Лабораторные исследования включают: микробиологическое исследование экссудата из половых органов и секрета вымени; биохимическое исследование сыворотки крови, морфологическое исследование крови, иммунологические и гормональные исследования, определение клеточного состава цервикально-вагинальной слизи, проведение проб для диагностики атонии и гипотонии матки, эндометритов и др.
Микробиологические исследования предусматривают диагностирование половых инфекций и инвазий, а также выявление возбудителей неспецифического воспаления гениталий и вымени (условно патогенных микроорганизмов, грибов) с установлением их чувствительности к антимикробным веществам для правильного выбора средств этиотропной терапии. Биохимический анализ сыворотки крови здоровых и бесплодных коров и телок включает определение содержания общего белка, кальция, неорганического фосфора, каротина, витамина А, витамина Е, сахара, щелочного резерва по рекомендуемым методикам и позволяет установить характер обменных процессов, особенности нарушения обмена веществ.
Гематологические исследования предусматривают определение содержания в крови гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов, характера лейкограмм с целью выявления отклонений гематологического статуса, характерного для ряда заболеваний.
Радиоиммунологическими исследованиям определяют в плазме крови содержание и соотношение гормонов прогестерона, суммарных эстрогенов, эстрадиола 17-бета и андрогенов, что очень важно при диагностировании дисфункции матки и яичников на почве эндокринных расстройств.
Ориентировочное представление о функциональном состоянии яичников, степени их гормональной активности можно составить по показателю гликогенового теста. На предметном стекле делают мазки-отпечатки из слизи преддверия влагалища и высушивают на воздухе. Потом их переносят в бактериологические чашки с раствором Люголя (йода – 1 ч, калия йодида – 2 ч, дистиллированной воды – 17 частей) на 2 – 3 мин и высушивают на воздухе. В эпителиальных клетках, содержащих гликоген, цитоплазма окрашивается в коричневый, темно-коричневый или слабо желтый цвет; ядра не окрашиваются. В мазке подсчитывают 100 клеток и вычисляют процентное отношение окрашенных клеток к общему количеству подсчитанных, что и характеризует гликогеновый индекс. На 17, 20, 21, 1 и 2-й день полноценного полового цикла гликогеновый индекс равен 75 – 80 %, на 6 – 11-й день 15 – 20 %, в период с 4 – 5-го по 13 – 15-й день – 35–50 %. Понижение гликогенового индекса свидетельствует о низкой гормональной активности яичников. А. О. Манасян (1967) предложил определять клеточный состав цервикально-вагинальной слизи, из которой на предметном стекле готовят мазки-отпечатки, окрашенные по Романовскому-Гимзе. Под микроскопом подсчитывают 500 эпителиальных клеток, в том числе больших, средних, малых, безъядерных и деформированных, определяя их соотношение. При кистозном перерождении яичников количество средних эпителиальных клеток доходит до 43 – 68 % (в норме их от 9 до 37 %), тогда, как больших и малых сравнительно мало (в норме больших от 2 – 12 до 61 – 70 %, а малых от 6 – 8 до 71 – 78 %), а безъядерные отсутствуют. При кисте желтого тела и персистентном желтом теле увеличивается количество малых и безъядерных клеток (сдвиг картины мазка вправо).
Иммунологические исследования включают определение уровня общей неспецифической резистентности организма (по
фагоцитарной активности лейкоцитов крови, лизоцимной активности и бактерицидности крови и другим тестам), а также характер локального иммунитета матки (по фагоцитарной активности лейкоцитов в отношении к микробам в окрашенных мазках-отпечатках маточных выделений) и вымени (по лизоцимной активности молока и фагоцитарной активности лейкоцитов молока). Наряду с этим для диагностики иммуногенного бесплодия определяют титр спермиоантител (спермиагглютининов) в сыворотке крови (по К. Братинову и В. Дикову). Спермиоаггглютинационная проба заключается в следующем. В 11 (или более) стерильных пробирок наливают по 1 мл изотонического раствора хлорида натрия. В первую пробирку добавляют 1 мл сыворотки крови испытуемой самки и смешивают с раствором. Затем 1 мл смеси переносят во вторую пробирку, из второй в третью, и в такой последовательности продолжают разведение до 11-й пробирки, из которой 1 мл содержимого выливают. В результате получают разведение сыворотки крови в геометрической прогрессии – 1 : 1, 1 : 2, 1 : 4, 1 : 16, 1 : 32, 1 : 64, 1 : 128, 1 : 256, 1 : 512, 1 : 1024. В каждую пробирку добавляют по 2 капли 2%-й суспензии отмытых спермиев производителя, спермой которого неоднократно осеменяли самку. Содержимое пробирок смешивают и помещают на 30 мин в термостат при температуре + 37 °С. Учет реакции проводят под микроскопом. Для этого в луночку предметного стекла пастеровской пипеткой помещают небольшую каплю содержимого из каждой пробирки, накрывают покровным стеклом и рассматривает под микроскопом. Реакция считается отрицательной, если в поле зрения отсутствуют склеенные спермии или имеются единичные половые клетки, головки которых склеены; сомнительной – при агглютинации головок спермиев в разбавлении 1 : 256 и ниже; положительной при титре 512 и более (все спермии склеены головками). У коров с нормальной плодовитостью титр спермиоагглютининов не
