влияние лизоцима на иммунитет у животных.
К показателям, отражающим состояние гуморального иммунитета, относят гетерофильные агглютинины. Гетерофильные агглютинины относятся к группе так называемых нормальных антител и являются компонентом сыворотки крови (иммуноглобулины). Образуются агглютинины в результате спонтанной иммунизации антигенами, которые широко распространены в природе. Повседневно, сталкиваясь с антигенами в крови животного, образуются соответствующие антитела. В нормальных условиях естественные антитела содержатся в низких титрах. Однако при определенных патологических состояниях, сопровождающихся нарушением обменных процессов, повышенным уровнем эндогенных веществ или их метаболитов, происходит индукция иммунологических механизмов, приводящая к повышению уровня нормальных антител (Мягкова М.А. с соавт., 1999). В современном представлении защитная роль антител заключается в том, что, соединяясь с антигеном, они изменяют его, переводя в неактивное состояние, и таким образом дают возможность действовать неспецифическим факторам защиты.
Иммунный ответ осуществляется как путем непосредственного контакта между клетками-участниками иммунного ответа, так и гуморальным путем. Гуморальное звено регуляции обеспечивается олигопептидами, получившими название «цитокины». Они являются регуляторами многих функций лимфоцитов, акцессорных и стволовых клеток. В основе механизма их действия лежит свойство вызывать дифференцировку, пролиферацию или гибель клеток. Цитокины представлены семействами пептидов, называемых интерлейкинами, интерферонами, факторами некроза опухолей, трансформирующими факторами роста, колониестимулирующими факторами. Интерлейкины осуществляют гуморальную связь между макрофагами и лимфоцитами, а также с другими клетками организма; интерфероны – естественную защиту организма от вирусов; колониестимулирующие факторы способствуют продукции форменных элементов крови; факторы некроза опухолей обладают противовоспалительными, иммуностимулирующими и гемопоэтическими свойствами; факторы, трансформирующие рост клеток, характеризуются противовоспалительным действием, участвуют в качестве ингибиторов антителообразования и дифференцировки цитотоксических
клеток. В процессе иммунного ответа цитокины начинают продуцироваться клетками только в ответ на антиген (Галактионов В.Г., 1998).
Таким образом, в создании иммунитета участвует весь организм как целая система, защитные механизмы которого взаимосвязаны и взаимообусловлены в этих функциях. Наряду с факторами специфической защиты (антитела, сенсибилизированные иммунокомпетентные клетки) действуют многочисленные неспецифические факторы и механизмы: кожно-слизистые и гематогенные (лимфатический и кровеносный) барьеры, лизоцим, комплемент, цитокины и фагоцитоз.
Взаимосвязь показателей иммунобиологической реактивности организма животных c их воспроизводительной функцией
Состояние здоровья животных в значительной мере определяется уровнем их иммунобиологической реактивности, которая у самок варьирует в зависимости от их физиологического состояния, связанного с воспроизводительной функцией (Сысоев А.А., 1978; Семенюта А.Т., 1981; Селиванов А.В. и др., 1984; Денисенко В.Н. и др., 1987; Гугушвили Н.Н., 2000 и другие).
Изучение иммунобиологической реактивности организма животных в различные стадии их репродуктивной деятельности позволяет выявить критические периоды с целью корректирования иммунобиологического статуса.
Скопец Б.Г. (1988), изучая активность клеточных иммунных реакций методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) в модификации Бронской и др. (1980), а также в кожной пробе с фитогемагглютинином, заметил, что отклонения от активности клеточного звена иммунной системы от средних величин как в сторону повышения, так и понижения через 1-2 месяца после отела (то есть в период, предшествующий осеменению), наблюдаемые в обеих реакциях у 20-30% коров, совпадают со значительным удлинением продолжительности бесплодия (20-40 дней).
Как свидетельствуют исследования Е.П. Кота с соавт. (1986), показатели Т- и В-клеточного иммунитета у коров и телок находятся в определенной взаимосвязи с их воспроизводительной функцией.
Проявление половой охоты у коров и телок сопровождается повышением у них количества лейкоцитов и циркулирующей крови, а процент лимфоцитов, относительное и абсолютное число среди них Т- и В-лимфоцитов, наоборот, снижается.
