Из полученных результатов производственных испытаний следует, что подкожное введение культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» коровам до отела способствует нормализации как вагинальной, так и кишечной микрофлоры, а также повышает иммунобиологическую реактивность организма коров.
Таблица 12.
Кишечный микробиоценоз коров после применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3»
| п/п | Выделенные микроорганизмы | опытная группа (M±m) | контрольная группа (M±m) |
|---|---|---|---|
| кол-во микроорганизмов (КОЕ в 1 мл слизи) (M±m) | |||
| 1. | Лактобактерии | 833,3±1,3 | 0 |
| 2. | Бифидобактерии | + | ± |
| 3. | Спорообразующие аэробные бактерии | 2913,5±65,32 | 1026,66±49,24 |
| 4. | Эшерихии | 81,33±2,48 | 147,93±1,12 |
| 5. | Энтерококки | 47,5±2,47 | 118,57±1,00 |
| 6. | Протеи | + | + |
| 7. | Стафилококки | 0 | 110,1±6,80 |
| 8. | Грибы | Mucor, A. niger | Mucor sp., A. niger, A.fumigatus, Candida sp., A. flavus |
Таблица 13.
Иммунобиологические показатели крови коров после применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3»
| Показатели крови | Опытная группа (M±m) | Контрольная группа (M±m) | |
|---|---|---|---|
| Лейкоциты, (тыс./мкл) | 6,06±0,55 | 5,02±0,69 | |
| Эритроциты, (млн/мкл) | 5,9±0,24 | 5,65±0,61 | |
| Гемоглобин, г% | 11,2±0,29** | 10,12±0,22 | |
| Общий белок, г% | 7,90±0,31 | 7,53±0,38 | |
| Альбумины | 3,10±0,08 | 3,38±0,15 | |
| Глобулины | Альфа | 1,57±0,12* | 0,63±0,28 |
| Бета | 1,18±0,15 | 1,47±0,20 | |
| Гамма | 2,04±0,14 | 2,00±0,13 | |
| Бактериц. активность сыв. крови, % | 30,7±6,3 | 21,28±4,5 | |
| Лизоцимная активность, % | 14,8±2,45 | 9,4±4,2 | |
Примечание: **P<0,01; *P<0,001
Проведенные производственные испытания подтвердили эффективность применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых патологий коров.
По результатам опытов по испытанию культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых осложнений у коров составлена заявка и получен патент РФ на изобретение «Способ профилактики послеродовых осложнений коров» (№ 2319493, 2006 г.) [158].
4.4. Способ инфракрасной сушки пробиотика «Сахабактисубтил» на сорбентах
Распространенными формами пробиотических препаратов являются жидкие и лиофилизированные. Лиофилизированные препараты по сохранности действующего вещества более приоритетны по сравнению с жидкими. Но для их получения необходимо дорогостоящее оборудование – лиофилизатор.
В последние годы для обезвоживания высоковлажных материалов с целью сохранения биологически активных веществ (витаминов, ферментов, гормонов и т. п.) с успехом применяется инфракрасное излучение (ИК-и).
Исходя из того, что в практике северного скотоводства довольно трудоемко пероральное применение жидких препаратов взрослым животным, одной из задач наших исследований являлась апробация инфракрасной сушки (ИК-с) для обезвоживания пробиотика «Сахабактисубтил», адсорбированного на носителях, с одновременным сохранением исходного количества микробных клеток.
В опытах использован пробиотический препарат «Сахабактисубтил». Препарат изготовлен на основе штаммов бактерий Вас. subtilis «ТНП-3» и Вас. subtilis «ТНП-5», выделенных из мерзлотных почв Якутии (ТУ 9384–003–00670203–06). Инструкция по применению для профилактики и лечения дисбактериозов новорожденных телят и поросят утверждена Россельхознадзором (14.11.2006 г). Штаммы обладают комплексом ферментативных активностей: протеолитической, желатиназной, амилазной, целлюлолитической, В-глюконазной и выраженной ксилоназной и фруктозилтрансферазной. Также у штаммов отмечена интерферониндуцирующая активность. Препарат применяют для профилактики и лечения дисбактериозов и повышения иммунобиологического статуса сельскохозяйственных животных [153].
В опытах использовали ИК-с марки МИК-2. В качестве сорбентовносителей пробиотика «Сахабактисубтил» испытали: стерильный цеолит (фракции мука), высушенный сапропель, комбикорм. На первых же
этапах исследований был исключен в качестве сорбента сапропель как совершенно не обладающий адсорбирующими свойствами.
В ходе опыта установили, что 20 г цеолита адсорбирует 20 мл концентрированного препарата «Сахабактисубтил» (40 доз), а 20 г комбикорма адсорбирует 30 мл, или 60 доз препарата.
В результате опытов выяснено, что при ИК-с с температурой 90ºС и экспозиции 15 минут микробные клетки пробиотика в цеолите сохраняются только до 55,3 %, а в комбикорме – до 70,5 % от исходного содержания (таблица 14).
Таблица 14.
Сохранность микробных клеток пробиотика «Сахабактисубтил» в 1 г сорбента
| Вид сорбента-носителя | ИК-с при t=90º 15 | С экспозиция минут | % сохранности |
|---|---|---|---|
| Кол-во м.к | Кол-во м.к | м.к. | |
| до опыта | после опыта | ||
| Цеолит + пробиотик | 1300 млрд | 720 млрд | 55,3 % |
| Комбикорм + пробиотик | 1700 млрд | 1200 млрд | 70,5 % |
Следовательно, наиболее перспективным сорбентом-носителем является комбикорм.
В дальнейшем проведены опыты по разработке режимов ИК-с, обеспечивающих обезвоживание пробиотика на комбикорме с максимальным сохранением исходного содержания микробных клеток в пробиотике.
ИК-с применяли при температурах –45º, 60º, 65º, 75º, 80ºС при экспозициях 15, 30 минут (таблица 15).
Таблица 15.
Результаты инфракрасной сушки пробиотика «Сахабактисубтил»
| № п/п | Температуры ИК-с (вºС) | Результаты при экспозиции | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 15 мин. | 30 мин. | ||||
| консистенция | % сохр. м.к | консистенция | % сохр. м.к | ||
| 1. | 45 | влажная | – | влажная | – |
| 2. | 60 | влажная | – | влажная | – |
| 3. | 65 | влажная | – | влажная | – |
| 4. | 75 | чуть влажная | 99,4 % | сухая | 99,3 % |
| 5. | 80 | чуть влажная | 99,3 % | сухая | 98,5 % |
