Пример окрашивания:
-
Рисунок 4.4.4 - Микрофото. Г иподерма пальцевого мякиша
-
анатомически правильного копытца. Окраска по Ван-Г изону. Х-250 Для более контрастной и полихромной картины с выявлением форменных
-
элементов крови, фибрина можно использовать трехцветный метод Маллори. Приготовление красителя Маллори (реагенты): 100 мл 0,5% водного рас- твора кислого фуксина, 0,5 г анилинового синего водорастворимого, 2 г оранжа G, 1 г фосфорно-вольфрамовой кислоты, 100 мл дистиллированной воды. Последовательность растворения: в 100 мл дистиллированной воды растворяется 0,5 г кислого фуксина. Отдельно при комнатной температуре растворяется фосфорновольфрамовая кислота в воде, добавляется анилиновый синий и оранж G. После растворения красителей жидкость фильтруется. Порядок проведения окраски: 1. Срезы обрабатываются в 3% растворе бихромата калия - 20 минут. 2. Промыть в дистиллированной воде (1 -2 минуты). 3. Окрасить в растворе кислого фуксина (5 минут). 4. Быстро ополоснуть срезы в дистиллированной воде. 5. Перенести в окрашивающий раствор Маллори (анилиновый синий и
-
оранж G на 1%-ной фосфорно-вольфрамовой кислоте) на 2 минуты (можно увеличить время для более контрастного окрашивания).
- Быстро ополоснуть срезы в дистиллированной воде.
-
Дифференцировать окраску (до контрастной синей окраски коллагеновых волокон) в нескольких порциях 96% спирта.
-
Ксилол.
-
Заключить в полистирол или другую синтетическую среду.
-
Результат окрашивания: ядра, коллагеновые волокна - красные, краснооранжевые, оранжевые, эластические волокна - интенсивно синие, слизь синяя, эритроциты красно-оранжевые, мышечные волокна ярко-оранжевые.
Пример окрашивания:
- Провести срезы через 3 смены 100% спирта, ксилол, заключить в бальзам.
Результат окрашивания: ядра черные или коричневые, коллагеновые и ретикулярные волокна розовые, мышцы и цитоплазма клеток, эритроциты, кератин красные или оранжевые, фибрин красный, слизь, амилоид, гиалин - разные оттенки синего цвета, эластические волокна синие.
Пример окрашивания:
Рисунок 4.4.6 - Микрофото. Г иподерма пальцевого мякиша копытца с отросшим рогом. Окраска по Касону. Х-125 Окраска нервной ткани, эластически и коллагеновых волокон, кровеносных сосудов азотнокислым серебром по Рассказовой, в модификации В.В. Малашко (2012 г.). Приготовление серебра: концентрация от 15% до 30%. Например, 15 г серебра на 100 мл бидистиллированной воды, или 5 г серебра на 30 мл бидистиллированной воды. Приготовление кислого формалина: 1% раствор - 10 мл формалина на 100 мл водопроводной воды, или 0,5% - 5 мл формалина на 100 мл воды. Приготовление аммиачного серебра: готовится перед окраской. Титровать азотнокислое серебро до просветления 25% раствором аммиака. Необходимо уловить переход от темной окраски к светлой. Можно добавить 2-3 капли аммиака, чтобы срезы не были слишком темными. Если ткань светлая, то дополнительно аммиак добавлять не нужно. Аммиачная вода: стандартный раствор: к 5 мл 25% аммиака (нашатырный спирт) добавить до 20 мл воды, т.е. соотношение 1:4. Раствор хранить в закрытой банке (запах). Примечание: если срезы перекрашены, то в аммиачной воде они могут потерять окраску и тогда раствор нужно сделать крепче - 10:20; если не докрашены - то раствор аммиачной воды необходимо сделать слабее. Нужно использовать только чистую лабораторную посуду и стеклянную палочку, которая должна храниться в дистиллированной воде и обязательно после формалина ее нужно промывать в отдельном стаканчике с дистиллированной водой. Показатель чистоты - серебро не выпадет в осадок. Если образуется осадок, значит, нарушена чистота лабораторной посуды. Импрегнацию серебром необходимо проводить при температуре в помещении не ниже 200С.
