| 8,2 8 7,8 7,6 лейкоциты (тыс./мкл) 7,4 7,2 7 6,8 6,6 Рис. 7. Динамика содержания лейкоцитов в крови оплодотворившихся коров | 58,9 58,8 58,7 58,6 лимфоциты, % 58,5 58,4 58,3 58,2 Рис. 8. Динамика содержания лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров |
|---|---|
| 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Т-лимфоциты, % Т-хелперы, % Т-супрессоры, % Рис. 9. Динамика содержания Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров в крови оплодотворившихся коров | |
| 35 30 25 20 В-лимфоциты (%) 15 10 5 0 Рис. 10. Динамика содержания В-лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров | 140 120 100 80 60 40 20 0 Фагоцитоз, % ЦИК, усл.ед. Рис. 11. Динамика содержания фагоцитарной ак- тивности нейтрофилов и циркулирующих иммун- ных комплексов в крови оплодотворившихся коров |
– 1-3-й день после осеменения; 15-17-й день после осеменения
В то же время показатели иммунобиологической реактивности у оставшихся бесплодных коров отличалась от таких же показателей оплодотворившихся коров (табл. 7, рис. 12-17).
Таблица 7 – Иммунологические показатели крови неоплодотворившихся коров во время осеменения и имплантации
| ПОКАЗАТЕЛИ | 1-3-й день после осеменения | 15-17-й день после осеменения |
|---|---|---|
| Лейкоциты, тыс./мкл | 7,50 ± 0,04 | 7,90 ± 0,11* |
| Лимфоциты, % | 61,3 ± 1,28 | 58,4 ± 1,22 |
| Т-лимфоциты, % | 34,8 ± 1,14 | 41,6 ± 0,83* |
| Т-хелперы, % | 23,2 ± 1,04 | 29,2 ± 0,77* |
| Т-супрессоры, % | 16,4 ± 1,18 | 11,2 ± 0,76* |
| В-лимфоциты, % | 28,8 ± 1,24 | 25,2 ± 1,39 |
| Фагоцитоз, % | 48,2 ± 0,71 | 48,4 ± 0,83 |
| ЦИК, усл.ед. | 114,6 ± 0,92 | 107,8 ± 1,10* |
-
- Р<0,001 по сравнению с 1-3 днем после осеменения
Так, при изучении иммунологических показателей крови подопытных животных было установлено, что количество лейкоцитов в крови оставшихся бесплодными животных во время имплантации зигот (рис.12), по сравнению с периодом осеменения животных увеличивалось на 5,1 % (с 7,50 ± 0,04 до 7,90 ± 0,11 %, Р<0,001), а у лимфоцитов отмечена тенденция к снижению (рис.13) на 4,9 % (с 61,3 ± 1,28 до 58,4 ± 1,22 %).
Противоположная динамика отмечена в количестве Т-лимфоцитов. Так, процентное содержание в крови Т-лимфоцитов у неоплодотворившихся коров к 15-17-му дню после их осеменения оказалось выше на 16,4 % (с 34,8 ± 1,14 до 41,6 ± 0,83 %, Р<0,001), к тому же отмечено более высокое содержание Т-хелперов на 20,5 % (с 23,2 ± 1,04 до 29,2 ± 0,77 %, Р<0,001), а содержание Т-супрессоров резко снизилось на 46,4 % (с 16,4 ± 1,18 до 11,2 ± 0,76 %, Р<0,001), (рис. 14).
















































































































































































































Количество В-лимфоцитов данной группы снижалось на 14,3 % (с 28,8 ± 1,24 до 25,2 ± 1,39 %), в то время как у оплодотворившихся коров, напротив, повышалось (рис. 15). Фагоцитарная активность нейтрофилов крови (процент фагоцитоза) подопытных животных была аналогичной на уровне 1-3-го дня после осеменения, в то время как у оплодотворившихся коров снижалась (рис. 16).
Интересные данные, на наш взгляд, были получены при изучении ЦИК в крови неоплодотворившихся коров. Так, в одинаковой концентрации ЦИК при осеменении животных к периоду имплантации зиготы у оставшихся бесплодных животных по сравнению с оплодотворившимися коровами отмечалось более выраженное снижение концентрации ЦИК на 6,3 % (с 114,6 ± 0,92 до 107,8 ± 1,10 усл.ед., Р<0,001) против 2,3 % у оплодотворившихся коров (рис.17). Снижение ЦИК, по всей видимости, свидетельствует о неадекватном иммунном ответе материнского организма на антигены плода, приводящем к неполноценному течению процессов имплантации и отторжению развивающегося зародыша.
