синтетический аналог простагландина Ф-2 альфа.

Среди биологических регуляторов половой функции за последнее десятилетие широкую известность приобрел препарат «Сурфагон» - синтетический аналог гонадотропного рилизинг-гормона. Препарат «Сурфагон» (и его аналоги: диригестран, фертирелин, гонадоребелин, бусерилин, люлиберин и др.) при парентеральном введении вызывает выделение лютеинизирующего гормона, уровень которого в периферической крови повышается уже через 30 минут после инъекции этого гормона, достигает максимума через 2-3 часа. Выделение больших количеств лютеинизирующего гормона стимулирует процесс овуляции. Опираясь на эти данные, мы в своих экспериментах применили препарат «Сурфагон» для стимуляции фолликулогенеза и овуляторной функции яичников, с целью повышения оплодотворяемости.

Экспериментальные исследования были проведены на коровах симментальской породы на молочно-товарной ферме учебно-опытного хозяйства «Байкал» Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В.Р. Филиппова.

Были отобраны 22 коровы, находящиеся в послеродовом периоде по принципу аналогов, из которых сформировали две группы коров: опытная и контрольная. Опытная группа была сформирована из 11 коров, контрольная также из 11 коров. Коровам подопытной группы – для повышения иммунобиологической резистентности организма однократно внутримышечно инъецировали иммуномодулятор «Полирибонат» 0,1 мг/кг, с целью повышения общего биологического тонуса и мобилизации защитных сил организма мы применили трехкратно с интервалом 7 дней водорастворимый комплекс витаминов «Нитамин», который инъецировали в дозе 0,2 мл/10 кг внутримышечно. Животным обеих групп независимо от гормональной фазы (дня) полового цикла был инъецирован препарат «Эстрофан» в дозе 2 мл внутримышечно. Выборку коров обеих групп после инъекции им препарата «Эстрофан» проводили по проявлению ими клинических признаков стадии эструса полового цикла и результатам ректального исследования, которое проводили утром и вечером. В период исследования коровы, проявившие стадию эструса полового цикла, находились под тщательным наблюдением до проявления ими половой охоты. По мере проявления коровами подопытной группы половой охоты мы инъецировали

внутримышечно им препарат «Сурфагон» в дозе 5 мл (25 мкг) за час до проведения им искусственного осеменения. Искусственное осеменение животным обеих групп проводили замороженно-оттаянной спермой, предварительно дважды оцененной на пригодность с интервалом 12 часов (утром и вечером) (табл. 4).

Таблица 4 – Схема гормональной обработки коров

В период проведения экспериментов учитывалась продолжительность периода от инъекции препарата «Эстрофан» до проявления коровами обеих групп стадии эструса полового цикла (в часах), сервис-периода и индекс-осеменения.

Обработка результатов исследований. Полученный эксперимен- тальный материал обработали методом вариационной статистики с использованием таблицы Стьюдента с вычислением средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±m), критерия Стьюдента (t) и уровня доверительной вероятности (Р) (Пецик Л.А. с соавт., 1980).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Иммунобиологическая реактивность организма и ее влияние на оплодотворяемость коров

В процессе эволюции у млекопитающих животных появились тонкие механизмы распознавания начала беременности и последующего поддержания на всем ее протяжении. Определяющими факторами длительности беременности у плацентарных млекопитающих являются размеры тела матери и морфологическое совершенство плаценты. Однако, в зависимости от среды обитания живот-

ных влияют на течение беременности и другие факторы, которые негативно сказываются на эмбриональном периоде. Критическим периодом в развитии эмбрионов является срок от разрыва у них прозрачной оболочки до перехода их на плацентарный тип питания. В этот период гибнет значительное количество зародышей по причине губительного действия иммунных тел матери. Иммунная система матери обладает тонкой способностью распознавать чужеродные антигены, но вместе с тем между эмбрионом и организмом матери создаются отношения взаимной терпимости-толерантности. Оказывается, такие гормоны, как прогестерон или хорионический гонадотропин связаны с иммунными реакциями матери при беременности, позволяя материнскому организму приспосабливаться к эмбриональному аллотрансплантанту. Очевидно, прогестерон, являясь одним из необходимых гормонов для поддержания беременности, во время стимуляции секреции эмбриотрофа маточными железами, в то же время снижает иммунные реакции в матке. Кроме того, ранний зародыш, который образовался, уже в первые часы после оплодотворения яйцеклетки образует иммуннодепрессорный фактор, который затрудняет лимфоцитам распознавание чужеродных антигенов эмбриона.

