Проведенные производственные испытания подтвердили эффективность применения культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых патологий коров.
По результатам опытов по испытанию культуральной жидкости штамма бактерий Bacillus subtilis «ТНП-3» для профилактики послеродовых осложнений у коров составлена заявка и получен патент РФ на изобретение «Способ профилактики послеродовых осложнений коров» (№ 2319493, 2006 г.) [158].
4.4. Способ инфракрасной сушки пробиотика «Сахабактисубтил» на сорбентах
Распространенными формами пробиотических препаратов являются жидкие и лиофилизированные. Лиофилизированные препараты по сохранности действующего вещества более приоритетны по сравнению с жидкими. Но для их получения необходимо дорогостоящее оборудование – лиофилизатор.
В последние годы для обезвоживания высоковлажных материалов с целью сохранения биологически активных веществ (витаминов, ферментов, гормонов и т. п.) с успехом применяется инфракрасное излучение (ИК-и).
Исходя из того, что в практике северного скотоводства довольно трудоемко пероральное применение жидких препаратов взрослым животным, одной из задач наших исследований являлась апробация инфракрасной сушки (ИК-с) для обезвоживания пробиотика «Сахабактисубтил», адсорбированного на носителях, с одновременным сохранением исходного количества микробных клеток.
В опытах использован пробиотический препарат «Сахабактисубтил». Препарат изготовлен на основе штаммов бактерий Вас. subtilis «ТНП-3» и Вас. subtilis «ТНП-5», выделенных из мерзлотных почв Якутии (ТУ 9384–003–00670203–06). Инструкция по применению для профилактики и лечения дисбактериозов новорожденных телят и поросят утверждена Россельхознадзором (14.11.2006 г). Штаммы обладают комплексом ферментативных активностей: протеолитической, желатиназной, амилазной, целлюлолитической, В-глюконазной и выраженной ксилоназной и фруктозилтрансферазной. Также у штаммов отмечена интерферониндуцирующая активность. Препарат применяют для профилактики и лечения дисбактериозов и повышения иммунобиологического статуса сельскохозяйственных животных [153].
В опытах использовали ИК-с марки МИК-2. В качестве сорбентовносителей пробиотика «Сахабактисубтил» испытали: стерильный цеолит (фракции мука), высушенный сапропель, комбикорм. На первых же
этапах исследований был исключен в качестве сорбента сапропель как совершенно не обладающий адсорбирующими свойствами.
В ходе опыта установили, что 20 г цеолита адсорбирует 20 мл концентрированного препарата «Сахабактисубтил» (40 доз), а 20 г комбикорма адсорбирует 30 мл, или 60 доз препарата.
В результате опытов выяснено, что при ИК-с с температурой 90ºС и экспозиции 15 минут микробные клетки пробиотика в цеолите сохраняются только до 55,3 %, а в комбикорме – до 70,5 % от исходного содержания (таблица 14).
Таблица 14.
Сохранность микробных клеток пробиотика «Сахабактисубтил» в 1 г сорбента
| Вид сорбента-носителя | ИК-с при t=90º 15 | С экспозиция минут | % сохранности |
|---|---|---|---|
| Кол-во м.к | Кол-во м.к | м.к. | |
| до опыта | после опыта | ||
| Цеолит + пробиотик | 1300 млрд | 720 млрд | 55,3 % |
| Комбикорм + пробиотик | 1700 млрд | 1200 млрд | 70,5 % |
Следовательно, наиболее перспективным сорбентом-носителем является комбикорм.
В дальнейшем проведены опыты по разработке режимов ИК-с, обеспечивающих обезвоживание пробиотика на комбикорме с максимальным сохранением исходного содержания микробных клеток в пробиотике.
ИК-с применяли при температурах –45º, 60º, 65º, 75º, 80ºС при экспозициях 15, 30 минут (таблица 15).
Таблица 15.
Результаты инфракрасной сушки пробиотика «Сахабактисубтил»
| № п/п | Температуры ИК-с (вºС) | Результаты при экспозиции | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 15 мин. | 30 мин. | ||||
| консистенция | % сохр. м.к | консистенция | % сохр. м.к | ||
| 1. | 45 | влажная | – | влажная | – |
| 2. | 60 | влажная | – | влажная | – |
| 3. | 65 | влажная | – | влажная | – |
| 4. | 75 | чуть влажная | 99,4 % | сухая | 99,3 % |
| 5. | 80 | чуть влажная | 99,3 % | сухая | 98,5 % |
Одновременное сочетание обезвоживания и сохранения содержания микробных клеток в пробиотике «Сахабактисубтил» на комбикорме достигнуто при ИК-с с температурой 75ºС и экспозиции 30 минут. Для бактерий рода Bacillus температура до 80ºС не является губительной, а, наоборот, оптимальной и используется при предпосевной обработке для дифференциации от других микроорганизмов.
Полученный в результате ИК-с пробиотик «Сахабактисубтил» на комбикорме в 1 г содержит 150 млрд м. к (или 3 дозы препарата). По результатам исследований получен патент РФ на изобретение «Способ получения сухой формы микробного препарата» (№ 2346032, 2009 г.) [157].
4.5. Применение пробиотика «Сахабактисубтил» после ИК-сушки стельным коровам
Опыт был проведен за 3-4 месяца до отела на 47 стельных коровах, принадлежащих ОПХ «Покровское», в период зимнего стойлового содержания – с декабря по март.
Пробиотик «Сахабактисубтил» для перорального применения стельным коровам использовали после ИК-сушки. Коровам опытной группы (25 гол.) индивидуально давали препарат (150 млрд м.к.) перорально с комбикормом по 5 г 1 раз в день в течение 10 дней каждого месяца. Применяли 3 месяца подряд до отела. Коровам контрольной группы (22 гол.) препарат не давали. За животными вели наблюдение. После опыта у отелившихся коров опытной и контрольной групп брали влагалищно-цервикальную слизь, кровь и кал. В опытной группе заболела эндометритом 1 гол. (4 %), в контрольной группе заболели 3 гол. (13,6 %). В опытной группе сервис-период составил 67,8 дня, а в контрольной группе – 76,2 дня. Продолжительность сервис-периода у коров в опытной группе сократился на 8,4 дня по сравнению с контрольной группой.
Следует отметить, что в предыдущие годы (2004-2006 гг.) заболеваемость эндометритом составляла 14-22,9 % (таблица 16).
Таблица 16.
Заболеваемость эндометритом коров в ОПХ «Покровское»
(2004-2006 гг.)
| Годы | 2004 | 2005 | 2006 |
|---|---|---|---|
| Количество коров (гол.) | 140 | 150 | 160 |
| Заболело эндометритом (гол.) | 32 | 21 | 23 |
| в % | 22,9 % | 14 % | 14,4 % |
