Одобрен ометодическок йомиссиез йооинженерног офакультет1 а60.2.700( 8протоко л№9 .)
Медведев Г.Фд и . .р- сост . ,Н .И .Гавриченко ,И .А .Долин.
| О Г Л А В Л Е Н И Е | |||
|---|---|---|---|
| Т е м а | 6 Р а з б а в л е н и е с п е р м ы … … … … … … … … … … … … … … … … … | . | 3 |
| Т е м а | 7 Х р а н е н и е с п е р м ы … … … … … … … … … … … … … … … … … … .. | 2 2 | |
| Т е м а | 8 П о д г о т о в к а и о б е зз а р а ж и в а н и е и н с т р у м е н т о ,в п о с у д ы и м а т е р и а л о в … ... | 3 1 | |
| Т е м а | .9 О с е м е н е н и е с а м о к с е л ь с к о х о з я й с т в е н н ы х ж и в о т н ы х и п т и ц … … … … … | 4 2 | |
| Т е м а | 1 .0 У ч е т и о т ч е т н о с т ь н а п л е м п р е д п р и я т и я х и п у н к т а х и с к у с с т в е н н о г о | ||
| о с е м е н е н и я с е л ь с к о х о з я й с т в е н н ы х ж и в о т н ы х и п т и ц … … … … … … … … | . 7 3 |
УДК6 15:991.16
Биотехник а размножени я сельскохозяйственны х животны .х Ч а с т ь 3 . Разбавлени е и хранени е спермы . Осеменени е самок сельскохозяйственны хживотны хи птиц :м етодически еуказани / .я Белорусска я государственна я сельскохозяйственна я академи ;я сос .т Г .Ф .М ,в е д е в д е Н .И .Г р в а е ч и ,о к нИ .А .Д л о и .нГорк ,и 2008 .8.с 0
Приведены п опятт иемам целз ьаняти ,йматериалы иоборудовани ;ерассмотрены соста в сре д дл я разбавлени я спермы , технологи я е е разбавлени я и хранени ;я порядо к подготовк и иобеззараживани яинструменто ,впосуды и материало вдл яискусственног о осеменени ;яорганизацив яыявлени еживотны в хохотс ,епособы т иехник аискусственного осемененис яамос кельскохозяйственны хживотны х иптицт а ,акжс еистему ачет а при использовании искусственного осеменени в яживотноводств .е Дл ястудентос впециальност1 и-70 40 3 1– зоотехнис япециализаци1 й-70 40 30 1 1– биотехнологи я и селекци я животны ,х 1-7 4 0 3 0 1 0 3 – птицеводств ,о 1-7 4 0 3 0 1 0 6 – производствс овининын п аромышленноо йснов.е Табли .1 цРисунко.7 в Рецензенп трофессо рИ.С .СЕРЯКОВ.
� Составлени .еГ.Ф .Медведе ,в Н.И .Гавриченк ,оИ.А .Доли2 ,н008 � Учрежденио ебразования «Белорусскаг яосударственна я сельскохозяйственнаа якадемия2 ,»008 сельскохозяйственнаа якадемия2 ,»008
Тем .6 аРАЗБАВЛЕНИЕ СПЕРМЫ Цел ь занятий : приобретени е студентам и навыко в приготовлени я синтетическис хре др иазбавленис япермы производителес йельскохозяйственны хживотныу с хчетому слови йс ирокх аранени.я Объекты исследовани ,я материалы и оборудование : самцы животны ,х животные-манекены ил и чучел( адл я бык а и хряк ;)а сперм а свежеполученна яр иазбавленна ;яинструментыо ,борудовани е имат-е риалы дл яполученис япермыт ;ермоста ,тхолодильнив ,кодяна ябан ,я магнитна я мешалк ,а биологически й термоста ;т спектрофотомет р э(лектрически й фотоколориметр ,)микроскопы МБР( МБИ- ,1 МБИ- ,3 МБИ- 4ил иБИОЛАМ с )осветителям ,имикроско пМБИ-1 1ил иБИОЛАМ-М т селевизионно й камерой ; обогревательны е столик ,и предметны е и покровны е стекл ;а посуд а – колбы , мерны е цилиндры и мензурк ,и смесител и дл я спермы ; градуированны е пипетк ,и стеклянны е палочки ; фильтры бумажны е и марлевы ,е мембранны й фильт р 4,0 5мкмс ;пиртовыт еампонык ;омпонентыс рев :дод адистиллированнак ,яуриныя ейцг ,аомогенизированно емолокг( оомогенизированны е сливк и иобра ,)тлактозг ,алюкоз ,афруктозс ,аахарозг ,алициг ,нлиц-е ри ,н натри я цитра ,т KH2PO 4 , Nа2HPO4� 12H2O , натри я хлори ,д натри я гидрокарбонак ,талих ялориа ,дммонис яульфа ,тмагнис яульфах ,тел-а ток ,напроновак яислотт ,аокоферо( л25–30%-ны ймасляны йраствор ,) ди-трет-бутил-крезо л (ДТБК ,) декстри ,н гуммиараби ,к трис-буфе ,р лимоннак яислотк ,асилис ,тпермосан- 3илс ипермоса нППК ил иполиге ,н стрептоци ,д пеницилли ,н стрептомици ,н каталазт ,аилозиг ,нентамицил ,нинкомицис ,нпектинамици.