Задание 7. Освоить технику замораживания спермы быка.
Ход работы. При проведении занятий используют соответствующие разбавители и оборудование, указанные в разделе по замораживанию спермы быка. Занятия проводят на оборудованной криогенной техникой станции искусственного осеменения животных или в специально оборудованной лаборатории или аудитории. Задание 8. Оттаять и проверить пригодность замороженной спермы производителей (быка, жеребца) для осеменения. . о Е И omate быка НИЕ mie ЕЕ чашки и Е пипетки, предметные и покровные стекла, микроскопы с термостатами или обогревательным столиком, 2,8—3%-ный раствор лимоннокислого натрия (дистиллированная вода—100мл,натрий лимонпокислый— 2,9защитныег, лимоннаяочки икислотадр. — 0,1 г), термометры химические, перчатки,
Ход работы. Из термоса или контейнера, где ниемхранитсямер замороженнаяпредосторожностисперма,(перчатки,вынимаютзащитныес соблюдеочки) необходимое количество гранул, ампул или капилляров со спермой. Гранулы объемом 0,5 мл спермы быка пинцетом переносят в стерильный флакон из-под пенициллина и, так же как капилляры в полиэтиленовом пакете, ампулы со спермой быка или алюминиевые пакеты со спермой жеребца погружают на 1—2 минуты в емкости с теплой водой (38—40°). Затем из пенициллинового флакона стерильной стеклянной палочкой или пипеткой берут (предварительно флакон с оттаянной спермой осторожно покачивают и слегка вращают) каплю спермы, которую наносят на предметное стекло, и к ней добавляют каплю раствора лимоннокислого натрия. Капли смешивают, накрывают покровным стеклом и исследуют подвижность спермиев под микроскопом при 42°. Если сперма была заморожена в гранулах объемом 0,1—0,2 мл, то берут одну гранулу и опускают ее во флакон с 1 мл 2,9—3,0%-ного раствора лимоннокислого натрия.
Из капилляра (пайетта) после извлечения его из полиэтиленового пакета берут вторую или третью по счету каплю и накапывают ее на предметное стекло. Каплю
181
спермы из ампулы или из алюминиевого пакета берут стерильной палочкой, пипеткой, или непосредственно из ныйпакета,спирт),который,открываютпротерев(обрезаютспиртовымкрай) емстерильными(96% - ae Далее а Но omep miei как указано выше. Следует учитывать, что наибольшую подвижность после оттаивания спермии проявляют не сразу, а обычно через несколько минут. Оттаянную сперму используют для осеменения, если в ней не менее 40% спермиев двигаются поступательно-прямолинейно (4 балла). Оттаянную сперму повторно замораживать нельзя. Для более полной оценки выживаемости спермиев в оттаянной сперме ее остаток можно сохранять при температуре 0° в течение трех суток и ежедневно проверять подвижность спермиев (к этому сроку хорошая сперма должна иметь оценку не менее2 баллов, т.е.20% спермиевРезультатыдолжноисследованиядвигаться поступательно).переживаемости оттаянной спермы заносят в журнал по следующей форме:
о и ыы , Е Подвижность repays при о Киички enepnires nowte оттаивания xp ) (6a, и Да(баллы или %) {nec Гвgl | 2 Контрольные вопросы. 1. Зачем разбавляют сперму производиОлейтелей?к 2. одаю, НЕк рA ОВРQ № npousncgiirenel?n реа.Hot)6.3: Xoneаcnep-2. . мы при температуре 5, 20° (разбавители, сроки пригодности спермы). 7. Хранение спермы в условиях температуры 0, +4. 8. Хранение спермы при температуре —196° (замораживание, оттаивание и оценка спермы). 9. Транспортировка спермы (расфасовка, упаковка, термосы, сосуды, условия). 10. Санитарно-гигиенические правила при разбазлении и перевозке спермы. 11. Меры охраны труда при замораживании спермы.
Глава УИ
Техника осеменения самок и способы повышения оплодотворяемости ЕА =
Физиологические основы искусственного осеменения. Способы и техника искусственного осеменения самок животных разных видов основаны на особенностях строения половых органов и физиологических процессов, протекающих у них во время естественного осеменения (спаривания). При естественном осеменении у коров, овец, коз и крольчих сперма попадает во влагалище, а у кобыл естественногои свиней— в матку.осеменения:В связивлагалищныйс этим различаюти маточный. два типа При влагалищном типе осеменения эякуляция у самцов происходит очень быстро и сперма рассеивается по стенке свода влагалища, попадая в складки шейки матки. В шейке, теле и рогах матки спермии в основном продвигаютсяорганов. вследствие сокращения мускулатуры: этих Состояние половой охоты у самок сопровождается резким увеличением возбудимости мускулатуры матки, выражающимся повышением тонуса и усилением ритмических сокращений продольных мышц ее стенки. Сильные сокращения продольных мышц тела и рогов матки одновременнолярных мышц сопровождаютсяшейкиг и широкимрасслаблениемраскрытием каналациркуматки. Все эти сократительные движения мускулатуры органа ведут к всасыванию спермы из шейки и дальнейшему продвижению ее к вершинам рогов матки и яйцел оводам Pp : . Моторика матки находится в прямой зависимости от функционального состояния яичников. Так, например, А. И. Лопырин наблюдал сокращение продольных мышц матки у овец, в яичниках которых имелись зрелые фолликулы. После овуляции сокращения продольных мышц ее ослабевают и заменяются сокращениями циркулярных мышц, имеющими в некоторых случаях характер перистальтики. Затем наступает полное расслабление
183
