лых квадратиков каждый. Камеры других систем имеют иную шШтриховну» однако ea малого квадратика у всех одинакова — 1/400 мм? После притирки покровного шлифованного стекла до появления радужных колец над eee ору тя капиллярная полость высотой 0,1 мм. Следова rina объем над одним малым о составляет /4 MM’. т о еред ean OU BERGA ug Nay разбавляют ®-ным ale 4 поваренной соли или дистиллированной BOдой. газбавитель одновременно у Е спермиев, они Onc неподвижными. ‚ Разбавление проводят в эритроцитарных (сперма быка и барана) или лейкоцитарных (сперма жеребца и хряка) меланжерах (табл. 7). . . . Зарядка счетной камеры разбавленной спермой пос| ле сброса первых четырех капель, не имеющих спермиев, производится осторожным нанесением последующей капли под покровное стекло. Капля должна. равномерно заполнить полость над сеткой и не иметь пузырьков возлуха. Спермии в камере располагаются в один ряд, что облегчает их подечет (рис. 9). Можно разбавлять сперму в колбочках и пенициллиновых флаконах. В зависимости от нужной ereHeHy разбавления (в 20, 30, “0 и т, д. раз) в них вливают 1,9; 2,9; 3,9 и т. д. мл 3%-ного раствора поваренной соли. Затем вносят микропипеткой 0,1 мл спермы, смывают ее. раствором и перемешивают во флаконе. Этот cnoegg разбавления ускоряет исследование спермы. одсчет проводят в 80 малых квадратах, при этом считают спермии, головки которых находятся внутри Зная объем малого квадрата, степень разбавления, выквадрата, на левой и верхней линиях квадрата (рис. 10). числяют количество спермиев в | мл. При разбавленин спермы в 20 раз количество подсчитанных спермиев
| ee 7. Степевь разбавления спермы для подсчета спермиев eo До какой get метки @oamrt Сперма ета пабирают pastan ле- | ||||
|---|---|---|---|---|
| = | эк сперму | ii раствор | a | |
| Баран | тете | a | 108 | о |
| Жеребца Е | ейкощитерный | 0,5 0,5 | il 11 | 20 20 |
| 141 | ||||
_ — рэ" ПБ
:
9 7 { а с 4
я
2
и ни —%
р 78 8 в в
о a d
4 6 ; d Gin
44 f Ie | 2
83 |
Я 26 20,
> a oa28 } и= 19 А
г. 93979PI29427 № 5 zy9711714
'
a |
f `
; > 35y oH 7 и }
| . : .
Рис. 10. Порядок подсчета сиермиез в OANOM квадрате счетной камеры.
в 80 малых квадратах соответствует количеству спермнев в миллионах в | мл неразбавленной спермы. При разбавлении в 30 раз число нужно помножить на 1,5, в 40 раз на 2, в 100 раз на 5 ит. д. Например: подечитано 100 спермиев. Разбавление в 20 раз— это значит млн./мл.100 млн./мл спермиев, разбавление в 100 раз— 500 Метод прямого подсчета спермиев в счетной камере является наиболее объективным и точным, он служит основным и контрольным для других методов оценки концентрации спермиев в сперме. Однако он заниMaer даже у опытных лаборантов по 10—15 мин временишого иколичествапри необходимостипроизводителейопределятьзадерживаетсперму оттехноло-больгию обработки спермы.
Определение концентрации спермиев методом стандартов.методыРазработаныопределенияи используютсяконцентрациив спермиев,практике иоснован-другие ные главным образом на оценке степени прозрачности спермы. Спермии менее прозрачны, чем плазма, от их концентрации зависит прозрачность спермы. Эти методы менее точны, так как Ha прозрачность спермы кроме спермиев оказывают влияние и другие факторы (красящие свойства кормов, эпителиальные клетки ит. д.) Для определения концентрацин спермы жеребца стандартов,Г. В. Паршутнисостоящийи Е. Ю.из Румянцева6 пебольшихпредложилизапаянныхметодпробирок с прозрачной жидкостью, соответствующей степени прозрачности определенной концентрации спер1,5—2 мл спермы. Встряхнув стапдарты, подбирают } ; миев. К ним прилагается пробирка, в которую наливают один из них, сходный по прозрачности с исследуемои спермой.
Стандарт С. И. Сердюка предложен для определения концентрацин спермы хряка. Состоит из одной запаянной пробирки, прозрачность которой соответствует концентрации спермий 5 мли/мл. В пустую пробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора поваренной соли и 0,1 мл спермы, встряхивают, сравнивают со стандартами, а затем доливают 1%-ный раствор поваренной соли до тех пор, пока прозрачность станет в обеих пробирках одинаковои.
у
После этого определяют концентрацию по формуле К-=50(Н-Р 0,1), в которой № обозначает концентрацию ({мли./мл) спермиев в цельной сперме, abl— объем (мл) добавленного к ней 1%-ного раствора хлористого патрия. Фотоэлектроколориметрический метод определения HOCTH мутных жидкостей со взвешенными частицами концентрации спермы. Этот метод основан па способпоглощать свет прямо пропорционально числу этих частиц. Степень поглощения пропускаемого через исследуемую жидкость светового пучка определяется в фотоэлектроколориметре (ФЭК). При определеини концентрации на ФЭК сначала строят калибровочную KpHвую.пентрациейДля этогоспермиевберут ипробыустанавливаютспермы с вразличнойФЭК ux опти-конческую плотность, по которой в дальнейшем судят о
