цикла.
Для практических работников очень важно дифференцировать постфизиологическую ациклию от гипофункции яичников, которую регистрируют, как правило, у коров по 1 и 2-ой лактации, в то время как постфизиологическая ациклия может иметь проявление в любом возрасте [75; 76].
С целью сравнения показателей плодовитости у коров при временном застое цикла после спонтанного и стимулированного восстановления половой цикличности нами были отобраны контрольная и опытная группы животных.
Таблица 37
Результаты инициации овариальной активности при
постфизиологической ациклии
Показатель | Число коров | Срок проявления 1 охоты, дней | Оплодотворяемость после 1-го осеменения | Общая плодотворность осеменений | Сервис-период | Индекс осеменения | ||
n | M±m | n | % | n | % | M±m | ||
I группа | 40 | 60,1±7,74 | 8 | 20,0±7,90 | 18 | 47,5±7,90 | 119,0±17,41 | 2,3±0,30 |
II группа | 40 | 21,1±6,45 *** | 20 | 50,0±7,91 ** | 38 | 95,0±3,45 *** | 81,9±6,31 * | 1,6±0,10 * |
* – P <0,05; ** – Р <0,01; *** – Р <0,001
Опытной группе возобновление овариальной активности стимулировали введением ГСЖК (1000 ИЕ) и эстуфалана (500 мкг). Наблюдением фиксировали срок проявления признаков первой охоты и далее наблюдения проводили еще на протяжении 2-х циклов. Коров осеменяли искусственно согласно утвержденной инструкции.
В целом за 3,5 месяца после начала опыта в контрольной группе стельность наступила у 19 коров (47,5%). Сервис-период составил свыше 121 дня при индексе осеменения 2,3. У животных опытной группы аналогичные показатели выгодно отличались и были близки к общепринятым нормативным (табл. 37).
Таким образом, полученные результаты аргументируют целесообразность стимуляции овариальной активности у коров после отела.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Интенсификация животноводства и перевод его на промышленную основу особенно остро выдвигают перед биологической наукой проблему управления процессом воспроизводства у сельскохозяйственных животных.
Это обусловлено как возросшими требованиями к ритмичному получению приплода, так и особенностями проявления репродуктивной функции у животных в условиях новой технологии их содержания.
Современные технологии, применяемые в животноводстве, связаны с рядом воздействующих на животных стресс-факторов, отличающихся по характеру, мощности и продолжительности. Высокий уровень экстремальных воздействий приводит к функциональным нарушениям, в том числе и нарушениям репродуктивной функции.
Более чем у 30 % коров после отела регистрируют задержание последа, приводящее к субъинволюции матки, которая неизбежно осложняется эндометритами.
В свою очередь, параллельно эндометритам, как правило, возникают нарушения гормональной и генеративной функции яичников. В первые месяцы после отела у 30 - 35 % животных регистрируют гипофункцию и другие формы овариопатологии.
Оплодотворяемость в подобных стадах не превышает 40%, а уровень выбраковки достигает до 30%.
В создавшихся условиях, при различных уровнях интенсивности технологий, недостаточно решаются проблемы воспроизводства поголовья.
В связи с ухудшением условий содержания, кормления и ветеринарного обслуживания резко увеличивается число «проблемных» коров неизбежно ведущее к снижению темпов воспроизводства стада и, как следствие, уменьшению надоев молока. Так, в молочном скотоводстве выход телят на 100 коров составляет 60 - 70 голов.
В настоящее время в нашей стране и за рубежом ведутся широкие исследования по направленной регуляции и коррекции нарушений функции размножения крупного рогатого скота применением гормональных препаратов. Синхронизация половой функции сельскохозяйственных животных представляет собой новый биотехнический прием. Он позволяет планировать и рационализировать процесс воспроизводства: снизить затраты труда и проводить осеменения в сжатые сроки.
В последние 2-3 десятилетия биологическая наука сделала большой шаг в этом направлении. Синтезирован ряд аналогов ПГF2α и гонадотропин-рилизинг-гормона, обладающих высокой биологической активностью.
