для сбора крови а так же не повышает риск микробного заражения. Процесс сбора крови происходит без контакта с матерью быстро, не предоставляет никакого риска для мясной продукции убойных туш коров поступивших на убой с убойного цеха в цех переработки в холодильные камеры, потребителю.
Поголовье коров представлены убою в результате обанкротившегося хозяйства должно быть перед убоем подвергнуто диспансеризации по заразным и незаразным болезням. Способ выполняется следующим образом:
1. Сбор крови проводят в прокварцованном помещении.
2. Беременную матку с плодом кладут на металлический стол, дезинфицируют обливая раствором марганцевого кислого калия 1:1000.
3. Через продольный разрез стенки матки большого рога матки освобождают плод от детской и материнской плацент, от амниотической и аллантоисной жидкостей не травмируя пупочное кольцо, не ампутируя пуповину добиваясь свободной видимости головы, шеи, туловища плода.
4. Проводят осмотр и пальпацию яремного жлоба, прощупывая яремную вену в дальнейшем у плода находящегося в лежачем положении. Наружная яремная вена на шее плода расположена под кожей в яремном желобе образованном плечеголовной и грудоголовной мышцами. .
5. Одним движением руки вводят изогнутую со шлангом (№ 133) иглу в набухшую плодной кровью яремную вену лежащую в яремном желобе шеи плода. Для сбора крови из яремной вены у плода используют специальные стеклянные емкости или закрытые трансфузионные системы, содержащие антикоагулянт типа «Гемакон», «Baxter» оснащенные стерильной дренажной иглой, имеющей изгиб в 130°, соответствующий топографии вогнутости мышц яремного жолоба изгибаем до 130° что исключает препятствие для вытекания крови у плода находящегося в лежачем положении.
6. Троакаром оставляя гильзу удаляя стилет прокалывают стенку брюшной (возле диафрагмы), грудной полости ликвидируют вакуумное состояние, что способствует безпрепятственой транссудации крови по сосудам, через иглу введенную в яремную вену кровь вытекает в емкость с антиоксидантом.
Наличие вакуума в брюшной и грудной полости плода приводит к запустению кровеносных сосудов пуповины (по законам физиологии), поэтому медикам удается брать малые объемы пуповинной крови у только, что родившихся детей.
Наиболее обильное образование форменных элементов, ядросодержащих клеток, гемопоэтических и стромальных стволовых клеток, ферментов у плодов в крови достигает в середине беременности, а к концу внутриутробного развития (плодов уменьшается. Поэтом) наиболее рациональным является то, что кровь от плодов-телят необходимо собирать в 4-5 месячном возрасте в внутриутробного развития.
Практическое применение
Важнейшей характеристикой плодной крови является наличие в ней количеств ядросодержащих клеток. Образцы плодной крови мы подвергали методом подсчета лейкоцитов в формуле, подсчитывая на Световом микроскопе при стандартной окраске мазков по Романовскому. Исследования показали, что в пробах крови у плодов-телят имеется от 1-0,5x109 до 2x109 ядросодержащих клеток: лейкоцитов 7,24x109/л то 25,3x109/л, тромбоцитов (130x109/л до 410,1х109).
В последующем проводят фракционирование вытяжек для выделения ядросодержащих клеток из плодной крови центрифугированием супернатанта при 2000 об/мин, (20мин). Из фракционированной плодной крови после центрифугирования изготовили 10% мазь. Ежедневно эту мазь в течении 7 дней по 100 мл. вводили в канал шейки матки коровам с послеродовым гнойным цервицитом (Таблица 1).
Таблица 1 – Лечение послеродовых гнойных цервицитов у коров
| Способ лечения | Больных коров (всего) | Из них здоровело число | вы- % | 5 | Сроки выздоровления (дни) 10 | 15 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 10% мазь из фракционной плодовой крови после центрифугирования | 12 | 10 | 83,3 | 12 | 8 | 2/16,7% |
После использования фракционной мази из плодовой крови (таблица 1) в форме 10% мази коровам введенной в канал шейки матки выздоровление наступило на 10 день 83.3% коров, раннее болевших воспалением шейки матки, на 28,8% выздоровело коров больше, чем после лечения коров в контрольной группе, которым в канал шейки матки вводили в течение 7 дней по 5-6 г фуразолидоновых пенообразующих палочек. Сроки лечения опытной группы коров были на 6-10 дней меньше чем в контрольной группе коров.
Заключение
Изобретение относится к ветеринарной медицине к области клеточной терапии и может быть использовано при лечении коров с бесплодием, и новорождённых телят. Сущность изобретения состоит в том, что у 4-5 месячных плодов-телят извлеченных из матки стельных коров берётся кровь не из пуповины, а из ярёмной вены, для гидродинамического потока крови по кровеносным сосудам плода, троакаром ликвидируется в брюшной и грудной полости вакуум, что способствует свободному вытеканию плодной крови богатой гемопоэтическими и стромальными стволовыми клетками, ферментами, ядросодержащим и форменными элементами крови добавляют к крови антиоксидант, отстаивают, центрифугируют.
Способ получения гемопоэтмческих и стромальных стволовых клеток от плодов-телят, заключающийся в том, что извлекают беременную матку после нутровки стельных коров, освобождают плод от детской и материнской Плацент без травмирования и ампутации пуповины, берут кровь из яремной вены у 4-5 месячных плодов телят, при этом вакуумное пространство в грудной и брюшной полости плода препятствующие свободному вытеканию крови (гидродинамика) ликвидируют методом прокола их троакаром, добавляют к крови антиоксидант, отстаивают, центрифугируют.
