Инструкция по искусственному осеменению и трансплантации эмбрионов лошадей

Туда же через стерильный шприц добавляют 0,3-0,5 | мл инактивированной (предварительно выдержанной тальной сыворотки теленка. Затем добавляют 0,1 мл в течение 30 минут при 56-58°С на водяной бане) феполигена^{(величину рассчитатьв соответствиис исхо-} дной дозировкой препарата). Ингредиенты осторожно перемешивают, не допуская образования пены. В такой среде эмбрион может находиться при температуFen Ok между вымыванием и пересадкой 37°С в npevionax^{0 мину} Для^{более длительного хранения эмбриона рекоменду-} вм применять культуральную среду, разработанную в лаборатории^{физиологии размножения лошадей ВНИИ коневод-} ства (Лебедев С.Г., Лебедева Л.Ф. Авторское свидетельство №1497215 от 1.04.1989 г.). Она готовится следующим образом. Стерильным шприцем на 5 мл через иглу набирают 4 мл ФБС Дюльбекко и вводят, прокалывая пробку, в пенициллиновый флакон. Затем этим же шприцем засасываtoT 4 мл желтка куриного яйца категории «диетическое» и ВВОДЯТ в тот же флакон (для желтка удобнее пользоваться шприцем без иглы или толстой иглой). Полиген можно добавить отдельно (300 мкг/мл) или в составе ФБС Дюльбекко. Содержимое флакона (8 мл) тщательно перемешивают горизонтальными крутящими движениями, не допуская вспенивания. После перемешивания раствор готов к употреблению. В такой культуральной среде эмбрион при 37°С не только сохраняет жизнеспособность в течение, как минимум, 24 часов, но продолжает расти и развиваться. Однако, данный вариант пересадочного раствора подходит для эмбрионов диаметром >0,8 мм, поскольку он непрозрачный из-за высокого содержания желтка. Но эмбрионы глазом. в нем всплывают к поверхности и хорошо видны невооруженным С целью поддержания оптимальной температуры все три пературой 37°C. приготовленных раствора помещают в термостат с тем48

В последнее время зарубежные фирмы-поставщики («Minitube», Германия или «MV», Франция) предлагают готовые среды для вымывания и эмбрионов лошадей в удобных упаковках, которые можно присоединять к промывному катетеру. В продаже имеются также готовые среды для краткосрочного хранения эмбрионов, расфасованные по 10-20 мл.

4.7 ИЗВЛЕЧЕНИЕ ЭМБРИОНОВ ИЗ МАТКИ КОБЫЛ-ДОНОРОВ Эмбрионы с целью их последующей пересадки вымывают из матки кобыл-доноров через 8-8,5 суток после овуляции. Работы по извлечению зародышей необходимо проводить в следующей последовательности: 1. Кобылу-донора заводят в станок, фиксируют. Освобожшку от каловых масс. Проводят ту. дают ее прямую кишку Fi илежа ИХ КНИМ алет наружных половых органов и пр Lu . Хвост бинтуют, либо помещают наружных покровов туют, в специальный полиэтиленовый чехол одноразового пользования и привязывают к верхней перекладине станка. . 2. Исполнитель одетой в обработанную УФ-облучением одноразовую полиэтиленовую перчатку рукой вынимает из стерилизатора катетер. Помощник через воронку ополаскивает его изнутри приготовленной промывной жидкостью. Исполнитель надевает на руку, сжимающую головную частью катетера, защитный полиэтиленовый чехол. Концевую часть чехла он забирает в горсть, закрывая катетер снаружи, и, придерживая пальцами руки, отрезает кончик чехла, обеспечивая в нем отверстие. 3. Исполнитель вводит рукус катетером во влагалище кобылы, | разъединяет пальцы руки, расправляя чехол, и проталки| вает г.оловную часть инструмента через отверстие чехлав цервикальный канал, а затем в тело матки до тех пор, пока латексный баллон катетера He пройдет за шейку матки.

| || | |

1. С целью фиксации инструмента в матке, помощник шприцем через специальный воздушный канал накачивает в раздуваемый баллон катетера 60 мл воздуха, запирая цервикальное отверстие изнутри, и перекрывает воздушный канал катетера зажимом. После этого катетер следует чуть потянуть наружу, чтобы баллон плотно прилегал к шейке матки.

2. Помощник через во р!

количество промывнойронку заливаетжидкости. вЗатем катетеркатетер небольшоеперекрывают, не допуская попадания в него воздуха. Помощник снимает воронку и опускает наружный конец инструмента в колбу с промывной жидкостью. Дальнейшее вливание раствора в маткуи его обратное извлечение проводят путем поднятия и опускания колбы на 1-1,5 метра выше и ниже уровня половых органов кобылы. Перфузия матки происходит по принципу сообщающихся сосудов.

6.ны| у ополаскивающим раствором (см. раздел «Приготовление растворов»).

1. Спускают воздух из фиксирующего баллона и извлекают катетер из матки.

2. Колбы с использованными растворами переносят в спе-

3. циальное помещение или бактерицидную камеру для поискачив УФ-облучение!.и оценки эмбрионов (предварительно выклю-

4. 1. Кобылу-донора освобождают и выводят из фиксационного станка.

| | |