- извлекают беременную матку с плодом из брюшной полости методом лапаротомии, и орошают матку, обеззараживая ее 1:1000 раствором марганцево-кислого калия; после гистерогомии, большой кривизны стенки рога матки плодовместилища разъединяем карункулы от котиледонов проводя дифференциацию амниотической полости от аллантоисной просматриваем в амниотической просветленной жидкости наличие включений: «долей», «хлебов», зачатковых эпителиальных клеток» и т.д.).
Амниотическая жидкость в матке с 4-5 месячным плодом имеет стволовые клетки и плацентарные бактерицидного бактериостатического значения ферменты. стерильной иглой соединенной резиновым шлангом со стерильной емкостью прокалывают амниохориалъную оболочку и отсасывают амниотическую жидкость вакуумированием (первая порция). Извлекаем плавающие в амниотической жидкости «доли» и «хлеба», которые являются скоплением большого количества стволовых клеток, зачатковых эпителиальных клеток (вторая порция) «доли» и «хлеба» гомогенизируют и к гомогенату добавляют 1:1 физраствор. Каждую подученную порцию отстаивают, фильтруют через фильтры, от 10 нм до 100 нм центрифугируют при 6000 об/мин, верхний слой лечебной жидкости сливают в емкости с притертыми крышками.
Препарат представляет собой опалесцирующую жидкость светло - желтого цвета, разливают каждую фракцию во флаконы 10, 50, 100, 250 см3 , укупоривают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками.
Полученный лечебный препарат испытывают на животных внутрь, подкожно, внутриматочно, наружно. Готовые жидкости препарата используют для приготовления мазей путем механического смешивания 10%, 30% с вазелином, ланолином, глицерином для лечения болезни влагалища, шейки матки, матки у коров с послеродовыми заболеваниями.
Практическое испытание предлагаемого препарата
Полученный и изготовленный в виде жидкостей и мазей препарат проверяют на лабораторных животных (мыши, крысы, кошки, кролики) на сельскохозяйственных животных (новорожденных телятах, коровы с послеродовыми болезнями (половых
30
органов) на безвредность, токсичность, стерильность, эмбрионотоксичность, бактерицидность, фунгицидность, на раздражимость слизистых оболочек послеродовой матки у коров. Содержание гемолитического лизоцима, комплимента, пропердина мы изучали определяя их количество в получаемых фракциях и была определена бактерицидная их активность (таблица 1).
Таблица 1 – Бактерицидная активность пропердина,
комплемента, лизоцима
| Фермент | Возраст плода мес. | Процент бактерицидной |
|---|---|---|
| Пропердин | 3 | 4,8 |
| Пропердин | 5 | 11,0 |
| Комплемент | 3 | 42,84±9.10 |
| Комплемент | 5 | 87,74±11.90 |
| Лизоцим | 3 | 6,87±5,9 |
Из таблицы 1 видно что бактерицидная активность пропердина, комплемента, лизоцима, резко увеличивается к 4-5 месячному срока стельности коров. Поэтому использование фракций из амниотической жидкости и ее включений взятых в первой половине стельности является своевременным и целесообразным обладающим бактерицидными свойствами. К 5 месяцам стельности по сравнению с 3-х месячной стельностью увеличилась бактерицидная активность пропердина на 29,1%, комплемента на 104,8%, лизоцима на 48,4%.
При определении токсичности лечебного жидкого препарата г после его выпаивания мышам круглосуточно в течении 30 дней отражено в таблице 2.
Таблица 2 – Изучение острой токсичности амниотического препарата
| Испытуемые соединения, жидкости | Количество животных в группе | Доза мл | Погибло/выжило |
|---|---|---|---|
| Амниотический препарат | 5 | 150 | 0/5 |
| ПДЭ | 5 | 100 | 0/5 |
| L(Zd)=600,0 | 5 | 200 | 4/1 |
Из таблицы 2 видно, что кумулятивная возможность организма мышей к ПДЭ выше, чем при выпаивании жидкого лечебного препарата, судя по дозировке только после выпаивания 400 мл амниотического препарата пало через 30 дней одна опытная мышка. Телятам опытной группы перед выпаиванием молозива выпаивали 50 мл предлагаемого лечебного препарата.
Телятам опытной группы при откорме выпаивали по 50 мл лечебного препарата в течение 10 дней. Телятам контрольной группы препарат не давали.
Телятам опытной группы перед выпаиванием молозива выпаивали 50 мл предлагаемого лечебного препарата.
Телятам опытной группы при откорме выпаивали по 50 мл лечебного препарата в течение 10 дней. Телятам контрольной группы препарат не давали. Результаты отражены в таблице 3.
Таблица 3 – Прирост живой массы телят
| Группы | Телят, всего | Живая начало | масса, кг конец | Среднесуточные и прирост, г |
|---|---|---|---|---|
| Опытная | 24 | 35 | 70 | 420+0,91 |
| Контрольная | 24 | 40 | 80 | 450+4,20 |
Из таблицы 3 видно, что телята имели среднесуточный прирост на 30 г больше, чем телята контрольной группы.
Проводили лечение коров с послеродовым эндометритом, когда использовали 30% мазь из лечебного препарата. Каждой опытной корове в течение 7 дней в шейку матки вводили 100 мл мази. В контрольной группе больных коров в матку вводили ежедневно 5 шт. фурозолидоновых палочек. Результаты отражены в таблице 4, где во второй опытной группе коров в матку вводили ПДЭ по 50 мл.
Таблица 4 – Сравнительная характеристика лечебной эффективности на коровах с бесплодием
| Лечебный препарат в матку | Выздоровело | Из них стало стельными | |
|---|---|---|---|
| число | % | ||
| Мазь 30% амниотиче- ского препарата | У | 8 | 88,8+3,6 |
| Фурозолидоновые | 10 | 6 | 60,0+3,3 в |
| ПДЭ | 9 | 7 | 77,7+1,8 |
