Профилактика и лечение послеродовых эндометритов и маститов у коров

ГЛАВА 2.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

При микробиологическом исследовании использованы общепринятые методы. Родовая и видовая идентификация выделенных микроорганизмов проводилась по «Определителю бактерий Берджи» (1997). При микологических исследованиях грибов, выделенных из влагалищно-цервикальной слизи, использованы «Методы исследования в ветеринарной микологии» [120].

Исследования по изучению уровня и структуры заболеваний молочной железы коров выполнены в базовых хозяйствах на основании документов учета, клинического исследования коров и лабораторного исследования секрета молочной железы с помощью быстрых диагностических тестов – пробы с 2 %-ным раствором мастидина.

Для определения МАФАнМ (общей бактериальной обсемененности) использован мясопептонный агар (МПА). Для выделения и количественного учета бактерий взяты следующие среды: MRS – для лактобактерий; ГМС – для учета бифидобактерий; среда с азидом натрия – для энтерококков; среда для псевдомоносов; скошенный МПА – для выделения протея по Щукевичу; среда Эндо – для выделения и дифференциации энтеробактерий; среда Чапека – для выделения микроскопических грибов; МПА (после прогрева до 80ºС в течение 15 минут) – для спорообразующих аэробных бактерий; среда с бромтимоловым синим – для выделения иерсиний; магниевая среда – для накопления патогенных энтеробактерий; питательная среда – для выделения стрептококков; элективный солевой агар – для выделения стафилококков. Подсчет выросших колоний проводился в счетчике колоний. Учет результатов посева проведен через 18-24 часа для бактерий, а для грибов – до 5 дней.

При гематологических исследованиях уровень общего белка определялся рефрактометрическим методом, общее количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитано в камере Горяева пробирочным методом, содержание гемоглобина определено гемометром Сали. Рассчитана лизоцимная активность сыворотки крови по отношению к Micrococcus Lysodeicticus , бактерицидная активность по отношению к Escherichia coli – по методике, разработанной М.П. Неустроевым, В.И. Малышевой [167].

В опытах использован пробиотический препарат «Сахабактисубтил», изготовленный на основе штаммов бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» и Bac. subtilis «ТНП-5» согласно ТУ 9384–003–00670203–06.

Культуральная жидкость из штамма бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» состоит из метаболитов штамма бактерий Вас. subtilis без бактериальных клеток. Штамм культивировали в мясопептонном бульоне при температуре 37ºС в течение 5 суток, центрифугировали при 7000 об/мин на протяжении 15 мин, после чего провели фильтрацию.

Родовую и видовую идентификацию выделенных микроорганизмов проводили согласно «Справочнику по микробиологическим и вирусологическим методам исследований» (1982), «Определителю зоопатогенных микроорганизмов» (1995), а также по «Определителю бактерий Берджи» (1997) и справочнику «Микробиологический контроль мяса животных, птицы, яиц и продуктов их переработки» (2002).

Исследования молока проведены на анализаторе КЛЕВЕР. Биохимические исследования проведены на инфракрасном анализаторе ИКА NIR SCANNER model 4250. Пробы к биохимическому анализу готовили согласно общепринятым методикам.

Математическую обработку полученных данных осуществляли с использованием прикладной программы Snedecor, Microsoft Excel, а также статистической обработки по методу Стьюдента.

Наиболее подробные методы исследований приведены в соответствующих главах.

ИЗУЧЕНИЕ ВЛАГАЛИЩНОГО МИКРОБИОЦЕНОЗА КОРОВ В УСЛОВИЯХ ЯКУТИИ

3.1. Микрофлора влагалищно-цервикальной слизи коров

с нормальным течением отела

В большинстве случаев из смывов одной коровы с нормальным течением послеродового периода в первые дни отела изолировали 2-3 вида микроорганизмов. С завершением инволюции половых органов количество микрофлоры в смывах уменьшалось, в основном выделялись сапрофитные микроорганизмы (таблица 1).

В основном в количественном отношении преобладали спорообразующие аэробные бактерии рода Bacillus (до 3,3х10⁶ КОЕ в 1 мл слизи), заметно уступают им лактобактерии (до 2,2х10⁶ КОЕ), также энтерококки (до 2х10⁵ КОЕ). С первых дней после отела в небольшом количестве регистрируются бифидобактерии, непатогенные стафилококки (5,9х10⁵ КОЕ). Во влагалищной слизи коров на третий день после отела изолировали грибы рода Candida . Также следует указать, что с десятого дня во влагалищном секрете у 20-ти коров отмечалось присутствие плесневых грибов из рода Aspergillus fumigatus и протея, что указывает на проникновение их в гениталии из окружающей среды (воздух помещений, при раздаче корма, навоз).

Таблица 1.

Видовой состав вагинальной микрофлоры коров первые 3 дня

после нормального отела

Примечание: н.р. - нет роста микроорганизмов