Из сказанного можно предположить, что искусственное ослабление иммунных реакций организма самки (создание иммунодефицита) может способствовать повышению процента приживления (имплантации) эмбриона.

В настоящее время стало известно, что распознавание чужеродных антигенов зародыша материнской иммунной системой приводит не к формированию реакции отторжения, а к становлению иммунотрофического взаимодействия в системе самка – зародыш. При этом часть эмбриональных потерь может быть обусловлена нарушением становления названного иммунотрофического взаимодействия.

В связи с вышеизложенным, исследования были направлены на изучение динамики иммунологических показателей крови коров в период осеменения и имплантации, поскольку в последнем случае отмечается наиболее высокая эмбриональная смертность, связанная с неадекватным ответом материнского организма на антигены плода.

Из 18 подопытных животных 50% осеменялись первый раз после родов (продолжительность периода от отела до осеменения составила 38±4 дня), 23% - второй раз (продолжительность периода то

отела до учитываемого осеменения - 81±4 дня), 18% - третий раз (150±11 дней), 9% - четвертый раз (244±40 дней).

В результате проведенных иммунологических исследований не было выявлено достоверного различия между животными, осеменявшимися неодинаковое количество раз и в различные сроки после отела.

Результаты иммунологических исследований проб крови показали, что у оплодотворившихся коров (n=7) по сравнению с оставшимися бесплодными (n=11), независимо от кратности осеменения, показатели иммунобиологической реактивности на 1-3-й день после осеменения находились на более высоком уровне (табл. 5), (рис.1-6).

Таблица 5 – Иммунологические показатели крови оплодотворившихся и неоплодотворившихся коров во время осеменения

• • Р<0,05 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

** - Р<0,01 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

***- Р<0,001 по сравнению с неоплодотворившимися коровами

Исследованиями последних двух десятилетий было доказано, что иммунный механизм организма срабатывает на чужие клетки и ткани.

Известно, что белые кровяные клетки в первую очередь реагируют на внедрение чужеродных антигенов. Лейкоциты, выполняющие защитную функцию организма, находятся в определенной связи с воспроизводительной функцией животных.

Из таблицы 5 видно, что количество лейкоцитов во время осеменения оплодотворившихся коров по сравнению с неоплодотворившимися (рис.1) было выше на 6,1% (7,96±0,13 против 7,50±0,04 тыс./мкл, Р<0,001).

Что касается второй, наиболее крупной группы клеток крови – лимфоцитов, то и здесь были отмечены характерные изменения (рис. 2). Количество лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров по сравнению с оставшимися бесплодными находилось на более низком уровне, соответственно на 4,8 % (58,4±2,53 против 61,3±1,28 %).

В современной клинической иммунологии для оценки функционального состояния лимфоидной системы иммунитета учитывают количественные показатели Т- и В-лимфоцитов как главных элементов иммунной системы, которые, обладая антигенными рецепторами, способны распознавать чужеродный агент и организовывать иммунный ответ.

Уровень Т-лимфоцитов в крови животных обеих групп существенно отличался (рис. 3). У оплодотворившихся коров процентное содержание Т-лимфоцитов выше на 21,8 % (42,4±0,92 против 34,8±1,14%, Р<0,001).

Существуют разновидности Т-лимфоцитов: Т–хелперы, и Т- супрессоры. Т-хелперы – помощники возникновения иммунного гуморального ответа и усиления реакции клеточного типа. Из таблицы 5 видно, что уровень Т-хелперов выше на 12,9 % (26,2 ± 0,95 против 23,2 ± 1,04 %, Р<0,05), а Т-супрессоров ниже на 31,7 % (11,2 ± 0,77 против 16,4±1,18 %, Р<0,001). Т-супрессоры блокируют антителообразование В-лимфоцитами и подавляют активность Т-хелперов (рис. 4).

Существенные количественные различия отмечены в клеточном звена иммунитета у В-лимфоцитов – основных продуцентов антител (рис. 5). Уровень В-лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров оказался ниже на 14,6%, чем у неоплодотворившихся (24,6±0,83 против 28,8±1,24%, Р<0,01).

Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов, или процент фагоцитоза (50,2±0,77 и 48,2±0,71 %), и циркулирующих иммунных комплексов, возникающих в ходе иммунного ответа (115,8±0,77 и 114,6±0,92 усл.ед.) в крови животных обеих групп, находились примерно на одном уровне (рис. 6).