шением сенсибилизации материнского организма к антигенам зародыша и адекватному иммунному ответу на них, приводящим к формированию и развитию беременности. Наши данные полностью согласуются с данными, изложенными в главе 2.
Инъекция препарата «Сурфагон» в дозе 25 мкг за час до искусственного осеменения обуславливает повышение оплодотворяемости коров опытной группы. Мы считаем, что данный препарат стимулирует возрастание концентрации в крови лютеинизирующего гормона. Происходит овуляция зрелого фолликула и выход полноценной яйцеклетки в оптимальные сроки при искусственном осеменении.
Таким образом, искусственное стимулирование стадии эструса полового цикла и овуляции зрелого фолликула активизирует половой цикл и овуляторную реакцию яичников в оптимальные физиологические сроки и, тем самым, обуславливает сокращение сервис-периода и индекса-осеменения у коров опытной группы. Более того, как свидетельствуют наши наблюдения, без применения необходимых стимулирующих гормональных, иммуностимулирующих и других биологически активных препаратов нельзя добиться желаемых результатов в осеменении, особенно после родов, а также у длительно не приходящих в половую охоту и многократно осеменяющихся коров.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Управление биологическими процессами, ставшее возможным благодаря современным гормональным биорегуляторам, позволяет проводить мероприятия по сближению эволюции репродуктивных процессов организма животных с технологическими и экономическими требованиями. Биотехнологические методы воспроизводства разработаны для многих видов животных. Применение таких методов управления репродуктивной функцией крупного рогатого скота улучшает показатели плодовитости животных.
Однако потенциальные возможности биотехнологии в практике воспроизводства используются еще далеко не полностью. Перехода исследований от чисто научных к производственным испытаниям и внедрения их в повседневную практику в масштабах, прогнозируемых теоретическими предпосылками, не происходит. Данную тенденцию отмечают в своих публикациях (Шубин А.А., 1988; Хиль-
кевич С.Н., Тяпунин Е.А., Шестаков Е.А. и др., 1996).
Учитывая необходимость интенсивного воспроизводства высокопродуктивных животных, следует принимать во внимание, что они являются наиболее восприимчивыми к заболеваниям, так как представляют собой напряженно функционирующую физиологическую систему, наиболее подверженную срывам. Это также требует разработку специальных методов повышения их воспроизводительной функции.
Проведенный анализ современной литературы позволяет заключить, что нормальное развитие плода обеспечивается специфической перестройкой материнского организма, которая сопровождается морфологическими и функциональными изменениями в иммунной системе беременной. Эти изменения направлены на создание благоприятного иммунологического фона для имплантации зародыша, роста и созревания плаценты, а также органогенеза плода. С середины 20-го столетия иммунологи пытаются установить механизмы, позволяющие матери вынашивать в течение 9 месяцев антигенно-чужеродный плод. Установлено, что для нормального течения беременности имеют значение как системные, так и (возможно, даже в большей степени) локальные иммунологические факторы, оперирующие в месте взаимодействия матери и плода в маточноплацентарной области.
Иммунные реакции, находящиеся под регуляторным воздействием гипофизарных гонадотропинов и половых гормонов, влияют на ранние этапы репродуктивного процесса, включающие сложную систему созревания яйцеклетки, ее оплодотворение и последующее развитие. В последние годы стало ясно, что иммунные эффекторные механизмы являются критическими для успешной имплантации бластоцисты. Необходимо координированное развитие бластоцисты и материнского эндометрия, во время которого происходит диалог между тканями матери и эмбриона, генетически и иммунологически различными (Радченков В.П., 1993; Соколовская И.И., 1994; Баженова Н.Б., 1995; Васильев Р.М., 2001).
В связи с вышеизложенным, многие исследователи (Говалло В.И., Стрижова Н.В., Алиханова И.Д., 1978; Емельяненко П.А., 1987; Скопец Б.Г., 1988; Соколовская И.И., 1994) придают большое значение выявлению иммунологических изменений в организме беременных
животных, позволяющих познать особенности уникальных материнско-плодных взаимоотношений на разных стадиях беременности и при ее патологии, дать теоретическое обоснование и разработать более совершенные методы контроля за течением беременности, профилактики акушерской патологии, и, тем самым, повысить плодовитость животных и жизнеспособность получаемого приплода.
