миев-аспермия обозначается буквой A, незначительное их количество олигоспермия Допускается к использованию— 0. при искусственном осеменении сперма барана густая, быка густая и средняя. Сперма жеребца и хряка значительно разбавлена секретамн придаточных половых желез и по сравнению со спермой барана и быка будет редкой, по количеству спермиев содержит: густая более 0,2 млрд, средняя от 0,1 до 0,2 млрд и редкая менее 0,1 Mapa в 1 мл спермы. Определение концентрации сперлиев в сперме. Глазомерная оценка спермы по густоте дает приблизительное представление о фактическом количестве спермиев в 1 мл спермы, что не обеспечивает рационального использования ее, не позволяет установить с большой точностью степень разбавления, a следовательно, нормировать количество спермисв в дозе. Для точного определения количества спермиев в единице объема и в эякуляте пользуются методом прямого подсчета в счетных камерах с сетками Горяева, Бюркера, Тома и др., принцип устройства которых восновном одинаков (рис. 8). Камеры представляют собой продольные пластинки толстостенного стекла, в середине которых поперечные желобки образуют три площадки, средняя из них на 0,1 мм ниже крайних. В камере с сеткой Горяева средняя площадка разделена на две половины. Ha каждой половине папесена сетка, состоящая из 225 больших квадратов, из них 25 (по 5 в ряду) дополнительными линиями разделены на 16 ма-
И | /
АЗ
a _
ITE 1 4 “4 i
\ р $ mi
у \ \ \ =
2 3458 eo NI
/ г= © ifШ| >
|
—
Pes 8 ——" Ас 9
Рис. 8. Счетная камера для подсчетов спермиев (общий вид): 1— предметное стекло; 2— опорные стеклянные [постини К 3 — стеклянная площадка с сеткой; 4-— желобок, 5— покровисе ст. + Рис. 9. Заполнение сегки счетной камеры дли подсчета спермиев. 140
}
лых квадратиков каждый. Камеры других систем имеют иную шШтриховну» однако ea малого квадратика у всех одинакова — 1/400 мм? После притирки покровного шлифованного стекла до появления радужных колец над eee ору тя капиллярная полость высотой 0,1 мм. Следова rina объем над одним малым о составляет /4 MM’. т о еред ean OU BERGA ug Nay разбавляют ®-ным ale 4 поваренной соли или дистиллированной BOдой. газбавитель одновременно у Е спермиев, они Onc неподвижными. ‚ Разбавление проводят в эритроцитарных (сперма быка и барана) или лейкоцитарных (сперма жеребца и хряка) меланжерах (табл. 7). . . . Зарядка счетной камеры разбавленной спермой пос| ле сброса первых четырех капель, не имеющих спермиев, производится осторожным нанесением последующей капли под покровное стекло. Капля должна. равномерно заполнить полость над сеткой и не иметь пузырьков возлуха. Спермии в камере располагаются в один ряд, что облегчает их подечет (рис. 9). Можно разбавлять сперму в колбочках и пенициллиновых флаконах. В зависимости от нужной ereHeHy разбавления (в 20, 30, “0 и т, д. раз) в них вливают 1,9; 2,9; 3,9 и т. д. мл 3%-ного раствора поваренной соли. Затем вносят микропипеткой 0,1 мл спермы, смывают ее. раствором и перемешивают во флаконе. Этот cnoegg разбавления ускоряет исследование спермы. одсчет проводят в 80 малых квадратах, при этом считают спермии, головки которых находятся внутри Зная объем малого квадрата, степень разбавления, выквадрата, на левой и верхней линиях квадрата (рис. 10). числяют количество спермиев в | мл. При разбавленин спермы в 20 раз количество подсчитанных спермиев
| ee 7. Степевь разбавления спермы для подсчета спермиев eo До какой get метки @oamrt Сперма ета пабирают pastan ле- | ||||
|---|---|---|---|---|
| = | эк сперму | ii раствор | a | |
| Баран | тете | a | 108 | о |
| Жеребца Е | ейкощитерный | 0,5 0,5 | il 11 | 20 20 |
| 141 | ||||
_ — рэ" ПБ
:
9 7 { а с 4
я
2
и ни —%
р 78 8 в в
о a d
4 6 ; d Gin
44 f Ie | 2
83 |
Я 26 20,
> a oa28 } и= 19 А
г. 93979PI29427 № 5 zy9711714
'
a |
f `
; > 35y oH 7 и }
| . : .
Рис. 10. Порядок подсчета сиермиез в OANOM квадрате счетной камеры.
в 80 малых квадратах соответствует количеству спермнев в миллионах в | мл неразбавленной спермы. При разбавлении в 30 раз число нужно помножить на 1,5, в 40 раз на 2, в 100 раз на 5 ит. д. Например: подечитано 100 спермиев. Разбавление в 20 раз— это значит млн./мл.100 млн./мл спермиев, разбавление в 100 раз— 500 Метод прямого подсчета спермиев в счетной камере является наиболее объективным и точным, он служит основным и контрольным для других методов оценки концентрации спермиев в сперме. Однако он заниMaer даже у опытных лаборантов по 10—15 мин временишого иколичествапри необходимостипроизводителейопределятьзадерживаетсперму оттехноло-больгию обработки спермы.