В настоящее время для регуляции и коррекции нарушений репродуктивной функции сельскохозяйственных животных широкое применение нашли простагландины.
На первом этапе наших исследований основной задачей было определение эффективной дозы анипроста. Поэтому мы начали свои исследования с лабораторных опытов.
Всего было проведено четыре лабораторных опытов.
Опытами 7.2.1.1. и 7.2.1.2. установлено, что анипрост обладает высокой лютеолитической активностью. Результаты опыта (табл. 1) показали, что все испытанные дозы анипроста снижали содержание прогестерона в крови телок.
Между дозой препарата и скоростью снижения прогестерона установлена прямая связь: инъекция анипроста в дозах 50, 100, 150, 200 и 240 мкг снизила концентрацию прогестерона в крови через 24 часа после введения на 59,9; 68,3; 75,3; 77,4; и 85,4% от исходного уровня соответственно.
В нашем опыте анипрост в дозе 240 мкг не уступал в лютеолитической активности рекомендуемой дозе эстрофана (500 мкг). Так, после введения эстрофана и анипроста телкам снижение концентрации прогестерона в крови через 24, 48 и 72 часа составило 55,1; 85,4; 70,7; 92,7 и 71,1; 99,0% от первоначального уровня соответственно. Для более полной оценки биологических свойств использованных препаратов был проведен опыт 2.3.1.2.
Инъекция телкам анипроста в дозах 100, 140, 200 и 240 мкг синхронизировало охоту у 80-83,4% животных.
Наибольшая синхронность охоты получена при использовании анипроста в дозе 240 мкг.
Продолжение · 24
Очень низок процент прихода в синхронную охоту телок после инъекции смеси допростона-В и ПГF2α.
В синхронную охоту после введения 25 мг ПГF2α пришли 50% телок, по-видимому, испытанная доза была недостаточна.
Для подтверждения полученных данных был проведен дополнительный опыт 7.2.1.3. Из таблицы 4 видно, что по лютеолитической активности в первый цикл анипрост превосходил эстрофана.
У некоторых телок подгруппы «б» перед введением простагландинов выявлен низкий уровень прогестерона, хотя была тщательно определена продолжительность полового цикла. Очевидно, это связано с неустойчивой продолжительностью полового цикла у телок 14-16 мес. возраста, инъекция им анипроста и эстрофана (табл. 5) синхронизировала охоту у 91,7%, продолжительность полового цикла составила в среднем 11,3 дня.
В наших исследованиях было установлено, что допростон-В не обладает лютеолитическим действием (табл. 1, 4) и не синхронизирует охоту у телок (табл. 3, 5).
В опыте 7.2.1.4. мы провели сравнительную оценку лютеолитической активности оптимальной дозы анипроста с рекомендуемыми дозами анипроста и лютализа.
Результаты опыта (табл. 6) показали, что концентрация прогестерона через 12 часов после инъекции энзапроста, анипроста и лютализа снизилась на 62, 61 и 52% соответственно.
Полученные данные (табл. 1-6) показали, что анипрост в дозе 250 мкг обладает такой же лютеолитической активностью и синхронизирующим охоту действием, как и аналоги простагландина F2α зарубежного производства в рекомендуемых дозах.
Данные, аналогичные нашим, были получены и другими исследователями. Так, в опытах Дьяконова Е. [и др.], [17] через 24 часа после инъекции 25 мг ПГF2α на 10 день полового цикла содержание прогестерона в крови телок снизилась с 2,68 нг/мл до 0,31 нг/мл, через 48 часов – до 0,11 нг/мл.
У коров и телок инъекция эстрофана в дозе 500 мкг снижает уровень прогестерона в сыворотке крови через 24 часа после обработки с 17,33 нг/мл до 1.59 нг/мл [151].
После инъекции эстрофана уровень прогестерона в крови коров через 20 часов снизился с 9-11 нг/мл до 2,0 нг/мл [337].