н Методически еуказани.я Заняти япроводятс я вклиник е илабор-а тори и кафедры (учебном пункт .)е Сначал а студентам необходим о четк о уяснит ь цел ь и значени е разбавлени я спермы , затем познакомитьсс с яоставом наиболер еаспространенныс хинтетическис хред дл я разбавлени я спермы производителе й и правилам и и х приготовлени .я Особов ениманис еледуео тбратит ьнт аребованик к яомпонентамс ре ,д срок ихраненис яре д посл е приготовлени ,я услови яразбавленит( яемператур а идс ,).ртепенр ьазбавленис япермы с учетомк оличеств аподвижныс хперматозоидоо в вднод йозд ело ясеменени .я Пр и использованиг иотовы х коммерчески х сре д и автоматическо й системы оценк и и разбавлени я спермы студенты должны познакомитьс я с последовательностью и сущностью отдельны х технологич-е скио хпераци.й Послэ етогс отудентыд олжныс амостоятельн оприготовито ьдн уи з синтетически х сре .д Посл е приготовлени я среды( возможн о одновр-е менн о с приготовлением е )е можн о приступит ь к получению спермы о тпроизводител .яПолученнуюс пермо уцениваю тз иатемр азбавляю .т Пере дразбавлением обязательн онеобходим опроверитк ьачеств опри-
готовленно й среды . Разбавленную сперм у оставляю т дл я изучени я выживаемостс иперматозоидо .в
.1.6Состас вре диз начени еразбавленис япермы
Значени е разбавления спермы. Разбавлени е спермы позволяе т увеличит ьобъемэ якулят а иосеменит ьбольшс еамот а ,какжс еохр-а нит ь жизнеспособност ь и оплодотворяющую способност ь сперматозоидов вно ерганизм.а Требовани я к средам дл я разбавлени я спермы. Дл я разбавлени я использую тспециальныс ереды ,биологически ес иинтетически .еОн и должныо твечатс ьледующимт ребованиям: поддерживат ьоптимально еравновеси еминеральны хвещест ,вн-е обходимы хдл яжизнедеятельностс иперматозоидо ,в иимет ьосмотическод еавленир ,еавно( еизотоническоек )ровс иамц;а предохранят ь сперматозоиды о т температурног о шок а и предо-т вращат ьил иослаблятг ьубительнов елияни ен ани хпроцессо ,впрои-с ходящиз в хамораживаемо йило иттаиваемос йперм;е способствоватс ьохранениюп лазматическо ймембраныа и кросомы , препятствовата ьгглютинацис иперматозоидо;в снижат ь активност ь метаболически х процессо в в сперматозоида х прх иранени ипро итносительнв оысокит хемпература( х 4– 20ºС ;) защищатс ьперматозоиды от токсически хпродукто ,вобразующихсп в яроцесс еметаболизм;а предупреждат ь развити е микроорганизмо ,в которы е губительн о действую тнс аперматозоидып и оловот йракс тамо.к Веществ ,аиспользуемы едл яприготовленис яре.д Дл яприготовлени я сре д применяю т компоненты( реактивы ) з ваводско й упаковк :е с втеклянны хбанка с хпритертым ипробкам( иил с икорковым ипробкамз ,иалитымс иверх упарафиномт а ,)акжз в еапаянны хполиэтиленовы хмешочка .хН аупаковк едолжн абытэ ьтикетк с аобозначением н-а звани япрепарат а ипредприятив ,яыпустившегр оеактис ,втепенч ии-с тотыр еактив( аЧДА – чистый дла янализ ,аХЧ – химическич йистый ) и номерк аонтрольнога онализ .аХраняр теактивы в шкафас в хухомт епломп омещени .и Длп яриготовленис яреи дспользуюс тледующив ееществ.а Натри я цитрат (Na3C6H5O7 � 5H2O – трехзамещенны ,й пятиводный .) Белы е прозрачны е кристаллы ил и мелкокристаллически й порошос ,клабощелочногс ,оолоноватог овкус .аОбладае тхелатнымс ивойствам и а(ктивн о связывае т ионы кальци я и тяжелы х металло в и уменьшаес тодержани еис в хред )е ипонижае тнабухани е ипроница-е мост ь мембраны сперматозоидо ,в предохраня я и х о т потер и электрическогз оаряд аа игглютинации ;рассеивае тжировы ешарик в ижелтк е тач ,кт опро иценкр еазбавленнос йпермы по дмикроскопом можн он-а