По данным И.М. Грязновой с соавт. (1987), у женщин с физиологически протекающей беременностью показатели клеточного иммунитета претерпевают циклические изменения. При сроках беременности до 8 недель активность ЕК (естественные клетки-киллеры, обладающие способностью лизировать клетки опухолевых линий без предварительной сенсибилизации) значительно снижена. В период с 9 по 16 нед. отмечается некоторое ее восстановление, а во 2 и 3 триместрах она постепенно снижается вплоть до 36-й недели, статистически достоверно отличаясь от контроля. Аналогичные изменения претерпевают и количественные показатели Т-лимфоцитов. С 36 недели их количество начинает увеличиваться и к родам достигает цифр, характерных для небеременных женщин. Относительное количество и абсолютное число В-лимфоцитов и «нулевых» лимфоцитов в динамике физиологической беременности изменяются мало. На основании этого автор делает вывод, что снижение показателей клеточного иммунитета при физиологически протекающей беременности совпадает с критическими периодами развития плода и, по всей вероятности, направлено на предотвращение реакций отторжения фетоплацентарного комплекса.
Аналогичные изменения показателей клеточного иммунитета в динамике физиологически протекающей беременности отмечены и Л.В. Тимошенко с соавт. (1989).
По данным Р.М. Васильева (2001), процентное содержание Т- и В-лимфоцитов до и после родов у коров достоверно не изменялось. Так, за 3 дня до родов показатели Т-лимфоцитов составляли 39,95±1,24%, а через сутки после них - 43,15±1,25% (Р>0,05). Процент В-лимфоцитов соответственно равнялся 18,7±1,02 и 17,6±0,9 (Р<0,05).
Иным было абсолютное содержание субпопуляций лимфоцитов, так число Т-лимфоцитов до отела составляло 1,95±0,1 Г/л, а после него уменьшалось до 1,6±0,09 Г/л (Р<0,05). Что касается В-лимфоцитов, то их количество, хотя и имело тенденцию к снижению, но было статистически недостоверным.
Н.Б. Кукушкин с соавт. (1999) предполагают, что в периферической крови количество Т-лимфоцитов повышается преимущественно за счет Т-хелперов. Данная популяция лимфоцитов имеет важное значение в формировании иммунного ответа организма на антигенную стимуляцию бурно развивающейся микрофлоры матки. На ранних стадиях воспаления эндометрия Т-хелперы способствуют распознаванию чужеродных антигенов бактерий и индуцируют трансформацию В-лимфоцитов в плазматические клетки, синтезирующие антитела. Позднее роль данных клеток в формировании иммунного ответа ослабевает, и их уровень в крови постепенно снижается до нормы.
При угрозе прерывания беременности у женщин О.К. Баргесян и Н.Ю. Сотникова (1989) установили следующую динамику показателей клеточного и гуморального иммунитета: в первом триместре отмечалось повышение содержания лейкоцитов, лимфоцитов, абсолютного содержания Т- и О-лимфоцитов, снижение относительного содержания В-лимфоцитов. Содержание иммуноглобулинов достоверно не изменялось. Во втором триместре наблюдалось снижение абсолютного и относительного количества Т-лимфоцитов, Ig G b; Ig A, повышение абсолютного и относительного содержания О-клеток.
Исследования, проведенные В.Н. Серовым и др. (1986), позволили установить, что у женщин при нормальном течении беременности к концу 3-го триместра отмечается тенденция к восстановлению иммунобиологической реактивности до уровня небеременных. Абсолютное количество и функциональная активность иммунокомпетентных клеток возрастают, соотношение их субпопуляций восстанавливается. Отсутствие данных изменений у беременных, по мнению автора, может осложнять период родоразрешения и послеродовой период.
А.А. Сысоев, М.П. Рязанский (1971) отметили, что количество лейкоцитов в крови коров во время охоты находится в пределах 7,72±0,10х109 /л, затем в динамике развития беременности оно снижается до 7,04±0,10х109 /л на 6-м месяце беременности и возрастает к моменту отела до 8,57±0,10 х109 /л. При этом в крови коров в первой половине стельности отмечается увеличение процентного содержания лимфоцитов с 60,4% до 63,2% и их снижение к моменту отела до 51,3%.
Количество лейкоцитов у коров с субинволюцией матки отличается от здоровых незначительно, в то время как при гнойно-катаральных эндометритах этот показатель выше на 5,87% до и 10,1% после родов (Багманов М.А., Мухаметгалиев Р.Н., 2001).
