Таблица 11.(окончание)
| 5. | Лактозонегат. эшерихии | 7,31±0,36 | 10,96±1,05 |
|---|---|---|---|
| 6. | Энтерококки | 0,35±0,024 | 0,42±0,03 |
| 7. | Протеи | + | + |
| 8. | Стафилококки | 0,17±0,025 | 0,38±0,03 |
| 9. | Грибы | Mucor, Candida sp., A. niger | Mucor racemosus, A. niger, A.fumigatus, Candida sp., A. flavus |
Результаты производственных испытаний показывают, что применение культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» коровам до отела предотвращает послеродовые осложнения у 95,7 % обработанных животных. В контрольной группе послеродовые осложнения отмечены у 13,6 % коров.
При исследовании вагинального микробиоценоза после отела у коров опытной группы выявлено преобладание представителей нормальной микрофлоры: лактобактерий (53,03±0,51 тыс. КОЕ в 1 мл слизи) – в 3,87 раза, бифидобактерий – на 3 порядка, спорообразующих бактерий (1,40±0,07 тыс. КОЕ) – в 1,52 раза. В то же время установлено снижение содержания потенциальных патогенов: лактозонегативных (7,31±0,36 тыс. КОЕ) – в 1,49 раза, энтерококков (0,35±0,024 тыс. КОЕ) – в 1,2 раза, стафилококков (0,17±0,025 тыс. КОЕ) – в 2 раза ниже, чем в контрольной группе. Также у коров опытной группы по сравнению с контрольной группой количество видов токсигенных грибов заметно меньше. Наличие псевдомоносов не установлено.
Таким образом, применение культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» стельным коровам способствует нормализации вагинальной микрофлоры, повышая содержание лактои бифидобактерий, спорообразующих аэробных бактерий, снижая количество энтеробактерий, стафилококков, энтерококков и патогенных грибов, помогает устранению дисбактериоза кишечника. В фекалиях опытной группы отмечено повышение содержания лактобактерий, спорообразующих бактерий, снижение количества и вида грибов, эшерихий по сравнению с контролем (таблица 12).
Результаты гематологических исследований (таблица 13) показали, что в крови опытной группы животных отмечено достоверное повышение содержания гемоглобина, α-глобулинов, а также уровня бактерицидной активности в 1,4 раза, лизоцимной активности – в 1,5 раза по сравнению с результатами контрольной группы.
Из полученных результатов производственных испытаний следует, что подкожное введение культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» коровам до отела способствует нормализации как вагинальной, так и кишечной микрофлоры, а также повышает иммунобиологическую реактивность организма коров.
Таблица 12.
Кишечный микробиоценоз коров после применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3»
| п/п | Выделенные микроорганизмы | опытная группа (M±m) | контрольная группа (M±m) |
|---|---|---|---|
| кол-во микроорганизмов (КОЕ в 1 мл слизи) (M±m) | |||
| 1. | Лактобактерии | 833,3±1,3 | 0 |
| 2. | Бифидобактерии | + | ± |
| 3. | Спорообразующие аэробные бактерии | 2913,5±65,32 | 1026,66±49,24 |
| 4. | Эшерихии | 81,33±2,48 | 147,93±1,12 |
| 5. | Энтерококки | 47,5±2,47 | 118,57±1,00 |
| 6. | Протеи | + | + |
| 7. | Стафилококки | 0 | 110,1±6,80 |
| 8. | Грибы | Mucor, A. niger | Mucor sp., A. niger, A.fumigatus, Candida sp., A. flavus |
Таблица 13.
Иммунобиологические показатели крови коров после применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3»
| Показатели крови | Опытная группа (M±m) | Контрольная группа (M±m) | |
|---|---|---|---|
| Лейкоциты, (тыс./мкл) | 6,06±0,55 | 5,02±0,69 | |
| Эритроциты, (млн/мкл) | 5,9±0,24 | 5,65±0,61 | |
| Гемоглобин, г% | 11,2±0,29** | 10,12±0,22 | |
| Общий белок, г% | 7,90±0,31 | 7,53±0,38 | |
| Альбумины | 3,10±0,08 | 3,38±0,15 | |
| Глобулины | Альфа | 1,57±0,12* | 0,63±0,28 |
| Бета | 1,18±0,15 | 1,47±0,20 | |
| Гамма | 2,04±0,14 | 2,00±0,13 | |
| Бактериц. активность сыв. крови, % | 30,7±6,3 | 21,28±4,5 | |
| Лизоцимная активность, % | 14,8±2,45 | 9,4±4,2 | |
Примечание: **P<0,01; *P<0,001
Проведенные производственные испытания подтвердили эффективность применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых патологий коров.
По результатам опытов по испытанию культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых осложнений у коров составлена заявка и получен патент РФ на изобретение «Способ профилактики послеродовых осложнений коров» (№ 2319493, 2006 г.) [158].
4.4. Способ инфракрасной сушки пробиотика «Сахабактисубтил» на сорбентах
Распространенными формами пробиотических препаратов являются жидкие и лиофилизированные. Лиофилизированные препараты по сохранности действующего вещества более приоритетны по сравнению с жидкими. Но для их получения необходимо дорогостоящее оборудование – лиофилизатор.
В последние годы для обезвоживания высоковлажных материалов с целью сохранения биологически активных веществ (витаминов, ферментов, гормонов и т. п.) с успехом применяется инфракрасное излучение (ИК-и).
Исходя из того, что в практике северного скотоводства довольно трудоемко пероральное применение жидких препаратов взрослым животным, одной из задач наших исследований являлась апробация инфракрасной сушки (ИК-с) для обезвоживания пробиотика «Сахабактисубтил», адсорбированного на носителях, с одновременным сохранением исходного количества микробных клеток.
В опытах использован пробиотический препарат «Сахабактисубтил». Препарат изготовлен на основе штаммов бактерий Вас. subtilis «ТНП-3» и Вас. subtilis «ТНП-5», выделенных из мерзлотных почв Якутии (ТУ 9384–003–00670203–06). Инструкция по применению для профилактики и лечения дисбактериозов новорожденных телят и поросят утверждена Россельхознадзором (14.11.2006 г). Штаммы обладают комплексом ферментативных активностей: протеолитической, желатиназной, амилазной, целлюлолитической, В-глюконазной и выраженной ксилоназной и фруктозилтрансферазной. Также у штаммов отмечена интерферониндуцирующая активность. Препарат применяют для профилактики и лечения дисбактериозов и повышения иммунобиологического статуса сельскохозяйственных животных [153].
В опытах использовали ИК-с марки МИК-2. В качестве сорбентовносителей пробиотика «Сахабактисубтил» испытали: стерильный цеолит (фракции мука), высушенный сапропель, комбикорм. На первых же