У коров инъекция эстрофана снижает концентрацию прогестерона в крови через 24 часа после инъекции с 4,40 нг/мл до 0,34 нг/мл, а через 72 часа – до 0,06 нг/мл [261]. У телок инъекция ПГF2α снижает содержание прогестерона в течение 24 часов с 5,74 нг/мл до 0,80 нг/мл, через 48 часов – до 0,30 нг/мл, а через 72 часа – до 0,06 нг/мл [262].
В опытах Spicer L.J. с соавторами [346] установили, что инъекция 500 мкг клопростенола снизила концентрацию прогестерона в крови телок через 12 часов на 75%.
Инъекция ПГF2α на 10 день полового цикла снизила содержание прогестерона в крови через 24 часа с 6,00 нг/мл до 1,29 нг/мл, 48 часов – до 1,00 нг/мл, 72 часа – 0,83 нг/мл [268].
По данным Zuis T.M. с соавторами [379] после инъекции ПГF2α концентрация прогестерона в крови коров снизилась через 12, 24, 48 и 72 часа с 3,6 нг/мл до 1,7; 1,2; 1,0 и до 0,8 нг/мл соответственно.
По данным Ермолова Б.Н. [и др.], [79] после инъекции ПГF2α в середине полового цикла, концентрация прогестерона в сыворотке крови у телок через 24 часа снизилась с 3,0 нг/мл до 0,5 нг/мл, через 48 часов – до 1,5 нг/мл, через 72 часа – до 0,5 нг/мл и через 96 часов – до 2,2 нг/мл.
После инъекции аналога ПГF2α в дозах 1,0; 0,8; 0,5; 0,3 и 0,2 мг коровам и телкам в течение 5 дней в охоту приходили все животные, а при 0,1 мг 3 головы из 10 обработанных [354].
В опытах BetteridgeK.J. с соавторами [155] после однократной или двукратной инъекции аналога ПГF2α АУ-24655 в дозе 50 мг в течение 2-3 дней пришло в охоту 3 из 5 и 8 из 10 телок соответственно, а в дозе 100 мг – все.
Инъекция аналога ПГF2αальфа-простенола в дозах 5, 6, 7 и 8 мг на 10-11 день полового цикла синхронизировала охоту у 50; 50; 67 и 100% коров соответственно [232].
Kaneda I. с соавторами [249] сообщают, что синхронность прихода телок в охоту в течение 5 дней после инъекции 15 мг ПГF2α и аналога простагландина F2α и аналога простагландина F2α ONO-1052 в дозах 500 и 800 мкг составила 84,0; 98,0 и 90,2% соответственно.
После введения ПГЕ1 уровень прогестерона в крови коров увеличивается и происходит грануляция крупных лютеальных клеток [187].
В наших исследованиях допростон-В не обладал синхронизирующим эффектом, однако есть литературные данные, сообщающие о его незначительном стимулирующем действии.
В частности, опыты, проведенные на коровах [13] и на овцах [2] показывают, что ПГЕ1 обладает слабо выраженным синхронизирующим эффектом, приход в охоту в обоих случаях не превышал 40%.
После определения оптимальных доз анипроста в лабораторных опытах, нами было проведено научно-производственное их испытание (табл. 7).
После инъекции 240 мкг анипроста и 500 мкг эстрофана в лютеальную фазу цикла, в течение 5 дней пришло в охоту 95 и 90% телок соответственно.
Повторная инъекция через 11 дней синхронизировало охоту у всех животных. Оплодотворяемость от первого осеменения составила 75 и 60%, а за два цикла 75 и 75% соответственно (в контроле – 55 и 65%).
В следующем опыте (табл. 8) дозу анипроста снизили до 200 мкг. При этом синхронность прихода телок в охоту как после 1-ой инъекции, так и после двух обработок значительно снизилась – до 67,5 и 95,0% соответственно, очевидно эта доза оказалась низкой для обеспечения оптимальной синхронности.
Оплодотворяемость от осеменения в первый и за два цикла выше у телок опытной группы на 2,4 и 7,9% соответственно.
Таким образом, на основании проведенных исследований было установлено, что эффективной дозой анипроста является 240-250 мкг.
