что разбавление не снизило качество спёрмы, каплю ее просматривают под микроскопом. Если оценка по подвижности спермиев резко снизилась, то сперму бракуют и разбавитель готовят снова. Иногда антибиотики бывают токсичны для спермиев, поэтому в случае гибели последних при разбавлении спермы готовят разбавитель без антибиотиков, чтобы установить их качество. Задание 4. Подготовить, сперму быка для хранения ее при температуре 15,+ 18°. Материалы и оборудование: сперма быка, разбавитель ТВТ-12, колбы, мензурки, ампулы стеклянные емкостью 1— 2 мл, SUDAN "стеклянный емкостью 20 fer с иглой, бюретки, ra нк о вн ы епенициллиновыекольца. с резиновыми пробками, газовая горелка, ре: Ход работы. Сперму быка разбавляют в зависимости от концентрации спермиев так, чтобы в | мл разбавленной спермы было 25 млн. активных спермиев. Затем сперму расфасовывают в стерильные стеклянные или пластмассовые одноразовые ампулы, проROEM) (OSE! ONE COH LOOT, Расфасовку производят специальным автоматом, стеклянныйа при отсутствиишприцегоемкостью— вручную.20 млПрис иглойэтомилииспользуютбюретку, к которой при помощи отрезка резиновой трубки присоединена игла. При отсутствии ампул сперму разливают во флаконы из-под пенициллина или инсулина, которые заполняют доверху и плотно закрывают резиновыми пробками с резиновыми кольцами.
Ампулы после расфасовки быстро запаивают на пламени газовой горелки с воздушным дутьем. В запаянных ампулах и плотно закрытых флаконах сперму упаковывают для хранения и транспортировки. Для устранения резких колебаний температуры лучше всего ампулы или флаконы со спермой хранить или транспортировать в картонных коробках, наполненных термоизолирующим материалом (пробковой крошкой, ватой, опилками ит. д.). В жаркие месяцы сперму рекомендуют хранить в подвальном помещении или погребе. При транспортировке в жаркое время флаконы или ампулы со спермой CUEURYEW SIRSG MBE 1} (MYDS) (бачки) с холодной водой (в воду можно положить кусочки льда). Чтобы не допустить попадания воды во флаконы, надо предвари-
7*
179
тельно поместить их в резиновые или пластмассовые мешочки. Пробки флаконов должны быть дважды перетянуты резиновыми кольцами (нарезать из камеры К искусственным вагинам).
Задание 5. Подготовить сперму хряка для хранения ее при комнатной температуре.
ое tb ОбоиЗоБаИОР отеАИН ИНЬ ОЕ. новый разбавитель СГХЦС или ГЦХЖ-У, колбы, градунрованные бутылочки и пробки к ним или полиэтиленовые флаконы.
Ход работы. Cnepmy хряка разбавляют в 2— 6 раз, в зависимости от концентрации спермиев, быстро разливают в градуированные 100—250-миллилитровые бутылочки или флаконы, которые ВИКО пробками и хранят при температуре 16—20° в темном месте или в специальных термосах. Задание 6. /Годгеотовить сперму быка для хранения ее при 0, +4.
Материалы и оборудование: сперма ‘быка, разбавители, мензурки, баночки, флаконы из-под пенициллина, пробирки, поаоО ое ки, Оие лед ЛИре ИК,обе eastр
Ход работы. Сперму разбавляют глюкозо-цитратно-желточным или молочным разбавителем и проверяют под микроскопом подвижность слермиев в разбавленной сперме.
Разбавленную сперму, если под микроскопом установлена ее приголность, разливают во флаконы или пробирки (предварительно простерилизованные сухим жаром при 160—180°), или в полиэтиленовые ампулы. Разливают сперму при помощи градуированной пипетки, бюретки или специального дозатора. Флаконы закрывают простерилизованными пробками. На флаконы или пробирки со спермой надевают резиновые кольца, которые удерживают пробку и предупреждают вытекание спермы.
Спустя 20—30 минут после разбавления флаконы и пробирки со спермой обвертывают тонким слоем ваты, складывают в полиэтиленовый мешочек, который плотно завязывают или запаивают. Мешочек с флаконами, пробирками или ампулами помещают в холодильник или в термос со льдом так, чтобы температура во время хранения (перевозки) была 0, +4°, но не ниже 0°.
180
Задание 7. Освоить технику замораживания спермы быка.
Ход работы. При проведении занятий используют соответствующие разбавители и оборудование, указанные в разделе по замораживанию спермы быка. Занятия проводят на оборудованной криогенной техникой станции искусственного осеменения животных или в специально оборудованной лаборатории или аудитории. Задание 8. Оттаять и проверить пригодность замороженной спермы производителей (быка, жеребца) для осеменения. . о Е И omate быка НИЕ mie ЕЕ чашки и Е пипетки, предметные и покровные стекла, микроскопы с термостатами или обогревательным столиком, 2,8—3%-ный раствор лимоннокислого натрия (дистиллированная вода—100мл,натрий лимонпокислый— 2,9защитныег, лимоннаяочки икислотадр. — 0,1 г), термометры химические, перчатки,
Ход работы. Из термоса или контейнера, где ниемхранитсямер замороженнаяпредосторожностисперма,(перчатки,вынимаютзащитныес соблюдеочки) необходимое количество гранул, ампул или капилляров со спермой. Гранулы объемом 0,5 мл спермы быка пинцетом переносят в стерильный флакон из-под пенициллина и, так же как капилляры в полиэтиленовом пакете, ампулы со спермой быка или алюминиевые пакеты со спермой жеребца погружают на 1—2 минуты в емкости с теплой водой (38—40°). Затем из пенициллинового флакона стерильной стеклянной палочкой или пипеткой берут (предварительно флакон с оттаянной спермой осторожно покачивают и слегка вращают) каплю спермы, которую наносят на предметное стекло, и к ней добавляют каплю раствора лимоннокислого натрия. Капли смешивают, накрывают покровным стеклом и исследуют подвижность спермиев под микроскопом при 42°. Если сперма была заморожена в гранулах объемом 0,1—0,2 мл, то берут одну гранулу и опускают ее во флакон с 1 мл 2,9—3,0%-ного раствора лимоннокислого натрия.
Из капилляра (пайетта) после извлечения его из полиэтиленового пакета берут вторую или третью по счету каплю и накапывают ее на предметное стекло. Каплю
181
