а и.м. и]
ь о. ae |
в ^^ о о в.
о Мк "> |
о CA а al
aoc Bs м ; =
1 ee и ; a
о eae y i ey
Bae :
: Е
3 — ‘ {
by be:
ee i eo. и у
и У .
ee м. : :
-
‚м : : oe
Mees eu z
Рис, 37. Термостат с микроскопом для просмотра спермы.
спермы. В некоторых случаях определяют также морфологический состав спермиев — процент нормальных и ненормальных по форме спермиев д, Условия работы со спермой. Свежеполученная сперма при быстром охлаждении подвержена УВЕ му шоку. Поэтому работу со спермой проводят в помещении лаборатории (температура 18—20°). Все предметы в лаборатории, с которыми может соприкасаться сперма (мензурки, покровные и предметные стекла стеклянные палочки и пр.), должны быть чисто ВАН MH, простерилизованными, сухими и промытыми физиологическим раствором. ~ Подвижность (активность) спермиев исследуют по микроскопом при увеличении в 200—300 раз (O6uen he 40 и окуляр 7; объектив 20 и окуляры 10 или 15). Микроскоп ставят так, чтобы прямые солнечные лучи ‘не попадали прямо в зеркало; при слишком сильном освещепии спермии в поле зрения плохо видны. Поле зрения микроскопа должно быть светло-серым. Сперму необходимо оценивать при температ 40° в ящике-термостате или на специальном обв гельном столике (рис. 37). Подогревать предметное
стекло с каплей спермы на огне не следует, так как спермии при этом гибнут. Температура в термостате измеряется термометром и регулируется подбором мощности электроламны или терморегулятором.
Лабораторно-практические занятия
В процессе лабораторно-практических занятий следует изучить строение и способы движения спермиев, влияние на сперму температуры, изотонического, гипертопического и гипотонического растворов, определить жизнеспособность спермиев в слабокислой и слабощелочной среде, выяснить действие на них. антибиотиков. Необходимо оценить качество спермы, охарактеризовать сперму по объему, цвету, запаху; определить под микроскопом густоту и активность спермы по 19-балльной шкале. Учащиеся должны научиться работать с фотоэлектроколориметром; определять концентрацию спермиев, используя для этого счетные камеры и стандарты; определять переживаемость спермиев, подсчитывать соотношение нормальных и патологических форм спермиев. Задание 1. Изучить состав спермы, строение и движение спермиев.
Материалы и оборудование: схема строеиия спермиев, свеженолучениая сперма быка, барана, хряка, жеребца и петуха; сперма животных после ее хранения в течение 24 часов в холодильшике при температуре O°; мнкроскопы, предметные и покровные стекла; 1%-пый раствор хлористого натрия; 1%-ный раствор лимоннокислого натрия. Ход работы. Разбирают вопросы физиологической роли семенников, пузырьковидных, предстательной, куперовых и уретральных желез, а также величины объемов эякулятов и концентрации спермиеву разных животных. Изучают схему строения спермия. Окрашенные мазки спермы просматривают под микроскопом при увеличении не менее 600 раз. Затем каплю спермы чистой стеклянной палочкой наносят на чистое предметное стекло, сверху покрывают покровным стеклом. Канлю берут таких размеров, чтобы она заполняла все пространство под покровным стеклом, но не вытекала. Стекло со спермой кладут на предметный столик микроскопа. С помощью макро- и микровинтов микроскопа наводят объектив так, чтобы в поле зрения были
140
видны спермии. Наблюдают следующие движения спермиев: колебательное, поступательно-прямолинейное, манежное.
Вначале сперму просматривают при тёмпературе 18--20° (температура воздуха’ аудитории), затем подвижность спермиев определяют при температуре 40” (под микроскопом в термостате). После этого каплю спермы быстро охлаждают, для чего на 1—2 минуты предметное стекло со спермой помещают на чашку со льдом, но так, чтобы вода не попала на поверхность стекла. Протирают марлевой салфеткой нижнюю поверхность стекла и помещают под микроскоп. Наблюдают замедленное движение спермиев с постепенным усилением движения при согревании капли спермы. У части спермиев движение не восстанавливается из-за гибели их от резкого охлаждения. Новую каплю спермы на предметном стекле нагревают, поместив на 1—2 минуты на чашку с горячей водой {температура воды 50— 55°), затем просматривают под микроскопом при температуре 40°. Наблюлают усилен-ное движение спермиев, а затем быструю гибель их. Разбирают вопросы об условиях, обеспечивающих активное прямолинейное поступательное движение спермиев, а также явления анабиоза температурного шока en, Об п вы а. и Бе ¢ е соблюде ния температурных условии для спермиев в практике искусственного осеменения. Задание 2. Изучить влияние осмотического давления на спермиев.
Материалы и оборудование: микроскопы, сперма животных; предметные и покровные стекла; стеклянные палочки; пииетки глазные; 1% -ные и 3%-ные растворы хлористого натрия; глюA eG maa цитратнаи разозаильль. : Ход работы. На предметное стекло палочкой наносят каплю спермы, покрывают покровным стеклом и под микроскопом определяют подвижность спермиев. Гаким же путем исследуют сперму в следующих вариангах ее разбавления: а) к капле спермы добавляют 2— 3 капли 1%-ного раствора хлористого натрия; 6) ккапле спермы добавляют 2—3 капли 3%-ного раствора хлористого натрия — наблюдают гибель спермиев; в) к капле спермы добавляют 2—3 капли разбавителя спермы; г) к капле спермы добавляют 2—3 капли дистилли-
4
