Селекционные и технологические приемы работы с овцами романовской породы

генетического разнообразия и уменьшения инбредной депрессии (Нестерук Л.В., 2016).

В связи с относительно широкой изученностью данного вопроса остается актуальным исследование генетической структуры отдельных популяций овец романовской породы, выявление отдельных линий и редких аллелей и формирование на основе полученной информации практических рекомендаций по поддержанию внутрипопуляционного разнообразия и богатства генофонда.

4.1 Характеристика спектров AG- и GA-ISSR фрагментов

При использовании двух олигонуклеотидов (AG)9C и (GA)9C (ISSRпраймеры), комплементарных к микросателлитным локусам (TC)n, (GT)n соответственно, определены специфические спектры фрагментов ДНК в диапазоне от 2500 до 220 п.н.

На рисунке 9 представлена амплификация геномной ДНК с праймером (AG)9C, где видны продукты, которые впоследствии разделены с помощью гель-электрофореза на агарозном геле (2%) в поле электрического тока 120 В в течении 80 минут. В результате получены спектры фрагментов, размеры которых определяли по линейной функции.

На спектрах видны несколько полос (фрагментов) присутствующие у большинства животных и фрагменты, встречающиеся только у отдельных особей. Полученные фрагменты были разделены по 38 размерным группам,

приведенным в таблице 29. На основании полученных спектров отмечали наличие или отсутствие того или иного фрагмента и вычисляли частоты встречаемости каждого и размерных фрагментов.

Используя те же принципы и методики, которые использовались при амплификации (AG)9С-PCR-маркеров, были амплифицированы (GA)9С-PCRмаркеры и получены спектры фрагментов (рис. 10).

Здесь так же можно отметить наиболее часто встречаемые фрагменты характерные для большинства животных. Такие фрагменты могут являться показателями видовой принадлежности. Так же были выявлены дополнительные полосы в спектре, характеризующие генетическое разнообразие.

В целом по двум праймерам выявлено 72 размерных фрагмента ДНК (36 фрагментов по (AG)9С и 36 – по (GA)9C) (таблица 29, рис. 11, 12).

Частоты встречаемости ISSR-фрагментов варьировали в популяции романовских овец.

Наиболее высокую частоту встречаемости AG-ISSR ампликонов были выявлены у шести фрагментов (А13=1060-1000п.н. – 0,335135; А20=680-640п.н. – 0,324324; А21=640-680 п.н. – 0,362162; А24=530-560 п.н. – 0,351351; А25=400-470 п.н. – 0,345946; А27=440-410 п.н.- 0,340541), встречающиеся у особей изученной популяции.

С помощью праймера (GA)9C обнаружены четыре фрагмента, имеющих значительную частоту встречаемости (G3=2000-1800 п.н. – 0,400000; G8=14001300 п.н. – 0,475676; G24=530-500 п.н. – 0,632432; G25= 400-470 п.н. – 0,405405).

Таблица 29- Частоты встречаемости фрагментов, полученных с помощью праймеров (AG)9С и (GA)9C

На рисунках 11 и 12 приведены гистограммы распределения частот фрагментов по маркерам (AG)9С-PCR и (GA)9С-PCR соответственно.