В своих исследованиях мы использовали анипрост в дозах 240 и 250 мкг, что было связано с различными расфасовочными дозами препарата.
В дальнейшем нами было проведено два опыта (7.2.2.1) по синхронизации охоты и овуляции у телок с использованием анипроста в дозе 250 мкг.
Все опытные животные находились на разных стадиях полового цикла, у незначительной части животных в яичниках не пальпировались желтые тела и фолликулы (гипофункция).
После инъекции анипроста (табл. 9 и 10) в течение 5 дней пришло в охоту 83,3 и 86,7% телок соответственно. Приход в охоту после двух инъекций в обоих опытах составил 100%. Оплодотворилось от первого осеменения в обоих опытах по 63,3% (в контроле – 50,0 – 60,0%). За два цикла оплодотворяемость в опытных группах была выше, чем в контроле на 6,7%.
Данные, аналогичные нашим, были получены М. Vucko с соавторами [249], H.J. Voss с соавторами [367] и G.J. King с соавторами [256].
В опытах Шарапа Г.С. [128] после инъекции эстрофана пришли в охоту 89,6% телок, в том числе в течение четырех дней 84,0%, оплодотворились от первого осеменения 64,7%.
По данным l.J. Zaora с соавторами [376] оплодотворяемость телок, осемененных в синхронизированную клопростенолом охоту, составила 60,2%.
Molntosh D.A. с соавторами [286], проанализировав все известные публикации о влиянии инъекции клопростенола на оплодотворяемость крупного рогатого скота, при осеменении в выявленную охоту, сообщают, что оплодотворяемость у обработанных животных, выше на 7%, чем у необработанных.
Аналогичные данные получили F. С. Katzer соавторами [252] и В.Е. Seguin с соавторами [336].
После инъекции эстрофана и энзапроста пришло в охоту 91,7% и 97,0% телок и оплодотворилось 66,7 и 68,8% соответственно, против 54,5 и 46,2% в контроле [137].
Для практического решения целесообразности применения простагландинов важно было изучить влияние многократных инъекций ПГF2α на дальнейшую воспроизводительную функцию телок.
С этой целью нами были проведены исследования по изучению влияния инъекций ПГF2αв течение 10 индуцированных половых циклов, на дальнейшую воспроизводительную функцию телок дослучного возраста.
До шестой инъекции (табл. 12) все телки синхронно приходили в охоту через 48-120 часов после инъекции. Не пришли в охоту после шестой инъекции эстрофана и анипроста 1 и 3 соответственно, седьмой и десятой инъекции анипроста – 1 и 4 телок.
Эти данные согласуются с результатами ректальных обследований. Так, у телок, не пришедших в охоту после шестой, седьмой и десятой инъекции, яичники находились в состоянии гипофункции или имели старые желтые тела.
Очевидно, причиной этого явилась пониженная гормональная активность яичников, вызванная интенсивной гормональной деятельностью их в предыдущие циклы, а также ухудшение кормления, связанного с переходным периодом.
За период опыта (табл. 12) синхронность прихода в охоту телок, обработанных эстрофаном и анипростом, составила 99 и 92% соответственно. Пик прихода в охоту приходился на 48-762 часа после инъекции. В период четвертой, седьмой и десятой инъекции у 9 телок брали кровь перед и через 24 и 48 часов после введения препаратов.
У контрольных животных кровь брали также в лютеиновую фазу. В образцах крови определяли содержание прогестерона (табл. 15). Концентрация прогестерона у телок контрольной группы в период 4-ой и 7-ой инъекции через 24 часа после первого взятия увеличилась на 105,6 (Р <0,05) и 35,9%, а через 48 часов на 83,3 и 59,0% от исходного уровня соответственно.
Это связано с увеличением гормональной активности жёлтого тела с 5-го по 17-й день спонтанного цикла.
Данные, аналогичные нашим, были получены Григорьевым М.Ю. с сотрудниками [30].
Достоверное снижение концентрации прогестерона у телок после инъекции эстрофана наступило в период четвертой обработки, анипроста – в период седьмой.
