Определение концентрации спермиев методом стандартов.методыРазработаныопределенияи используютсяконцентрациив спермиев,практике иоснован-другие ные главным образом на оценке степени прозрачности спермы. Спермии менее прозрачны, чем плазма, от их концентрации зависит прозрачность спермы. Эти методы менее точны, так как Ha прозрачность спермы кроме спермиев оказывают влияние и другие факторы (красящие свойства кормов, эпителиальные клетки ит. д.) Для определения концентрацин спермы жеребца стандартов,Г. В. Паршутнисостоящийи Е. Ю.из Румянцева6 пебольшихпредложилизапаянныхметодпробирок с прозрачной жидкостью, соответствующей степени прозрачности определенной концентрации спер1,5—2 мл спермы. Встряхнув стапдарты, подбирают } ; миев. К ним прилагается пробирка, в которую наливают один из них, сходный по прозрачности с исследуемои спермой.
Стандарт С. И. Сердюка предложен для определения концентрацин спермы хряка. Состоит из одной запаянной пробирки, прозрачность которой соответствует концентрации спермий 5 мли/мл. В пустую пробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора поваренной соли и 0,1 мл спермы, встряхивают, сравнивают со стандартами, а затем доливают 1%-ный раствор поваренной соли до тех пор, пока прозрачность станет в обеих пробирках одинаковои.
у
После этого определяют концентрацию по формуле К-=50(Н-Р 0,1), в которой № обозначает концентрацию ({мли./мл) спермиев в цельной сперме, abl— объем (мл) добавленного к ней 1%-ного раствора хлористого патрия. Фотоэлектроколориметрический метод определения HOCTH мутных жидкостей со взвешенными частицами концентрации спермы. Этот метод основан па способпоглощать свет прямо пропорционально числу этих частиц. Степень поглощения пропускаемого через исследуемую жидкость светового пучка определяется в фотоэлектроколориметре (ФЭК). При определеини концентрации на ФЭК сначала строят калибровочную KpHвую.пентрациейДля этогоспермиевберут ипробыустанавливаютспермы с вразличнойФЭК ux опти-конческую плотность, по которой в дальнейшем судят о
ИЯконцентрации спермиев B исследуемых пробах. Построенную традуированную кривую следует ежемесячно проверять, так как показания прибора могут изменяться из-за старения фотоэлемента и лампы накаливания. Сходен по принципу с ФЭК и метод определения концентрации спермиев при помощи фотоэлектрического эритрогемометра. Фотоэлектрические методы позволяют быстро (за 2—3 Mun) определить концентрацию спермы. Однако эти приборы созданы для анализа Heтинных растворов, а сперма является взвесью спермиеви в ней имеется меньшее и большее количество эпнG 2 aT © Ы телиальных клеток, результат может быть RICO HEN Поэтому продолжаются поиски более точных и быстрых методов определения концентрации спермы. Предложены весовой и объемный методы определе: ния концентрации спермиев по измерению осадка после центрифугирования спермы (Братанов, Болгария); погренгность не более 10%. 5 По величине электрического сопротивления. Было замечено, что величина электрического сопротивления зависит OT TG ALG и концентрации а Быстрый (37—40 с) и точный метод подсчета числа спермиев в сперме на скоростном автоматическом счетчике клеток вым. Для этого— пеллоскопеможно использоватьразработани М.венгерскийTI. Рязание-приаценка спермы4 поном дщылазняь= чехол Н. П. Шергина). Метод основан на учетеу интенсивностии потребления спермиями кислорода, растворенного = сперме. Об интенсивности дыхания ив судят и скорости обесцвечивания da anes se Ubecnaeen сини, добавленного м нтизнее дохание, Ра обесцвечивается | раствор, 4тем интенсивне . ae Оценку производят следующим образом. такой пипеткой па предметное стекло наносят каплю свежеполученной спермы, другой пипеткой добавляют такого же размера каплю 0,01%-ного раствора метиленовой сини, приготовленной на физиологическом растворе, смешивают и быстро насасывают | в каналae _ стеклянногостек | капилляра, чтобы образовался окрашенный в голубой цвет столбик длиной 2—3 см. Трубочку кладут горизонтально на белый лист бумаги, следят. Происходит | И Co] тричем с концов Seeя ceeanteL ИЕ aie, еоу о
|
- Оценка качества спермы по редукции метиленовой синя Время обесцпечивания спермы,минмин |
Время обесцпечивания спермы,минмин | гЗи San | рии Оценка, спермы = и 1 oe м aun. a7 ania Более 30 pone 12 ноку о тпенното осеменения пепригодяа
поступлении кислорода через свободный конец, Оцен. ку проводят при постоянной температуре 20—22° (табл. 8). Обеснвечивание снии спермой хряка и жеребца затягивается до 60 мин, поэтому для оценки. их спермы этот способ неприемлем, : Оценка спермы по подвижности спермиез. Основное винманне при оценке спермы обращают на подвижность спермиев. При этом учитывают спермии, имеющие прямолинейное поступательное движение. Оценку спермы по подвижности спермиев производят по десятибалльной системе путем учета подвижности каждых 10 спермиев в поле зрения. Если все десять спермнев имеют поступательное движение, то ставится наивысшая оценка 10 баллов. Если из 10 обладают прямолинейно-поступательным движением 9, то оценка 9 баллов, если 83 баллов, 6—6 баллов и т. д. Это значит, что в процентпом отношении сперма содержит 100—90—80—60 % спермиев с поступательно-прямолниейным движением. Для удобства учета спермиев в густой сперме к наиесенпой на предметное стекло капле спермы приливают Abe капли разбавителя, 1% раствора поварениой соли, или 2,8%2,8% р:раствор:ра нитрататрата натрия.на’ 1Капли необхолимо тщательно смешать, если канли накрыть покровным стеклом, не перемешав, то в зону раствора перейдут подвижные спермии, что приведет к ошибке в оценкс. у Следует учитывать, и что слабоеу проявление< движеа ния может быть вследствие недостаточного нагрева предметного стекла. В практике свежеполученную сперму оценивают комплексно. При оценке спермы на густоту и подвижотражатьностьражапользуютсяее качество.а обозначением,НаТапример,с позволяющимT—10баллов,Е удобиеГ= 9 10 Заказ 7181 #45