Во многих научных работах показано, что снижение оплодотворяемости животных, повышение эмбриональной смертности, осложнения беременности, влекущие за собой нарушение внутриутробного развития, рождение нежизнеспособного приплода, нарушение течения родового акта и послеродового периода у родильниц является следствием нарушения иммунологических взаимоотношений в системе мать-плод (Говалло В.И., 1987; Баргесян О.К., Сотникова Н.Ю., 1989; Соколовская И.И., 1994; Третьяков С.В., 1999; Зуев А.А., 2000).
Результаты наших исследований подтверждают литературные данные о взаимосвязи иммунобиологической реактивности и воспроизводительной функции коров.
Анализ результатов проведенных исследований продемонстрировал, что высокая иммунобиологическая реактивность организма коров в период их осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие со сформировавшимся зародышем. Оплодотворенная яйцеклетка является соединением белков с различными антигенными свойствами. Известно, что сперматозоиды самцов, введенные в организм, вызывают иммунный ответ клеточного и гуморального характера. Однако в природе, несмотря на иммунологическую несовместимость матери и плода, происходит нормальный процесс роста и развития плода в утробе матери на всем протяжении плодоношения.
В крови оплодотворившихся коров, по сравнению с неоплодотворившимися, на 1-3-й день после осеменения было выше количество лейкоцитов на 6,1 % (7,96 ± 0,13 против 7,50 ± 0,04 тыс./мкл, Р<0,001), процентное содержание Т-лимфоцитов – на 21,8 % (42,4 ± 0,92 против 34,8 ± 1,14%, Р<0,001), уровень Т-хелперов – на 12,9 % (26,2 ± 0,95 против 23,2 ± 1,04 %), Р<0,05), а у Т-супрессоров отмечено снижение – на 31,7 % (11,2 ± 0,77 против 16,4±1,18 %, Р<0,001). Уровень В-лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров оказался ниже на 14,6%, чем у неоплодотворившихся (24,6±0,83 против
28,8±1,24%, Р<0,01). Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов и циркулирующих иммунных комплексов в крови животных обеих групп находились примерно на одном уровне.
Периоду имплантации у оплодотворившихся животных свойственно снижение показателей неспецифической резистентности (количества лейкоцитов на 11,5 % (с 7,96 ± 0,13 до 7,14 ± 0,09 тыс./мкл, Р<0,001), процентное содержание Т-лимфоцитов – на 5,5 % (с 42,4 ± 0,92 до 40,2 ± 0,52, Р<0,05), Т-хелперов – на 10,1 % (26,2 ± 0,95 до 23,8 ± 0,52 %, Р<0,05), фагоцитарной активности нейтрофилов крови с 50,2 ± 0,77 до 47,6 ± 0,83 % (на 5,5 %, Р<0,05) и уровня ЦИК – на 7,1 % ( с 115,8 ± 0,77 до 113,2 ± 1,53 усл.ед., Р<0,001)), связанное, по-видимому с действием иммунодепрессивных факторов, вырабатываемых зародышем при беременности.
У неоплодотворившихся коров к периоду имплантации, напротив, отмечалась активизация защитных сил организма (повышение количества лейкоцитов на 5,1 % (с 7,50 ± 0,04 до 7,90 ± 0,11 %, Р<0,001), а у лимфоцитов отмечена тенденция к снижению на 4,9 % (с 61,3 ± 1,28 до 58,4 ± 1,22 %), содержание в крови Т-лимфоцитов выше на 16,4 % (с 34,8 ± 1,14 до 41,6 ± 0,83 %, Р<0,001), к тому же отмечено более высокое содержание Т-хелперов – на 20,5 % (с 23,2 ± 1,04 до 29,2 ± 0,77 %, Р<0,001), а содержание Т-супрессоров резко снизилось – на 46,4 % (с 16,4 ± 1,18 до 11,2 ± 0,76 %, Р<0,001), количество В-лимфоцитов имело тенденцию к снижению на 14,3 % (с 28,8 ± 1,24 до 25,2 ± 1,39 %), в то время как у оплодотворившихся коров, напротив, повышалось. Фагоцитарная активность нейтрофилов крови неоплодотворившихся животных была аналогичной на уровне 1-3-го дня после осеменения, в то время как у оплодотворившихся коров, напротив, снижалась. Также было отмечено более выраженное снижение концентрации ЦИК – на 6,3 % (с 114,6± 0,92 до 107,8 ± 1,10 усл.ед., Р<0,001) против 2,3 % у оплодотворившихся коров, по всей видимости, обуславливающее высокие пренатальные потери на ранних стадиях развития зародыша.