Низкое содержание прогестерона в крови телок перед десятой инъекций, по-видимому, объясняется ухудшением кормления, связанного с переходным периодом.
После десятого введения простагландина F2α все животные были осеменены по приходу в охоту (табл. 16).
Оплодотворяемость телок I, II и III групп за 2 цикла и от трех и более осеменений составила 70, 100, 80 и 90, 100, 100% соответственно.
Сервис-период у первотелок, инъецированных эстрофаном и анипростом в течение 10 индуцированных половых циклов был короче на 51,4 и 38,5 дня соответственно, чем у контрольных.
Многократное введение ПГF2α для синхронизации охоты и овуляции не оказало отрицательного действия на дальнейшую воспроизводительную функцию телок.
После шестикратного введения простагландина F2α телкам нарушения функции яичников не было [334].
Чомаев А.М. [125] сообщает, что восьмикратная инъекция ПГF2α не оказала отрицательного действия на последующую воспроизводительную функцию телок.
На комплексе по направленному выращиванию нетелей «Кутьино» число телок с «тихой охотой» в осенне-зимний период составляет 25-30%, а в весенне-летний снижается почти в два раза. Это снижение, очевидно, связано с наличием зеленых кормов и активным содержанием животных на пастбищах.
Одной из частых причин анэструса, по мнению многих исследователей, является гипофункциональное состояние гипоталамо-гипофизарно-гонадальной системы, сопровождающееся так называемой ациклией яичников.
Нами было проведено семь опытов (7.2.2.3.1 и 7.2.2.3.2) по синхронизации и стимулированию половой функции у анэстральных телок.
Литературные данные по эффективности синхронизации охоты и овуляции у анэстральных телок и коров противоречивы.
Так, в опытах V.W. Busch с соавторами [367] после инъекции ПГF2α пришло в охоту 72-100% коров и телок с персистирующим жёлтым телом, оплодотворилось 22,7-70,2% из них.
Инъекция ПГF2α коровам в длительном анэструсе синхронизировала охоту у 10% животных, оплодотворяемость инъецированных животных колебалась от 30 до 43%, а в контроле составила в среднем 33%) [284].
По данным A.R. Johnson [246] после внутримышечного введения эструмата и лютализа коровам, не приходившим в охоту более 45 дней, в синхронную охоту пришло 42,3 и 61,5% из них и оплодотворились 20,8 и 45,8% соответственно.
Большие колебания в результатах опытов по синхронности прихода в охоту и оплодотворяемости, полученных разными исследователями, можно объяснить различными видами патологии яичников у телок с ослабленными половыми функциями, а также применением различных препаратов ПГF2α.
В наших исследованиях (табл. 18-24) приход в синхронную охоту и оплодотворяемость от 1-го осеменения колебались от 59,1 до 77,8% и от 38,5 до 69,2% соответственно.
Из использованных нами аналогов ПГF2α для синхронизации охоты и овуляции наиболее эффективным оказался анипрост.
Так, в течение 5 дней после инъекции анипроста пришли в охоту 72.2% телок, после введения эстрофана и эстуфалата – 68,8 и 59,1% соответственно. Оплодотворяемость за два цикла после введения анипроста, эстрофана и эстуфалата составила 71,8; 60,6 и 69,2% соответственно. Использование аналогов ПГF2α для синхронизации охоты и овуляции телок, не приходивших в охоту в течение 25 дней, позволило вызвать синхронную охоту у 68,6% из них.
Телки, не оплодотворившиеся в синхронную охоту, через 18-23 дня вновь пришли в охоту, т.е. у них произошла нормализация половой цикличности. За 26 дней после инъекции ПГF2α стали стельными 65,3% телок (от числа пришедших в охоту), в контроле – 61,6% за 42 дня.
Аналогичные результаты в своих исследованиях получил Seguin В. [335].
После инъекции клопростенола коровам при отсутствии выраженных признаков охоты, пришло в охоту 67% и оплодотворилось 55%.
