тельно поместить их в резиновые или пластмассовые мешочки. Пробки флаконов должны быть дважды перетянуты резиновыми кольцами (нарезать из камеры К искусственным вагинам).
Задание 5. Подготовить сперму хряка для хранения ее при комнатной температуре.
ое tb ОбоиЗоБаИОР отеАИН ИНЬ ОЕ. новый разбавитель СГХЦС или ГЦХЖ-У, колбы, градунрованные бутылочки и пробки к ним или полиэтиленовые флаконы.
Ход работы. Cnepmy хряка разбавляют в 2— 6 раз, в зависимости от концентрации спермиев, быстро разливают в градуированные 100—250-миллилитровые бутылочки или флаконы, которые ВИКО пробками и хранят при температуре 16—20° в темном месте или в специальных термосах. Задание 6. /Годгеотовить сперму быка для хранения ее при 0, +4.
Материалы и оборудование: сперма ‘быка, разбавители, мензурки, баночки, флаконы из-под пенициллина, пробирки, поаоО ое ки, Оие лед ЛИре ИК,обе eastр
Ход работы. Сперму разбавляют глюкозо-цитратно-желточным или молочным разбавителем и проверяют под микроскопом подвижность слермиев в разбавленной сперме.
Разбавленную сперму, если под микроскопом установлена ее приголность, разливают во флаконы или пробирки (предварительно простерилизованные сухим жаром при 160—180°), или в полиэтиленовые ампулы. Разливают сперму при помощи градуированной пипетки, бюретки или специального дозатора. Флаконы закрывают простерилизованными пробками. На флаконы или пробирки со спермой надевают резиновые кольца, которые удерживают пробку и предупреждают вытекание спермы.
Спустя 20—30 минут после разбавления флаконы и пробирки со спермой обвертывают тонким слоем ваты, складывают в полиэтиленовый мешочек, который плотно завязывают или запаивают. Мешочек с флаконами, пробирками или ампулами помещают в холодильник или в термос со льдом так, чтобы температура во время хранения (перевозки) была 0, +4°, но не ниже 0°.
180
Задание 7. Освоить технику замораживания спермы быка.
Ход работы. При проведении занятий используют соответствующие разбавители и оборудование, указанные в разделе по замораживанию спермы быка. Занятия проводят на оборудованной криогенной техникой станции искусственного осеменения животных или в специально оборудованной лаборатории или аудитории. Задание 8. Оттаять и проверить пригодность замороженной спермы производителей (быка, жеребца) для осеменения. . о Е И omate быка НИЕ mie ЕЕ чашки и Е пипетки, предметные и покровные стекла, микроскопы с термостатами или обогревательным столиком, 2,8—3%-ный раствор лимоннокислого натрия (дистиллированная вода—100мл,натрий лимонпокислый— 2,9защитныег, лимоннаяочки икислотадр. — 0,1 г), термометры химические, перчатки,
Ход работы. Из термоса или контейнера, где ниемхранитсямер замороженнаяпредосторожностисперма,(перчатки,вынимаютзащитныес соблюдеочки) необходимое количество гранул, ампул или капилляров со спермой. Гранулы объемом 0,5 мл спермы быка пинцетом переносят в стерильный флакон из-под пенициллина и, так же как капилляры в полиэтиленовом пакете, ампулы со спермой быка или алюминиевые пакеты со спермой жеребца погружают на 1—2 минуты в емкости с теплой водой (38—40°). Затем из пенициллинового флакона стерильной стеклянной палочкой или пипеткой берут (предварительно флакон с оттаянной спермой осторожно покачивают и слегка вращают) каплю спермы, которую наносят на предметное стекло, и к ней добавляют каплю раствора лимоннокислого натрия. Капли смешивают, накрывают покровным стеклом и исследуют подвижность спермиев под микроскопом при 42°. Если сперма была заморожена в гранулах объемом 0,1—0,2 мл, то берут одну гранулу и опускают ее во флакон с 1 мл 2,9—3,0%-ного раствора лимоннокислого натрия.
Из капилляра (пайетта) после извлечения его из полиэтиленового пакета берут вторую или третью по счету каплю и накапывают ее на предметное стекло. Каплю
181
спермы из ампулы или из алюминиевого пакета берут стерильной палочкой, пипеткой, или непосредственно из ныйпакета,спирт),который,открываютпротерев(обрезаютспиртовымкрай) емстерильными(96% - ae Далее а Но omep miei как указано выше. Следует учитывать, что наибольшую подвижность после оттаивания спермии проявляют не сразу, а обычно через несколько минут. Оттаянную сперму используют для осеменения, если в ней не менее 40% спермиев двигаются поступательно-прямолинейно (4 балла). Оттаянную сперму повторно замораживать нельзя. Для более полной оценки выживаемости спермиев в оттаянной сперме ее остаток можно сохранять при температуре 0° в течение трех суток и ежедневно проверять подвижность спермиев (к этому сроку хорошая сперма должна иметь оценку не менее2 баллов, т.е.20% спермиевРезультатыдолжноисследованиядвигаться поступательно).переживаемости оттаянной спермы заносят в журнал по следующей форме:
о и ыы , Е Подвижность repays при о Киички enepnires nowte оттаивания xp ) (6a, и Да(баллы или %) {nec Гвgl | 2 Контрольные вопросы. 1. Зачем разбавляют сперму производиОлейтелей?к 2. одаю, НЕк рA ОВРQ № npousncgiirenel?n реа.Hot)6.3: Xoneаcnep-2. . мы при температуре 5, 20° (разбавители, сроки пригодности спермы). 7. Хранение спермы в условиях температуры 0, +4. 8. Хранение спермы при температуре —196° (замораживание, оттаивание и оценка спермы). 9. Транспортировка спермы (расфасовка, упаковка, термосы, сосуды, условия). 10. Санитарно-гигиенические правила при разбазлении и перевозке спермы. 11. Меры охраны труда при замораживании спермы.
