_ — рэ" ПБ
:
9 7 { а с 4
я
2
и ни —%
р 78 8 в в
о a d
4 6 ; d Gin
44 f Ie | 2
83 |
Я 26 20,
> a oa28 } и= 19 А
г. 93979PI29427 № 5 zy9711714
'
a |
f `
; > 35y oH 7 и }
| . : .
Рис. 10. Порядок подсчета сиермиез в OANOM квадрате счетной камеры.
в 80 малых квадратах соответствует количеству спермнев в миллионах в | мл неразбавленной спермы. При разбавлении в 30 раз число нужно помножить на 1,5, в 40 раз на 2, в 100 раз на 5 ит. д. Например: подечитано 100 спермиев. Разбавление в 20 раз— это значит млн./мл.100 млн./мл спермиев, разбавление в 100 раз— 500 Метод прямого подсчета спермиев в счетной камере является наиболее объективным и точным, он служит основным и контрольным для других методов оценки концентрации спермиев в сперме. Однако он заниMaer даже у опытных лаборантов по 10—15 мин временишого иколичествапри необходимостипроизводителейопределятьзадерживаетсперму оттехноло-больгию обработки спермы.
Определение концентрации спермиев методом стандартов.методыРазработаныопределенияи используютсяконцентрациив спермиев,практике иоснован-другие ные главным образом на оценке степени прозрачности спермы. Спермии менее прозрачны, чем плазма, от их концентрации зависит прозрачность спермы. Эти методы менее точны, так как Ha прозрачность спермы кроме спермиев оказывают влияние и другие факторы (красящие свойства кормов, эпителиальные клетки ит. д.) Для определения концентрацин спермы жеребца стандартов,Г. В. Паршутнисостоящийи Е. Ю.из Румянцева6 пебольшихпредложилизапаянныхметодпробирок с прозрачной жидкостью, соответствующей степени прозрачности определенной концентрации спер1,5—2 мл спермы. Встряхнув стапдарты, подбирают } ; миев. К ним прилагается пробирка, в которую наливают один из них, сходный по прозрачности с исследуемои спермой.
Стандарт С. И. Сердюка предложен для определения концентрацин спермы хряка. Состоит из одной запаянной пробирки, прозрачность которой соответствует концентрации спермий 5 мли/мл. В пустую пробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора поваренной соли и 0,1 мл спермы, встряхивают, сравнивают со стандартами, а затем доливают 1%-ный раствор поваренной соли до тех пор, пока прозрачность станет в обеих пробирках одинаковои.
у
После этого определяют концентрацию по формуле К-=50(Н-Р 0,1), в которой № обозначает концентрацию ({мли./мл) спермиев в цельной сперме, abl— объем (мл) добавленного к ней 1%-ного раствора хлористого патрия. Фотоэлектроколориметрический метод определения HOCTH мутных жидкостей со взвешенными частицами концентрации спермы. Этот метод основан па способпоглощать свет прямо пропорционально числу этих частиц. Степень поглощения пропускаемого через исследуемую жидкость светового пучка определяется в фотоэлектроколориметре (ФЭК). При определеини концентрации на ФЭК сначала строят калибровочную KpHвую.пентрациейДля этогоспермиевберут ипробыустанавливаютспермы с вразличнойФЭК ux опти-конческую плотность, по которой в дальнейшем судят о
ИЯконцентрации спермиев B исследуемых пробах. Построенную традуированную кривую следует ежемесячно проверять, так как показания прибора могут изменяться из-за старения фотоэлемента и лампы накаливания. Сходен по принципу с ФЭК и метод определения концентрации спермиев при помощи фотоэлектрического эритрогемометра. Фотоэлектрические методы позволяют быстро (за 2—3 Mun) определить концентрацию спермы. Однако эти приборы созданы для анализа Heтинных растворов, а сперма является взвесью спермиеви в ней имеется меньшее и большее количество эпнG 2 aT © Ы телиальных клеток, результат может быть RICO HEN Поэтому продолжаются поиски более точных и быстрых методов определения концентрации спермы. Предложены весовой и объемный методы определе: ния концентрации спермиев по измерению осадка после центрифугирования спермы (Братанов, Болгария); погренгность не более 10%. 5 По величине электрического сопротивления. Было замечено, что величина электрического сопротивления зависит OT TG ALG и концентрации а Быстрый (37—40 с) и точный метод подсчета числа спермиев в сперме на скоростном автоматическом счетчике клеток вым. Для этого— пеллоскопеможно использоватьразработани М.венгерскийTI. Рязание-приаценка спермы4 поном дщылазняь= чехол Н. П. Шергина). Метод основан на учетеу интенсивностии потребления спермиями кислорода, растворенного = сперме. Об интенсивности дыхания ив судят и скорости обесцвечивания da anes se Ubecnaeen сини, добавленного м нтизнее дохание, Ра обесцвечивается | раствор, 4тем интенсивне . ae Оценку производят следующим образом. такой пипеткой па предметное стекло наносят каплю свежеполученной спермы, другой пипеткой добавляют такого же размера каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, приготовленной на физиологическом растворе, смешивают и быстро насасывают | в каналae _ стеклянногостек | капилляра, чтобы образовался окрашенный в голубой цвет столбик длиной 2—3 см. Трубочку кладут горизонтально на белый лист бумаги, следят. Происходит | И Co] тричем с концов Seeя ceeanteL ИЕ aie, еоу о