В другом опыте после однократного внутримышечного введения 25 мг динопроста коровам в длительном анэструсе синхронность прихода в охоту составила 81%, а оплодотворяемость 50% [202].
После инъекции ПГF2α коровам и телкам в анэструсе оплодотворяемость составила 57,5%, в контроле – 46,7% [183].
В связи с широким использованием простагландинов для направленной регуляции репродуктивной функции крупного рогатого скота, изучение влияния их на течение беременности и развитие плода является важной и необходимой задачей.
Наши исследования (табл. 25) показали, что использование ПГF2α для синхронизации охоты не оказывает влияния на продолжительность стельности и живую массу телят при рождении.
Из первотелок, обработанных анипростом в дозе 250 мкг, абортировало 1,8%, в других группах случаев аборта не было.
Мертворожденных телят в опытных группах было значительно меньше, чем в контроле.
По данным P.S. Jackson [240] при внутримышечном введении клопростенола период полураспада его в крови составил 3 часа.
Очевидно, коротким периодом полураспада и объясняется отсутствие влияния ПГF2α на последующие репродуктивные показатели телок.
За последние годы получено много данных, подтверждающих безвредность применения ПГF2α для синхронизации охоты у крупного рогатого скота. Swensson Т. [353] сообщает, что 3-летнее изучение показателей плодовитости телок, ранее подвергавшихся инъекции ПГF2α, не выявило снижения плодовитости, по сравнению с необработанными.
Аналогичные данные в своих исследованиях на коровах получил P.S. Jackson [260].
У коров после инъекции ПГF2α оплодотворяемость в последующие 2 года была на 9% выше, чем у контрольных [288].
Зверева Г.В. [37] сообщает, что вследствие бесплодия в СССР ежегодно выбраковывается 24-27% коров.
Студенцов А.П. [108] считает, что ущерб от бесплодия превышает потери, наносимые всеми заразными и незаразными болезнями вместе взятыми.
Временное бесплодие коров и их яловость связаны с запаздыванием овуляции и ановуляторными циклами [95].
Амарбаев А.М. с соавторами [27] утверждает, что из-за гормональной недостаточности у 62,4% коров, из пришедших в охоту, не наступает овуляция. Поэтому большое практическое значение имеют полученные нами результаты по изучению влияния инъекции ПГF2α перед осеменением на ускорение наступления и стимулирования овуляции (табл. 26-28).
У четырех телок контрольной группы, пяти опытной отмечена высокая концентрация «остаточного» прогестерона (1,21-3,66 нг/мл). В контрольной группе, как и следовало ожидать (из-за неполноценной охоты) ни у одной из этих телок оплодотворение не наступило, а в опытной группе 4 телки из 5 были плодотворно осеменены.
По-видимому, инъекция ПГF2α снижением концентрации «остаточного» прогестерона способствовала дополнительному выбросу ЛГ гипофизом и этим стимулировала наступление овуляции.
Средняя концентрация прогестерона у телок контрольной группы была на 19,5% ниже, чем у телок опытной группы, однако оплодотворяемость от первого осеменения у телок опытной группы была на 21,4% выше, чем в контрольной.
На основании литературных данных следовало ожидать, что оплодотворяемость телок контрольной группы будет выше, чем опытной. При концентрации прогестерона в крови коров во время охоты 0,2 нг/мл оплодотворилось 60% из них, а при 0,8-1,0 нг/мл – 10-20% [180].
В наших исследованиях (табл. 26-28) при использовании метода ранней диагностики стельности по содержанию прогестерона в крови телок на 19-21 день после осеменения, точность диагностики стельности составила 93,8%, не стельности – 100%.
Результаты аналогичные нашим были получены в исследованиях Т. Пономарева [77] и I. König с соавторами [260].
По данным P. Boden [156] точность диагностики стельности у телок составила 88,9%, а нестельности – 92,3%.
Результаты научно-производственных опытов показали целесообразность применения простагландинов перед осеменением для повышения оплодотворяемости телок.
Так, инъекция допростона-В перед осеменением, многократно перегуливающим телкам (табл. 29) повышала оплодотворяемость за два цикла на 12%.
