Предложены и другие диагностикумы для установления скрытого мастита только по увеличения количества соматических клеток в молоке (например мастоприм и др.), или по изменению рН молока (пробы с бромтимолблау, бромкрезолблау, бромкрезолпурпуром, фенолротом, розоловой кислотой и др.).
Проба отстаивания. Ее проводят путем отбора молока из четвертей вымени, которые реагировали положительно на реактивы из поверхностно-активных веществ, указанных выше. Осуществляют пробу так. В конце доения берут в пробирку 10 мл молока (секрета) и ставят на 16–18 ч в холодильник или другое холодное место, чтобы избежать прокисания молока. На второй день пробу просматривают и учитывают результат (лучше при дневном свете), обращая внимание на наличие осадка, количество и характер сливок на поверхности и цвет молока. Молоко здоровых коров белого цвета или со слегка синеватым оттенком, не образует осадка, вверху – слой желтоватых сливок. От больных маститом коров молоко водянистое, сливки тягучие, слизистые, хлопьевидные; основной диагностический признак – наличие осадка.
Определение электропроводности молока. Электропроводность молока обусловлена в основном концентрацией и активностью ионов натрия, калия, кальция, магния, хлора и др. Электропроводность молока от здоровых коров – величина постоянная и в среднем при 25 °С составляет 4,0–5,5 мСм/см на (миллисименс сантиметр). При мастите содержание солей изменяется, увеличивается колиРисунок 7 – Прибор фирмы чество соматических клеток в Драмиски молоке, в связи с чем меняется
электропроводимость последнего: она примерно, на 20 % выше, чем молока из здоровых долей. На этом основано применение метода определения электропроводности молока для диагностики мастита, для которого предложен ряд приборов. В нашей стране
используют прибор экспресс диагностики мастита фирмы Драмиски при его использовании одно условие – для сравнения необходимо, чтобы у коровы были здоровы 1 или 2–3 доли и прибор ПЭДМ (рисунок 8).
Порядок работы с прибором ПЭДМ. После промывания четырех датчиков 0,5%-м раствором моющего средства и вытирания насухо их заполняют молоком из соответствующих долей вымени выше уровня верхнего края цилиндрической части (1–2 мл). После нажатия кнопки включения прибора должен светиться индикатор работы и индикаторы молока долей вымени, пораженных маститом (красным светом), зеленый свет Рисунок 8 – Прибор ПЭДМ или отсутствие свечения лампочки – отрицательный результат. После удаления молока датчики промыть теплой водой и протереть насухо, затем приступить к исследованию следующего животного.
Подсчет соматических клеток (лейкоцитов) в молоке. Можно осуществлять методами Прескотта-Брида, Ньюманса, М. П. Рязанского, И. И. Архангельского с соавт., Н. М. Хилькевича. Наиболее приемлемыми являются последние два метода, но при исследовании молока в течение первых суток целесообразно использовать метод Н. М. Хилькевича – он достаточно точен и прост. Сущность этого метода заключается в следующем. В пробирку наливают 0,4 мл разведенной краски Гимза (1 мл дистиллированной воды и 5 капель краски) и 20 мм3 исследуемого секрета вымени, получают разведение 1:20. Через 15–30 мин или 1 ч заполняют счетную камеру с сеткой Горяева разбавленным молоком. Лейкоциты подсчитывают во всей сетке (если их мало) или в пяти рядах (если лейкоцитов много), или в 5 больших квадратах (если лейкоцитов очень много). Для определения числа
клеток в 1 мм3 подсчитывают лейкоциты в одном большом квадрате и результат умножают на 5000 (для пересчета количества лейкоцитов в 1 мл молока полученное число умножают на 1000).
2.3 Микробиологическое исследование молока
Бактериологическое и микологическое проводят с целью выявления конкретных возбудителей мастита и определения их чувствительности к антимикробным препаратам, применяемым для лечения. Пробы молока (отдельно из каждой четверти по 10 мл) необходимо брать в стерильные пробирки в конце доения с соблюдением правил асептики (обмывание вымени, обработка рук и сосков ватным тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом, сосок не должен касаться края пробирки). Доставка проб секрета вымени в ветлабораторию осуществляется в течение 3–4 ч с момента его взятия в термосах со льдом; в лаборатории для выделения и идентификации микрофлоры осуществляется посев секрета на элективные твердые питательные среды с последующим изучением культуральных, биохимических, морфологических, тинкториальных, патогенных, серологических свойств микроорганизмов выросших и изолированных колоний. Методами диффузии в агар и серийных разведений антимикробных веществ определяют чувствительность к ним выделенных возбудителей мастита.
При проведении научных исследований в лабораторных условиях также определяют титр лизоцима молока, фагоцитарную активность лейкоцитов молока и ряд других показателей качества молока.
Определение наличия и концентрации лизоцима молока проводится путем чашечной титрации на агаре с луночками (по В.И. Мутовину). Обычно при мастите в молоке отмечается уменьшение или отсутствие лизоцима. В качестве питательной среды берут мясо-пептонный агар (МПА), рН которого 7,2. МПА разливают в чашки Петри слоем 2,5–3 мм, среду подсушивают, выдерживая при температуре 2...6 °С в течение 18–24 ч. В качестве тест – микроба используют культуру золотистого стафилококка штамма ВМ (ветка молочная), получаемую во Всероссийском НИИ