По данным Пикаловой Т.А. с соавт. (1988), проводившими исследования проб крови от беременных коров, начиная с 5-го месяца беременности и до родов, у животных с физиологическим течением родов и послеродового периода на 5-м месяце беременности количество лейкоцитов составляло 9,7±1,1х109 /л, к шестому месяцу оно снижалось до 6,6±0,3х109 /л и постепенно повышалось к девятому месяцу до 9,1±0,1х109 /л. У животных с патологией родов и послеродового периода отмечалось более низкое содержание лейкоцитов на 8-м и 9-м месяцах беременности, соответственно 5,7±0,3 и 6,6±0,2х109 /л. Содержание эритроцитов и гемоглобина у коров с родовой и послеродовой патологией на 9-м месяце беременности также было ниже – 5,6±0,1 против 6,2±0,1х1012 /л и 93±5,7 против 104±3,1 г/л. В лейкоформуле у коров по мере увеличения сроков физиологически протекающей беременности отмечалось повышение содержания эозинофилов с 11,5±0,8 до 16,2±1,1%. Остальные показатели достоверно не изменялись, в то же время у коров с патологией родов и послеродового периода по сравнению со здоровыми животными на всем протяжении исследований относительное содержание лимфоцитов было ниже (на 4-8%) на фоне повышения количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов (2-4%).
Результаты исследований, проведенных В.И. Слободяником (1994), свидетельствуют, что у коров в середине и конце лактации (3-7 месяцы беременности) количество лейкоцитов в крови остается стабильным, а в начале снижается на 29,1%, что автор обусловливает перераспределением их из кровяного русла в репродуктивные органы во время и после родов, для обеспечения нормального протекания инволюционных процессов. Наряду с этим в начале лактации была отмечена активизация гемопоэза и изменение содержания форменных элементов в крови (простая регенерация нейтрофилов и моноцитов).
К важнейшим факторам специфической и неспецифической защиты организма животных относится фагоцитоз - способность к активному захвату и внутриклеточному перевариванию микробов и
других посторонних для организма частиц (Мечников И.И., 1951). Фагоцитарная активность лейкоцитов, в частности нейтрофилов, их количественные и качественные изменения зависят от вида, пола и возраста животных, индивидуальных особенностей организма, состояния его здоровья, типа высшей нервной деятельности. При этом лейкоциты играют большую роль и в процессах размножения животных.
Исследованиями А.А. Сысоева и Г.Н. Григорова (1973, 1974) установлено, что в период охоты фагоцитарная активность нейтрофилов находилась на относительно высоком уровне и составляла 65,3±3,6%, тогда как первая треть стельности сопровождалась его снижением до 47,05-52,8%. С третьего по седьмой месяц беременности авторы отмечали повышение фагоцитарной активности до 60,964,8%, к восьмому месяцу она снизилась до 54,05±3,0%, а затем повышалась и достигала в момент отела максимального уровня (66,7±2,6%).
По данным А.Г. Нежданова (1981), фагоцитарная активность лейкоцитов перед родами более выражена у животных, предрасположенных к патологии послеродового периода (63,2±6,13 против 45,0±6,45 у здоровых коров или выше на 40,4%). В послеродовой период автором было отмечено снижение процента фагоцитировавших лейкоцитов у больных животных до 48,0±6,15%, что на 6,8% ниже клинически здоровых коров, а также фагоцитарного числа на 12,3% и фагоцитарного индекса на 29,7%.
Аналогичные изменения данных показателей установлены Р.Ч. Моцкалюнасом (1988) – более высокая фагоцитарная активность нейтрофилов в предродовой период отмечена у коров, предрасположенных к развитию акушерской патологии (53,5±2,6 против 46,7±3,1%), а в послеродовой - у здоровых (на второй неделе- 58,5±2,5 против 45,5±2,6%). С развитием воспаления матки отмечено снижение и фагоцитарного индекса - 2,9±0,2 против 3,5±0,3.
Одним из важнейших компонентов гуморальной защиты являются иммуноглобулины сыворотки крови, способные вступать в реакцию с веществами, вызвавшими их образование – антигенами. Образование иммуноглобулинов происходит в плазматических клетках (В-лимфоциты) под воздействием антигенной стимуляции. По своей структуре Ig относятся к белкам гамма-глобулиновой фрак-
