Следует особо отметить устойчивость спорообразующих бактерий, выделенных из половых путей коров, к тетрациклину и фурадонину, которые наиболее часто применяются при акушерско-гинекологических заболеваниях в скотоводческих хозяйствах Якутии. Таким образом, полученные результаты исследований необходимо учитывать при лечении послеродовых осложнений коров.
3.7. Антагонистические свойства бактерий рода Bacillus , выделенных из микрофлоры влагалища коров
Нами изучена антагонистическая активность спорообразующих аэробных бактерий Bac. megaterium , Bac. pumilis , Bac. brevis , выделенных из вагинальной микрофлоры от здоровых коров, по отношению к токсигенным грибам рода Aspergillus , которые часто регистрируются в вагинальной микрофлоре коров с послеродовыми осложнениями.
При изучении антагонистической активности использован метод диффузии в агар. Спорообразующие бактерии выращиваются на МПБ (в течение 5-7 дней). После фильтрации культуральная жидкость смешивается в равных количествах с мясопептонным агаром (2 %) и разливается в чашки Петри.
В качестве тест-культур использованы плесневые грибы рода Aspergillus : A. niger , A. flavus , A. fumigatus, выделенные из вагинальной микрофлоры коров. Микологической иглой (загнутым углом) осторожно берется кусочек мицелия и кладется на середину поверхности приготовленной среды в чашках Петри. Посевы помещаются в термостат завернутыми в стерильную бумагу, где культивируются при температуре 25ºС. Учитывается результат, полученный в течение 15 дней. Периодически ведется наблюдение за ростом тест-культур.
Кроме этого, для сравнения антагонистической активности в опытах использованы паспортизированные штаммы бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» и Bac. subtilis «ТНП-5». Показания опытов учитываются при наличии нормального роста тест-культур в контроле.
Результаты изучения антагонистических свойств бактерий рода Bacillus к токсигенным грибам представлены в таблице 6.
Из результатов опыта видно, что Bac. megaterium , Bac. pumilis , Bac. brevis , выделенные из вагинальной микрофлоры, обладают слабыми антагонистическими свойствами по отношению к токсигенным грибам A. niger , A. flavus , A. fumigatus , в сравнении c паспортизированными штаммами бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» и Bac. subtilis «ТНП-5».
На основании проведенных исследований приходим к выводу, что в дальнейшем при разработке мер профилактики и лечения послеродовых осложнений целесообразнее применение штаммов бактерий Bac.subtilis «ТНП-3» и Bac.subtilis «ТНП-5» как наиболее эффективных по отношению к токсигенным грибам, присутствующим постоянно в вагинальной микрофлоре коров с эндометритами.
Таблица 6.
Антагонистическая активность аэробных спорообразующих бактерий, выделенных из вагинальной микрофлоры
| Дни наблюдений | Штаммы бактерий рода Bacillus | Тест-культуры | ||
|---|---|---|---|---|
| Asp.fumigatus | Asp.flavus | Asp.niger | ||
| На 3-й день | Bac. brevis | – | – | – |
| Bac. pumilis | – | – | – | |
| Bac. megaterium | ° | ° | ° | |
| Bac. subtilis «ТНП-3» | – | – | – | |
| Bac. subtilis «ТНП-5» | – | – | – | |
| Контроль | ± | ± | ± | |
| На 5-й день | Bac. brevis | ° | ° | ° |
| Bac. pumilis | ° | ° | ° | |
| Bac. megaterium | ± | – | ± | |
| Bac. subtilis «ТНП-3» | – | – | – | |
| Bac. subtilis «ТНП-5» | – | – | – | |
| Контроль | ^ | ^ | ^ | |
| На 10-й день | Bac. brevis | ± | ± | ± |
| Bac. pumilis | ± | ± | ± | |
| Bac. megaterium | + | ° | + | |
| Bac. subtilis «ТНП-3» | – | – | – | |
| Bac. subtilis «ТНП-5» | – | – | – | |
| Контроль | ^ | ^ | ^ | |
| На 15-й день | Bac. brevis | + | + | + |
| Bac. pumilis | + | + | + | |
| Bac. megaterium | ^ | ± | – | |
| Bac. subtilis «ТНП-3» | ° | – | – | |
| Bac. subtilis «ТНП-5» | – | – | – | |
| контроль | ^ | ^ | ^ | |
Примечание: – начало роста; ± – размер колонии 3-4 мм; ^ – разрастание колонии; + – размер колонии 7 мл; – отсутствие роста.
РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ ПРОФИЛАКТИКИ ЭНДОМЕТРИТОВ У КОРОВ
4.1. Использование пробиотических препаратов из местных штаммов бактерий Bacillus subtilis для профилактики и лечения эндометритов коров
Штаммы Bacillus subtilis ТНП-3 и Bacillus subtilis ТНП-5 паспортизированы в ВГНКИ ветеринарных препаратов и депонированы во Всероссийской коллекции микроорганизмов, используемых в животноводстве и ветеринарии (2001). Пробиотик Сахабактисубтил, на основе этих штаммов бактерий, характеризуется широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условнопатогенных микроорганизмов, а также некоторых токсигенных грибов. Кроме того, штаммы и их сочетание обладают комплексом ферментативных активностей: протеолотической, желатиназной, амилазной, целлюлолитической, B-глюконазной и выраженной ксилоназной и фруктозилтрансферазной. Также штаммы обладают интерферониндуцирующей активностью. Препарат безвреден и ареактогенен [164].
Принцип действия пробиотиков заключается в следующем:
антагонистическая активность по отношению к патогенным и условно-патогенным микроорганизмам, продуцирование пищеварительных ферментов (амилаз, липаз, протеаз, пектиназ, эндоглюконаз);
-
продуцирование аминокислот;
-
антитоксическое, в т. ч. подавление микотоксинов;
-
иммуномодулирующее (активация макрофагов, стимулирование
-
выработки интерферона, синтез иммуноглобулинов);
-
восстанавливающее.
Применение пробиотических препаратов позволяет:
существенно повысить естественную резистентность организма, сохранить на высоком уровне иммунный статус и снизить риск возникновения заболеваний животных;
- получать продукцию без следов антибиотиков и гормонов.