В связи с вышеизложенным, нами выявлено, что периоду имплантации зиготы у оплодотворившихся животных наблюдалось снижение показателей иммунобиологической реактивности организма, и наиболее важным фактором, на наш взгляд, является в этот период наступление толерантности. Мы предполагаем, что такая
взаимозащита обусловлена барьерными способностями плаценты и плодных оболочек: через этот мощный барьер антитела матери не проходят в плод, что связано, по-видимому, с преобладающим влиянием Т-супрессоров, которые появляются в большом числе и препятствуют распознавающей функции Т-хелперов, а также синтезу антител либо бласттрансформации В-лимфоцитов. Эти процессы проходят под непосредственным влиянием сигналов от костномозговых клеток и вследствие регуляции со стороны гипоталамогипофизоадренокортикальной оси. Установлению толерантности в системе самка-эмбрион способствует свойство крови при беременности подавлять активность лимфоцитов, которое появляется в ходе развития продуктов оплодотворения.
Таким образом, при нормальном физиологическом развитии беременности плод находится в условиях строгой, надежной изоляции. Нарушение целостности этого барьера различного происхождения сопровождается иммунопатологическими нарушениями воспроизводительной способности самок.
Исходя из того, что высокая оплодотворяемость животных отмечается на фоне высокой иммунобиологической реактивности, нами были апробированы различные схемы применения иммуномодулятора «Полирибонат» с целью нормализации иммунобиологической реактивности и повышения оплодотворяемости коров.
В ходе проведенных исследований выяснено, что применение иммуномодулятора «Полирибонат» на 1-2-й день после осеменения оказывает выраженное влияние на уровень неспецифической резистентности и обеспечивает повышение оплодотворяемости коров в 1,28 (83,3%) раз выше, чем в контрольной группе (64,7%), что, по всей видимости, связано с повышением сенсибилизации материнского организма к антигенам плода и адекватному иммунному ответу на них, приводящих к формированию и развитию беременности. Результаты иммунологических исследований позволяют сделать заключение, что в крови оплодотворившихся коров во время имплантации, по сравнению с периодом осеменения, отмечалось увеличение количества лимфоцитов на 2,8 %, В-лимфоцитов – на 29,8 %, Т-супрессоров – на 18,6 %, снижение содержания Т-лимфоцитов – на 5,6 %, Т-хелперов – на 10,6 %, фагоцитарной активности нейтрофилов крови – на 6,2 %, ЦИК – на 1,9 % и незначительные измене-
ния в содержании лейкоцитов.
В то же время стимуляция иммунной системы матери в период имплантации зиготы (которому при нормальном развитии беременности свойственно снижение уровня неспецифической резистентности) приводит к снижению процента беременных животных в 1,4-1,5 раза. Причинами такого явления, очевидно, является значительное усиление иммунного ответа материнского организма на антигены плода, связанное с нарушением имплантации и отторжением развивающегося зародыша.
Применение полирибоната в период, предшествующий осеменению (30-35-й день после отела), не только стимулирует проявление половой цикличности у коров после отела (снижение продолжительности периода от отела до первого осеменения на 18,7 дня (70,1±4,9 против 88,3±13,5), но и создает благоприятные условия для оплодотворения, формирования и развития зародыша (снижение продолжительности бесплодия на 11,7 дней и индекса осеменения на 8,5 % (1,53 против 1,66)).
При современном ведении животноводства существенное значение приобретает применение фармакологических средств, направленно влияющих на процессы обмена веществ, усиливающих регенеративные процессы в тканях, повышающих общую резистентность организма.
Ослабление механизмов неспецифической резистентности организма животных, нарушение обменных процессов, активизация условно патогенной микрофлоры являются основополагающими факторами в патогенезе послеродовых заболеваний животных.
Воспалительные процессы в половых органах сопровождаются вторичным иммунодефицитным состоянием, неотъемлемым компонентом которого является недостаточность клеточных и гуморальных факторов неспецифической защиты организма животных.
В этой связи в последнее время все большее внимание уделяется изысканию и совершенствованию средств, направленных на повышение защитных сил организма при болезнях половых органов, включая применение комплексных препаратов различного происхождения, в качестве стимуляторов и модуляторов специфического и неспецифического иммунитета.
По нашему мнению, нарушение половых функций у коров разви-
