При наличии в яичнике кобылы-донора фолликула третьей стадии (по Животкову, 1952) начинают ее случку или искусственное осеменение намеченным по подбору жеребцом-производителем. С целью повышения процента извлекаемости зародышей рекомендуем интервал между повторными случками, либо осеменениями свежей спермой, сократить до 24 часов, при искусственном осеменении криоконсервированным семенем - до 12 часов. Если для осеменения донора используется импортная заморожендоная6спермачасов. Прив соломинках,установлениито факэто т интервала овуляциис о семенкраща е ниется кобылы-донора прекращают. . Одновременно с осеменением кобылы-донора проводят работы по синхронизации половых функций намечаемых кобыл-реципиентов с половыми циклами ROBB доноров.небольшойПриживляемостьасинхронности трансплантатовмомента овуляциинаступаету кобылы-и при донора и кобылы-реципиента в предшествующем пересадке половом цикле. Пересадки допустимы, если: 1) овуляция у кобылы-реципиента наступила раньше, чем у донора в пределах 24 часов (такую асинхронность половых циклов донора и реципиента обозначают +24 часа); 2} овуляция у кобылы-реципиента наступила позже, чем у донора в пределах 72 часов (-72 ч.). Трансплантация зародышей при большей асинхронности сроков овуляции донора и реципиента нежелательна и к пониженной приживляемости трансплантатов. ведет При наличии большого табуна кобыл-реципиентов, в котором можно легко подобрать животное с соответствующей степенью синхронности сроков овуляции, никаких вмешательств в протекание их половых функций не требуется. Если же имеющегося количества потенциальных кобылреципиентов недостаточно, TO необходимо искусственно вызывать у них полноценную овуляцию в заданные сроки. Рекомендуем несколько схем обработки реципиентов с
| | | | | | | | | ) |
целью индукции овуляции в необходимые сроки. Основанием для выбора той или иной схемы обработки кобылреципиентов служит фактически установленная разница сроков овуляции у намечаемых кобыл - потенциальных доноров и реципиентов - в предшествующем пересадке эмбриона эстральном цикле. Схема 1. Если овуляция у кобылы-донора за цикл до пересадки наступила одновременно или чуть раньше (до трех суток), чем у потенциального реципиента, то в момент установления овуляции у донора кобыле-реципиенту следует ввести внутривенно 2000 МЕ человеческого хорионического гонадотропина. Овуляция у реципиента должна наступить через 36-48 часов после инъекции. Асинхронность донора и реципиента при этом составит -48 часов. Схема 2. Если овуляция у кобылы-донора за цикл до пересадки наступила Ha 3-10 суток раньше, чем у рецЦипиента, то в первый день проявления охоты кобылойдонором кобыле-реципиенту следует ввести внутримышечно простагландин F2a (название препаратов - Эстрофан, Энзапрост-Ф, Эструмат, Клопростенол, Динопрост, Просольвин, Клатрапростин и т.д.) в рекомендованных для кобыл дозировках (! Обращаем особое внимание на дозировки этих препаратов применительно к лошадям. Обычно дозы простагландинов для лошадейв 2-4 раза ниже, чем для крупного рогатого скота). Затем, в день наступления овуляции у кобылы-донора, кобыле-реципиенту вводят внутривенно 2000 МЕ человеческого хорионического гонадотропина. Схема 3. Если за цикл до пересадки овуляция кобылыреципиента наступила раньше, чем у кобылы-донора на 2-6 дней, то через 6 дней после овуляции у кобылы-донора обеим кобылам (и донору, и реципиенту) вводят внутримышечно простагландин F2a и через 5 суток - внутривенно 2000 МЕ человеческого хорионического гонадотропина.
- В целях страховки от случайных факторов рекомендуем готовить на одного потенциального донора 2-3 потенциальных рециниента.
В случае, если донор осеменен правильно и своевременно и степень синхронности половых функций донора и реципиента находится в пределах от + 24 до -72 часов, задача по подготовке кобыл к пересадкам считается выполненной, и можно рассчитывать на положительный результат. Извлечение и пересадку зародышей производят через 8-8,5 суток после овуляции у кобыль-донора. |
|
4.5 ПОДГОТОВКА ЛАБОРАТОРНОЙ ПОСУДЫ, ОБОРУДОВАНИЯ И ПОМЕЩЕНИЙ ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНОВ Работа по извлечению и пересадке эмбрионов требует строгого соблюдения мер асептики и санитарноветеринарных правил. Рекомендуется использование одноразовых инструментов и посуды.
Используемую лабораторную посуду, катетеры многоразового применения моют в растворе нейтрального моющего средства, затем ополаскивают проточной, дистиллированной и бидистиллированной водой. Стеклянную посуду (колбы, воронки, пипетки, чашки) высушивают, заворачивают в пергаментную бумагу и стерилизуют сухим жаромBTe- чение 2-х часов при температуре 150°С или 3-х часов - при температуре 140°С. В таком же режиме обеззараживают помещенный в стеклянную пробирку металлический катетер для пересадки эмбрионов, пипетки для переноса эмбрионов. Резиновый катетер для извлечения эмбрионов, шприцы и иглы кипятят в отдельных стерилизаторах в течение 40 минут, воду сливают, не открывая крышки, и охлаждают до комнатной температуры.
При наличии автоклава, все термически устойчивое оборудование, спецодежду и т.п. можно стерилизовать горячим паром в режиме 1,5 атм. в течение 30 минут.
