ДИАГНОСТИКА МУТАЦИИ DUMPS (ДЕФИЦИТА УРИДИНМОНОФОСФАТСИНТЕТАЗЫ) ГЕНА UMPS
DUMPS (дефицит уридинмонофосфатсинтетазы) – моногенное аутосомное рецессивное заболевание. Болезнь обусловлена нарушением обмена веществ и проявляется дефицитом фермента уридинмонофосфатсинтетазы, связанного с воспроизводительной функцией животных и влияющего на выживаемость потомства.
Заболевание обусловлено точечной мутацией в кодирующей части гена UMPS, локализованного на первой хромосоме (1-я группа сцепления, локус 2391) и проявляется только у гомозиготных животных, вызывая гибель эмбрионов, как правило, после первых 40 дней развития, то есть на стадии имплантации зародыша в матку. У носителей данной мутации отмечают задержку роста. Также может наблюдаться проявление дефектов функционирования нервной системы организма животных.
Мутация зарегистрирована у черно-пестрых голштинов в США и Европе, а также у животных красно-пестрой голштинской породы в Швейцарии. Данный фермент связан с воспроизводительной функцией животных и влияет на выживаемость потомства.
Праймеры для амплификации фрагмента гена UMPS:
AVA1: 5´- gCA AAT ggC TgA AgA ACA TCC Tg - 3´ AVA2: 5´- gCT TCT AAC TgA ACT CCT CgA gT- 3´
ПЦР-программа: 95 °С – 10 мин; 45 циклов: 95 °С – 30 с, 58 °С – 30 с, 72 °С – 1 мин; 72 °С – 30 мин.
Длина амплифицированного фрагмента – 108 п.о.
При расщеплении продуктов амплификации рестриктазой EcoT22І
при 37 °С идентифицируются следующие генотипы: генотип DUMPSTD/TD – 51 п.о., 36 п.о. и 21 п.о. (животные, свободные от мутации) генотип DUMPSTD/DP – 87 п.о., 51 п.о., 36 п.о. и 21 п.о. (животныеносители мутации) генотип DUMPSDP/DP – 87 и 21 п.о. (животные с рецессивным генотипом)
ДИАГНОСТИКА МУТАЦИИ CVM (СИНДРОМ СЛОЖНОЙ ДЕФОРМАЦИИ ПОЗВОНОЧНИКА) ГЕНА SLC35A3
CVM (синдром сложной деформации позвоночника) – наследственное летальное заболевание телят, ассоциированное с геном SLC35A3 (бычьего растворимого переносчика семейства 35. Ген, обуславливающий комплексный порок позвоночника расположен на третьей хромосоме. Способ наследования CVM – аутосомально рецессивный. Характерными признаками телят-носителей CVM являются общая недоразвитость, укороченная шея, слившиеся и деформированные позвонки, сколиоз, пороки ребер. Одним из симптомов является также деформация суставов передних и задних конечностей. К действию этого рецессивного гена относятся, кроме того, пороки сердца.
Бычий транспортер SLC35A3 играет важную роль в развитии осевого скелета, принимая участие в молекулярных механизмах формирования позвоночника и ребер. Геномная ДНК Bos taurus состоит из 22404 п.о.
По данным зарубежных научных исследований, скрытыми носителями данной мутации являются от 6 до 20 % быков-производителей черно-пестрой породы.
Праймеры для амплификации фрагмента гена SLC35A3:
F: 5´- gCT CTC CTC TgT AAT CCC CA - 3´ R: 5´- CCA CTg gAA AAA CTA gCT gTg AgT A- 3´
ПЦР-программа: 94 °С – 10 мин; 34 цикла: 94 °С – 30 сек, 60 °С – 30 сек, 72 °С – 30 сек; 72 °С – 5 мин.
Длина амплифицированного фрагмента – 225 п.о.
При расщеплении продуктов амплификации рестриктазой RsaI при 37 °С идентифицируются следующие генотипы:
генотип CVMTV/TV – 201,24 п.о. (животные, свободные от мутации) генотип CVMTV/CV – 225 п.о., 201 п.о. и 24 п.о. (животные-носители мутации)
генотип CVMCV/CV – 225 п.о. (животные с рецессивным генотипом)
ДИАГНОСТИКА МУТАЦИИ BC (ДЕФИЦИТ ФЕРМЕНТА АРГИНИНСУКЦИНАТСИНТАЗЫ) ГЕНА ASS
Мутация цитрулинемия (дефицит фермента аргининсукцинатсинтазы (ASS) – аутосомный рецессивный признак, проявляющийся гипераммонимией, вызванной разрывом в цикле синтеза мочевины. Животные, кажущимися здоровыми непосредственно после рождения, на второй день жизни становятся подавленными, плохо едят, в последующие дни их поведение становится неадектватным. Телята, облада-