Таким образом, высокая иммунобиологическая реактивность организма коров в период их осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие их организма со сформировавшимся зародышем.
У неоплодотворившихся коров к периоду имплантации, напротив, отмечалась активизация защитных сил организма, пренатальная гибель чаще всего происходит именно в этот период.
Влияние иммуномодулятора «Полирибонат» на уровень иммунобиологической реактивности и оплодотворяемость коров
Предыдущее исследование по изучению динамики иммунологических показателей крови коров в период их осеменения и имплантации зигот показало, что высокая иммунобиологическая реактивность организма коров в период их осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие их организма со сформировавшимся зародышем. Это явилось теоретической основой для разработки эффективных методов коррекции иммунобиологической реактивности, направленных на повышение оплодотворяющей способности коров.
В этом отношении представляют интерес иммуномодуляторы – препараты, обладающие иммунотропной активностью, которые в терапевтических дозах восстанавливают функции иммунной системы (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2000). Учитывая актуальность данной проблемы, мы решили использовать иммуномодулятор «Полирибонат», обладающий способностью увеличивать количество антителобразующих клеток, содержание Т-лимфоцитов и активизировать функцию макрофагов.
Исследования проводили в условиях молочно-товарной фермы учебно-опытного хозяйства «Байкал» Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В. Р. Филиппова и в лаборатории клинической иммунологии Республиканской больницы им. Н.А. Семашко с целью определения эффективности иммуномодулятора полирибонат на оплодотворяющую способность коров. Эффективность препарата изучили на коровах симментальской породы. Коровы находились в одинаковых условиях содержания и кормления.
При выполнении данного раздела научные исследования были проведены в три серии:
В первую серию опыта было включено 55 коров, которые были распределены по принципу аналогов на четыре группы. Коровам первой опытной группы (n=13) с целью стимуляции иммунобиологической реактивности на 1-3-й день после осеменения внутримышечно в область крупа инъецировали 0,1 мг/кг полирибонат, животным второй опытной группы (n=13) инъекцию препарата проводили на 11-13й день после осеменения, коровам третьей опытной группы (n=12) иммуномодулятор инъецировали двукратно – на 1-3-й и 11-13-й день после осеменения. Животным четвертой (контрольной) группы (n=17) препарат не назначали.
67% подопытных коров осеменялись первый раз после отела (продолжительность периода от отела до осеменения (сервис-период) составила 39±3 дня), 25% животных подвергались осеменению вторично (продолжительность периода от отела до учитываемого осеменения составила - 74±5 дней), 7% животных подвергались осеменению третий раз (132±13 дней).
Осеменение животных проводили искусственно замороженнооттаенной спермой быка-производителя Дунай, которая хранилась длительное время в жидком азоте при температуре –196?С в сосуде
Дьюара. При осеменении коров мы использовали ректоцервикальный метод искусственного осеменения, двукратно, с 12-часовым интервалом и только при наличии у них явных клинических признаков проявления половой охоты и течки. Оттаянную сперму перед проведением искусственного осеменения согласно Инструкции по искусственному осеменению коров и телок подвергали исследованию и определяли ее пригодность для осеменения.
Результаты исследования за подопытными животными, представленные в таблице 8, свидетельствуют о том, что использованные схемы применения полирибоната не только не оказывает положительного влияния на воспроизводительную функцию коров, но и ведет к снижению их оплодотворяемости. В частности, после учитываемого осеменения беременность наступила у 64,7% коров контрольной группы, а при применении полирибоната на 1-3-й день после осеменения – у 53,8%, на 11-13-й день – у 46,1% и при двукратном применении полирибоната с 10-дневным интервалом – у 41,6% коров.
Таблица 8 – Влияние иммуномодулятора «Полирибонат»
на оплодотворяемость коров при искусственном осеменении
| Показатели | Группы | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| оп. 1 (n=13) | оп. 2 (n=13) | оп. 3 (n=12) | контр. (n=17) | ||
| В т.ч. осеменяемых коров после отела | 1-й раз | 11 | 8 | 7 | 11 |
| % | 84,6 | 61,5 | 58,3 | 64,7 | |
| 2-й раз | 2 | 4 | 3 | 5 | |
| % | 15,4 | 30,7 | 25,0 | 29,4 | |
| 3-й раз | - | 1 | 2 | 1 | |
| % | - | 7,6 | 16,6 | 5,8 | |
| Стали стельными после учи- тываемого осеменения | коров | 7 | 6 | 5 | 11 |
| % | 53,8 | 46,1 | 41,6 | 64,7 | |
| В т.ч. после осеменения | 1-го | 6 | 4 | 2 | 8 |
| % | 54,5 | 50,0 | 28,5 | 72,7 | |
| 2-го | 1 | 2 | 2 | 2 | |
| % | 50,0 | 50,0 | 66,6 | 40,0 | |
| 3-го | - | - | 1 | 1 | |
| % | - | - | 50,0 | 100,0 | |
| Индекс оплодотворения | 1,76 | 2,30 | 2,30 | 1,70 | |
