последующим внесением антикоагулянта, а оставшуюся кровь собирают путем перфузии. Сбор крови производят в два контейнера поочередно перемешивают, отделяют супернатант, цетрифугируют при 2000 об/мин, добавляют 10-12% диметил сульфаксид в полиглюкине с последующим замораживанием и дальнейшем использованием с лечебной целью.
Однако этот известный способ непригоден для получения .плодной крови богатой ядросодержащим и клетками. Недостатком этого способа является получение малого объема пуповинной крови. Это связано с изменением давления в грудной и брюшной полепи плода, когда кровеносные сосуды запустевают, поэтому приходится собрать кровь из пуповины в несколько приемов используя экфузию, перфузию получая пуповинную кровь малыми дозами используя для сбора крови несколько контейнеров с добавлением антикоагулянта. Сам процесс сбора крови трудоемок.
Техническим решением задачи является повышение эффективности взятия крови у плодов крупного рогатого скота за Счет аннулирования процесса спазмирования стенок кровеносных сосудов и свертывания крови кровеносных сосудах пуповины. Поставленная задача достигается тем, что способ взятия крови у 4-5 месячных плодов-телят взятых от сдельных коров подвергнутых убою в результате объявления скотоферм, колхозов банкротами.
При выполнении способа процедуры выполняли в следующем порядке:
-
-извлечение беременной матки после нутровки стельных коров;
-
освобождение плода от детской и материнской плацент;
-
-взятие крови из ярёмной вены плода;
-
добавление к крови антиоксиданта, отстаивание,
-
центрифугирование отличающийся тем, что (освобождение плода от детской и материнской плацент производят без и ампутации пуповины);
-
кровь берут из ярёмной вены у 4-5 месячных плодов телят; - вакуумное пространство в грудной и брюшной полости
-
плода препятствующие свободному вытеканию крови (гидродинамика) ликвидируют методом прокола их троакаром;
Проводимые манипуляции в предложенном способе приводят к максимальному получению количеству крови необходимого
для сбора крови а так же не повышает риск микробного заражения. Процесс сбора крови происходит без контакта с матерью быстро, не предоставляет никакого риска для мясной продукции убойных туш коров поступивших на убой с убойного цеха в цех переработки в холодильные камеры, потребителю.
Поголовье коров представлены убою в результате обанкротившегося хозяйства должно быть перед убоем подвергнуто диспансеризации по заразным и незаразным болезням. Способ выполняется следующим образом:
1. Сбор крови проводят в прокварцованном помещении.
2. Беременную матку с плодом кладут на металлический стол, дезинфицируют обливая раствором марганцевого кислого калия 1:1000.
3. Через продольный разрез стенки матки большого рога матки освобождают плод от детской и материнской плацент, от амниотической и аллантоисной жидкостей не травмируя пупочное кольцо, не ампутируя пуповину добиваясь свободной видимости головы, шеи, туловища плода.
4. Проводят осмотр и пальпацию яремного жлоба, прощупывая яремную вену в дальнейшем у плода находящегося в лежачем положении. Наружная яремная вена на шее плода расположена под кожей в яремном желобе образованном плечеголовной и грудоголовной мышцами. .
5. Одним движением руки вводят изогнутую со шлангом (№ 133) иглу в набухшую плодной кровью яремную вену лежащую в яремном желобе шеи плода. Для сбора крови из яремной вены у плода используют специальные стеклянные емкости или закрытые трансфузионные системы, содержащие антикоагулянт типа «Гемакон», «Baxter» оснащенные стерильной дренажной иглой, имеющей изгиб в 130°, соответствующий топографии вогнутости мышц яремного жолоба изгибаем до 130° что исключает препятствие для вытекания крови у плода находящегося в лежачем положении.
6. Троакаром оставляя гильзу удаляя стилет прокалывают стенку брюшной (возле диафрагмы), грудной полости ликвидируют вакуумное состояние, что способствует безпрепятственой транссудации крови по сосудам, через иглу введенную в яремную вену кровь вытекает в емкость с антиоксидантом.
Наличие вакуума в брюшной и грудной полости плода приводит к запустению кровеносных сосудов пуповины (по законам физиологии), поэтому медикам удается брать малые объемы пуповинной крови у только, что родившихся детей.
Наиболее обильное образование форменных элементов, ядросодержащих клеток, гемопоэтических и стромальных стволовых клеток, ферментов у плодов в крови достигает в середине беременности, а к концу внутриутробного развития (плодов уменьшается. Поэтом) наиболее рациональным является то, что кровь от плодов-телят необходимо собирать в 4-5 месячном возрасте в внутриутробного развития.
Практическое применение
Важнейшей характеристикой плодной крови является наличие в ней количеств ядросодержащих клеток. Образцы плодной крови мы подвергали методом подсчета лейкоцитов в формуле, подсчитывая на Световом микроскопе при стандартной окраске мазков по Романовскому. Исследования показали, что в пробах крови у плодов-телят имеется от 1-0,5x109 до 2x109 ядросодержащих клеток: лейкоцитов 7,24x109/л то 25,3x109/л, тромбоцитов (130x109/л до 410,1х109).
В последующем проводят фракционирование вытяжек для выделения ядросодержащих клеток из плодной крови центрифугированием супернатанта при 2000 об/мин, (20мин). Из фракционированной плодной крови после центрифугирования изготовили 10% мазь. Ежедневно эту мазь в течении 7 дней по 100 мл. вводили в канал шейки матки коровам с послеродовым гнойным цервицитом (Таблица 1).
Таблица 1 – Лечение послеродовых гнойных цервицитов у коров
| Способ лечения | Больных коров (всего) | Из них здоровело число | вы- % | 5 | Сроки выздоровления (дни) 10 | 15 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 10% мазь из фракционной плодовой крови после центрифугирования | 12 | 10 | 83,3 | 12 | 8 | 2/16,7% |
