rs oe Рис. 41. Смесители:
[ | ~~ 1 — эритроцитный для спермы
|й ga \ быка н барана; 2 — лейкощит-
| pf < \ | ный для Ара и же:
fem [i \ |
4 |
|
| |С )
| | |
| |
Wa)$ а9 | | i
I|=
:
[ 1 2 |
{lj
i
- .
-
№ ‘
.
Ход работы. На верхний конец смесителя надевают резиновую трубку. Сперму барана и быка набирают в него до отметки 0,5. Затем в тот же смеситель набирают 3%-ный раствор хлористого натрия до отметки «101». В 3%-ном растворе хлористого натрия спермии неподвижны, что облегчает технику подсчета. Зажимают оба6 концаateсмесителя4 пальцами (большимб и указатель-ne ным) и встряхивают в течение 1—2 минут. Когда сперма равномерно смешается с раствором, из смесителя выпускают 2—3 каили, чтобы удалить из пипетки смесите{ a a > те . ля раствор, не смешанный со спермои. следующую каплю смешанной спермы наносят быстро на сетку камеры под притертоег покровноеЕ стекло. После этого камеру переносят на предметный столик микроскона и производят подсчет спермиев при увеличении в 400—600 раз. у 80 маленькихПодсчет производятквадратиках),в пятирасположенныхбольших квадратахпо диагона-(в ли сетки, и только TeX спермиев, головки которых лежат в данном квадратике или размещены на верхней и левой линиях его (рис. 42). При подсчете количество спермиев в каждом большом квадратедр (16 малых)° записывают LP отдельноonyuket te 148
Подсчет удобно вести с помощью счетчика для лейкоцитов. крови. При просмотре первого большого квадpata камеры, т. е. 16 малых квадратиков, нажимают пальцем на первый клавиш счетчика столько раз, сколько там спермиев. При просмотре второго большого квадрата нажимают на второй клавиш, третьего— на ‘третий клавиш и т. д. Вверху против каждого клавиша будет сумма подсчитаиных спермиев. * По окончании подсчета суммируют число спермиев во всех пяти больших квадратах. Например, в первом большом квадрате (16 маленьких) насчитано 45 спермиев, во втором — 48, в третьем— 52, в четвертом— 56, в пятом— 53, а всего в пяти больших квадратах 244 спермия. Эзу цифру делят на 100 и получают 2,44 млрд. спермиев в 1 мл спермы. Если сиерму набирали в смеситель до отметки 1,0, то полученную сумму спермиев делят на 200. Если разбавление производи| лось в лейкоцитном смесителе и сперму набирали до отметки 0,5, то сумму спермиев делят na 1000. Например, при подсчете спермяев в сперме хряка, разбавленной в 20 раз в лейкоцитном смесителе, число спермиев в пяти больших квадратах оказалось 240; эту цифру оделятс на 1000 и получают концентрациюиспермиев в | мл, равную || р a au aan у - | =, Е Tecate ck peoonntemice ey Да P Hie | п — число спермиев, подсчитанных в 80 малых квадратах; Д— степень разбавления спермы в меланжере; № — число малых квадратов, в которых произведен подсчет; 400На — число малых каквадратовDE EIна площади в 1 мм?.
Высчитанное по этой формуле число обозначает количество спермнев в I MM‘, Для определения числа спермиев в 1 мл полученное число умножают на 1000.
Таблица 11
Количество спермиев животных разных видов в 1 мл (в млрд.)
| a спермиев | животных разных | видов в 1 мл a | (в млрд.) |
|---|---|---|---|
| ih ic | LL а | р м | |
| оБараны | И | ||
| Быки Хряки Жеребцы 7 | 2 1 0,2 0,2 „= , | 05—1 1—2 0,11—0,2 01—02 АЕ: , , | 05 1 Ol Ol , , |
Для точности подсчет спермиев в камере проводят два раза. После работы смесители, камеры, предметные и покровные стекла тщательно моют сначала простой, а затем дистиллированной водой и спиртом. или Чтобыбарана,определитьумножают общееустановленноеколичествов | спермиевмл количествов эякулятеспермиевбыкана объем эякулята, а у жеребца и хряка — на объем спермы после фильтровання, т, е, удаления густых секретов придаточных желез, Пример: объем профильтрованного эякулята хряка 220 мл, концентрация спермиев 0,16 млрд. в | мл.
0,16Х220=35,2i мир. в спермеЗаданиебыка8. Определитьпри помощи концентрациюфотоэлектроколориметраспермиев ФЭК-М Матер иалы и оборудование: фотоэлектроколориметр ФЭК М; 3.5%-ный раствор лимоннокислого натрия; воронка с бу мажным фильтром; пенициллиновые флаконы; пипетка измерительная, градуированная на 10 мл; MukponunerKa; сперма быка. основанХод наработы.том, что черезПринципкюветуработы(сосуд)этогосо прибораспермой пропускают пучок световых лучей определенной силы, который затем попадает на селеновый фотоэлемент, соединенный с гальванометром. Через гальванометр проходит электрический ток, величина которого обратно пропорциональна мутности спермы, т. е. концентрации спермиев. Для проведения исследования приготовляют 3,5% -ный раствор лимоннокислого натрия на дистиллированной воде, фильтруют его через бумажный фильтр и разливаютв хорошо вымытые и просушенные флаконы из-под пенициллина по 9,9 мл в каждый флакон.
150
