Высчитанное по этой формуле число обозначает количество спермнев в I MM‘, Для определения числа спермиев в 1 мл полученное число умножают на 1000.
Таблица 11
Количество спермиев животных разных видов в 1 мл (в млрд.)
| a спермиев | животных разных | видов в 1 мл a | (в млрд.) |
|---|---|---|---|
| ih ic | LL а | р м | |
| оБараны | И | ||
| Быки Хряки Жеребцы 7 | 2 1 0,2 0,2 „= , | 05—1 1—2 0,11—0,2 01—02 АЕ: , , | 05 1 Ol Ol , , |
Для точности подсчет спермиев в камере проводят два раза. После работы смесители, камеры, предметные и покровные стекла тщательно моют сначала простой, а затем дистиллированной водой и спиртом. или Чтобыбарана,определитьумножают общееустановленноеколичествов | спермиевмл количествов эякулятеспермиевбыкана объем эякулята, а у жеребца и хряка — на объем спермы после фильтровання, т, е, удаления густых секретов придаточных желез, Пример: объем профильтрованного эякулята хряка 220 мл, концентрация спермиев 0,16 млрд. в | мл.
0,16Х220=35,2i мир. в спермеЗаданиебыка8. Определитьпри помощи концентрациюфотоэлектроколориметраспермиев ФЭК-М Матер иалы и оборудование: фотоэлектроколориметр ФЭК М; 3.5%-ный раствор лимоннокислого натрия; воронка с бу мажным фильтром; пенициллиновые флаконы; пипетка измерительная, градуированная на 10 мл; MukponunerKa; сперма быка. основанХод наработы.том, что черезПринципкюветуработы(сосуд)этогосо прибораспермой пропускают пучок световых лучей определенной силы, который затем попадает на селеновый фотоэлемент, соединенный с гальванометром. Через гальванометр проходит электрический ток, величина которого обратно пропорциональна мутности спермы, т. е. концентрации спермиев. Для проведения исследования приготовляют 3,5% -ный раствор лимоннокислого натрия на дистиллированной воде, фильтруют его через бумажный фильтр и разливаютв хорошо вымытые и просушенные флаконы из-под пенициллина по 9,9 мл в каждый флакон.
150
Микропипеткой5 набирают точно 0,1 мл исследуемой= спермы и смешивают с раствором лимоннокислого натрия в es из флаконов, разбавляя таким образом ау Te Past) итетку несколько зразипромывают раствором из этого флакона, чтобы в ней не остались спермии. Разбавленную сперму вливают в кювету фотоэлект; роколориметра с рабочей длиной 10 мм, перемешивают ть 4 ee = . в неи сперму еще раз стеклянной палочкой и ставят в правое гнездо прибора на расстоянии, наиболее удаленном от фотоэлемента. В левое гнездо прибора ставят такую же кювету, наполненную раствором лимоннокислого натрия без добавки спермы. Затем шкалу отсчета оптической плотности левого барабана устанавливают на нуль и, вращая фотометрические клинья, переводят па нуль стрелку гальванометра вначале грубой настройкой (рис. 43) (регулятором № 1), а затем точной настройкой (регулятором № 2). После этого вынимают кювету со спермой из правого гнезда и ставят вместо нее кювету с раствором лимоннокислого натрия. Стрелка гальванометра при этом отклоняется, и ее ставят на нуль, поворачивая левый барабан.
15]
На красной шкале этого барабана читают показатель оптической мутности. Каждые 0,05 деления шкалы соответствуют концентрации спермиев, определяемой по rpaдуировочной кривой, которую выводят ежемесячно, обязательно отдельно для каждого прибора. Задание 9. Определить концентрацию‘ спермиев в сперме жеребца по стандартам. т
р
Материалы и оборудование: свежеполученная сперма жеребца; стандарты спермы жеребца; стеклянная палочка; марлевые ты для определения концентрации спермы жеребца представляют собой одинакового диаметра запаянные пробнркн с жидкостью, имитирующей неразбавленную сперму в концентрации 10, 50, 100, 200, 300 и 500 млн. спермиев в [| мл.
Ход работы. Сперму наливают в чистую пустую пробирку точно такого диаметра, как и стандарты, и сравнивают с ними. Предварительно стандартные пробирки хорошо встряхивают, чтобы осевшие частицы равномерно распределились. Пробирки просматривают на свет, подбирая стандарт, наиболее близкий к определяемой сперме, который и принимают за ее концентрацию. Концентрация спермы может быть определена и как промежуточная между двумя стандартами, например 75 млн. (среднее между 50 и 100 млн.). При концентрации спермиев более 500 млн. в 1 мл исследуемую сперму можно разбавить глюкозным разбавителем в два раза (1:1), затем установить концентрацию по стандартам, а результат определения удвоить, Задание 10. Определить переживаемость спермиев. Показатель подвижности (активность движения) спермиев очень важен в первоначальной оценке полученной спермы. Сперма, в которой отсутствуют спермии с активным прямолинейно поступательным движением, непригодна для оплодотворения. Тем не менее хорошая подвижность спермиев в только что полученной сперме еще не дает достаточного основания для окончательной оценки оплодотворяющей способности, так как движение спермиев может быстро прекратиться. Продолжительность жизпи спермиев вие организма является важным косвенным показателем в оценке оплодотворяющей способности спермы производителя. Чем дольше спермии в пробирке сохраняют способность двигаться, тем больше вероятность оплодотворения матки такой спермой. Переживаемость спермиев характеризу-
152
