Классификация видов грибов, обнаруженных в пробах влагалищно-цервикальной слизи коров
Классификационная схема Alexopoulos et al., 1996
Тип Zygomicota Порядок Mucorales Семейство Mucoraceae Род Mucor Вид Mucor racemosus Fresenius Mucor ramosissimus
R. microsporum var rhizopodiformus
Тип Ascomycota Порядок Eurotiales Семейство Trichocomaceae Aspergillus fumigatus Fresenius Aspergillus nidulans Aspergillus flavus Link Aspergillus niger van Tieghem Порядок Dothideales Семейство Pleosporacea Alternaria alternata Keissler
Классификационная схема G.C.Ainsworth (1971) Отдел Eumycota Подотдел Deuteromycotina Класс Blastomycetes Род Candida Вид Candida albicans
От коров с нормальным течением послеродового периода были выделены грибы из рода Aspergillus , Mucor , Candida , которые относятся к видам A. flavus , или Mucor racemocus, или Candida albicans . У коров с послеродовыми осложнениями встречается несколько видов грибов: M. racemosus , M. ramosissimus , Rhizopus microsporum var rhizopodiformus , A. fumigatus Fresenius , A. nidulans , A. flavus Link , A. niger . Полученные данные указывают на роль грибов как возбудителей вагинальных инфекций.
3.5. Идентификация бактерий рода Bacillus , выделенных из микрофлоры влагалища коров
В целях дальнейшего изучения микрофлоры воспроизводительных органов нами проведена идентификация спорообразующих аэробных бактерий, которые доминируют в количественном отношении в микробиоценозе половых органов коров в условиях Якутии. Получены чистые культуры спорообразующих аэробных бактерий, выделенных от влагалищно-цервикальной слизи коров в норме и с послеродовыми осложнениями. Всего выделено 19 штаммов. В основу схемы идентификационных признаков положены принципы, изложенные в работах R. Gordon (1973), автора систематики бактерий рода Bacillus.
Для определения свойств выделенных штаммов бактерий рода Bacillus использовали 5-суточные агаровые культуры. Подвижность наблюдали в препарате «висячая капля». Для изучения продукции каталазы применяли 10 %-ную перекись водорода. Продукцию лецитиназы установили на МПБ с яичным желтком. Образование оксидазы определяли с помощью индикаторных тестов. Гидролиз казеина изучали на молочном агаре, а гидролиз крахмала – на картофельном агаре. Для постановки реакции Фогес-Проскауера культуры выращивали на среде Кларка. Также проводили посев на среды с сахарами.
Результаты представлены в таблице 4. Все выделенные 19 штаммов бактерий рода Bacillus – палочковидные бактерии, аэробы, которые образуют споры, положительно окрашиваются по Граму. Как показывают данные исследований, все штаммы подвижны, продуцируют каталазу, при росте на МПА почти все выдерживают присутствие хлористого натрия до 7 %, не образуют лецитиназу и несколько отличаются по гидролизу крахмала, разложению казеина, образованию оксидазы и ацетилметилкарбинола и по разложению ряда сахаров. На основании результатов изучения физиолого-биохимических свойств распределены по видам.
Известно, что виды бактерий рода Bacillus распределены в три морфологические группы. От коров с нормальным течением родового и послеродового периода выделены: Bac. megaterium , Bac. pumilis , Bac. coagulans , Bac. firmus , Bac. laterosporus , Bac. brevis , Bac. alvei . Из них 52,6 % относятся к I группе, и 42,1 % к II группе. От коров с послеродовыми осложнениями выделены: Bac. coagulans , Bac. pumilis , Bac. laterosporus , Bac. alvei , Bac. stearothermophilus . Из них 71,4 % относится к II группе, 14,2 % – к I группе.
Обобщение полученных данных показывает, что от здоровых коров выделены бактерии рода Bacillus (в количественном отношении), в основном относящиеся к I группе (52,6 %), а от больных – к II группе (71,4 %).
Следует отметить, что идентификация спорообразующих аэробных бактерий в микрофлоре половых путей здоровых и больных эндометритами коров в условиях Якутии не показывает существенной разницы в видовом составе бактерий рода Bacillus .
3.6. Антибиотикоустойчивость бактерий рода Bacillus , выделенных из влагалищно-цервикальной слизи коров
В опытах по изучению антибиотикоустойчивости испытали чувствительность 19 штаммов бактерий рода Bacillus , выделенных из влагалищно-цервикальной слизи коров, к разным видам антибиотиков, относящихся к группе: полипептиды (полимиксин), аминогликозиды (канамицин, неомицин), цефалоспорины (цефоперазон, цефуроксин), нитрофураны (фурадонин), тетрациклины (тетрациклин).
Для этого выделенные штаммы бактерий рода Bacillus выращивали на мясопептонном бульоне в течение 5 суток при 37ºС. После фильтрации и смешивания в равных количествах с агаром разливали стерильно в чашки Петри. На застывший агар накладывали диски из антибиотиков, затем помещали в термостат при 37ºС и через 24 часа учитывали результат. Данные отражены в таблице 5. Результаты антибиотикоустойчивости штаммов судили по зоне ингибиции роста вокруг дисков с антибиотиками. Зона ингибиции роста бактерий свыше 10 мм определяет чувствительность к антибиотику, зона меньше 10 мм показывает нечувствительность. Штаммы спорообразующих аэробных бактерий, выделенных из микрофлоры влагалища коров с нормальным отелом и послеродового периода, в основном на 72,7 %-100 % антибиотикоустойчивы, наиболее чувствительны только к ципрофлоксацину и неомицину. Штаммы, выделенные от коров с послеродовыми осложнениями, более чувствительны к воздействию антибиотиков из группы амино¬гликозидов и цефалоспоринов.
Спорообразующие аэробные бактерии рода Bacullus, выделенные из микрофлоры влагалища больных коров, чувствительны к неомицину, ципрофлоксацину, также избирательно – к канамицину и цефоперазону. Обладают устойчивостью к цефуроксину, а также полимиксину, что является их родовой особенностью.
