6. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕЧЕБНОГО ПРЕПАРАТА ИЗ АМНИОТИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ
Способ относится к ветеринарии, к производству антимикробных биогенных лекарственных препаратов для лечения, и профилактики послеродовых заболеваний половых органов у коров.
Известен способ получения препарата из амниотической жидкости для использования ее при изготовлении биологической лечебной продукции, которую собирают в родильных домах от каждой, женщины роженицы в отдельные чистые флаконы, устанавливают групповую принадлежность, оставляют на 10 минут при комнатной температуре, фильтруют через бумажный обычный фильтр консервируя борной кислотой из расчета 1 грамм на 100 мл, храня при комнатной температуре, перед использованием разводят дистиллированной водой.
Недостатком этого способа является получение лекарственных препаратов при лечении коров с болезнями половых органов с низкой бактерицидной активностью, т.к. женская околоплодная жидкость собиралась или от абортированных искусственно плодов или в роддомах в период нормальных родов, но несла гетерогенную лечебную несовместимость при лечении коров.
Известен так же способ получения препарата ПДЭ (плацента денатурированная эмульгированная) при изготовлении которого используются ткани детской плаценты: ткань амниона, xopиона.
Недостатком этого способа является то, что при получении препарата добавляют химические вещества, приводящие к изменениям природных свойств белковых молекул нуклеиновых кислот, а так же при использовании диспергирования и эмульгирования происходит выделение капельно-жидкой фазы из растворов, что обычно сопровождается разрывом химических связей. Поэтому изменяются природные лечебные свойства препарата, теряя бактерицидный и стимулирующий эффект. Наиболее близким к настоящему изобретению по технико-биологической сущности достигаемому результату при использовании является способ получения лекарственных веществ из плаценты коров в жидком виде. Проводилось изготовление препарата из , натурального животного сырья. Жидкую составляющую из плаценты отделяют
путем нагрева в микроволновой печи в специальной посуде с перфорированным дном при этом жидкая составляющая отделяется самотеком а нагрев производят не выше 60°С, причем в качестве разбавляющей среды для жидкой фазы используют 0,9%ный раствор натрия хлорида .
Недостатком этого способа является то, что отделение (получение) жидкой составляющей из плаценты производят под действием микроволнового излучения, т.е. подвергая действующее лечебное начало плюсовой температурой выше температуры тела у животного (+39°С) а так же микроволновому облучению с активностью 900-1400 ватт трехкратной обработкой по 20 минут, и в четвертый раз обрабатывают кипячением, затем автоклавирование при 1,5 атм в течение 1 часа.
Такая термическо-микроволновая, магнитно-полярная обработка природных биологически активных веществ содержащих лечебные компоненты: ферменты, гормоны созданные природой в нанобиологических структурах теряют свои лечебные бактерицидные, бактериостатические свойства.
Задача, на решение которой направленно данное изобретение, заключается в создании способа получения лечебного препарата пригодного для внутриклеточной терапии воспалительных процессов слизистой оболочки и кожных резанных и ожоговых ран.
Цель изобретения - повышение лечебной эффективности
препарата изготовленного из фракций, из «долей» «хлебов»,амниотической жидкости и полученных методами гомогенизации, фильтрации, обладающего бактерицидным свойством, приводящим к гибели грамположительные, грамотрицательные вирусные микроорганизмы и патогенные грибы.
Поставленная цель достигается тем, что из формулы амниотическую жидкость извлекают у коров из матки с 4-5месячной стельностью. В этот период в амниотическойжидкости в «долях» и «хлебах» имеется максимальное количество стволовых клеток и плацентарных ферментов:лизоцима, комплемента, пропердина, разрушающих мембраныграмм положительных (одна оболочка) грамм отрицательных(две оболочки) микроорганизмов и вирусов.
Способ получения лечебного препарата производят в следующей последовательности:
- извлекают беременную матку с плодом из брюшной полости методом лапаротомии, и орошают матку, обеззараживая ее 1:1000 раствором марганцево-кислого калия; после гистерогомии, большой кривизны стенки рога матки плодовместилища разъединяем карункулы от котиледонов проводя дифференциацию амниотической полости от аллантоисной просматриваем в амниотической просветленной жидкости наличие включений: «долей», «хлебов», зачатковых эпителиальных клеток» и т.д.).
Амниотическая жидкость в матке с 4-5 месячным плодом имеет стволовые клетки и плацентарные бактерицидного бактериостатического значения ферменты. стерильной иглой соединенной резиновым шлангом со стерильной емкостью прокалывают амниохориалъную оболочку и отсасывают амниотическую жидкость вакуумированием (первая порция). Извлекаем плавающие в амниотической жидкости «доли» и «хлеба», которые являются скоплением большого количества стволовых клеток, зачатковых эпителиальных клеток (вторая порция) «доли» и «хлеба» гомогенизируют и к гомогенату добавляют 1:1 физраствор. Каждую подученную порцию отстаивают, фильтруют через фильтры, от 10 нм до 100 нм центрифугируют при 6000 об/мин, верхний слой лечебной жидкости сливают в емкости с притертыми крышками.
Препарат представляет собой опалесцирующую жидкость светло - желтого цвета, разливают каждую фракцию во флаконы 10, 50, 100, 250 см3 , укупоривают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками.
Полученный лечебный препарат испытывают на животных внутрь, подкожно, внутриматочно, наружно. Готовые жидкости препарата используют для приготовления мазей путем механического смешивания 10%, 30% с вазелином, ланолином, глицерином для лечения болезни влагалища, шейки матки, матки у коров с послеродовыми заболеваниями.
Практическое испытание предлагаемого препарата
Полученный и изготовленный в виде жидкостей и мазей препарат проверяют на лабораторных животных (мыши, крысы, кошки, кролики) на сельскохозяйственных животных (новорожденных телятах, коровы с послеродовыми болезнями (половых
30
