Концентрацию водородны х ионо в (рН ) в сред е определяю т пр и помощр иН-метрос вогласнн оаставлениямп п орименению приборо.в Контрольныв еопросы .1Целр ьазбавленис япермы? .2 Каки е требовани я предъявляю т к средам дл я разбавлени я спермы? .3Рол ьжелтк акуриныя хиг ,цлицеринс ,аахаро ,вразличныс холе й с вредад хлр яазбавленис япермы? .4Чтт оако еизотонически йраство( рбуферк ,)акове аг оролс в ьр-е дд елр яазбавленис япермы ?Наиболеч еасти оспользуемыб еуферы ? .5Длч яегв оключаюс в треды противомикробныв еещества ?Каки е антибиотик ис иульфаниламиды наиболе ечаст оиспользуютск ,яака я концентрации яр в хазбавленнос йперме ? .6Возможнл ов инесениа ентибиотико в внеразбавленнуюс перму ? .7 Каки е недостатк и имее т молочна я среда ? Каков а основ а это й среды ?Какив ееществд аополнительнв оносятсэ в ятс уреду? .8 Како е осмотическо е давлени е в сперматозоиде ? Каков о он о должнб оытс в ьредд елр яазбавленис япермы? .9 Пр и каки х температура х производитьс я начально е разбавлени е спермы ? Почем у и ка к необходим о охлаждат ь сперм у пере д финальнымр азбавлением ? 1 .0Вк акос йтепенр иазбавляюс тперм упроизводителес йельскохозяйственны хживотных ?Ок таки хфактороз вависис ттепен ьразбавл-е ния? 1 .1Какок еоличествс оперматозоидо вдолжнс оодержатьс в яодно й дозд ело ясемененик яоровыо ,вцыс ,виньк ,иобылы ? Тем .7 аХРАНЕНИЕ СПЕРМЫ Целз ьанятий :изучитс ьпособы храненис япермыс амцос вельскохозяйственны хживотны ,хосвоитт ьехникз уамораживани я иоттаив-а нис япермыб ык.а Материалы и оборудование : разбавленна я сперм а бык( абаран ,а жеребц ,а хряк ;)а термос ,а бытово й холодильни ,к сосуды Дьюар а с канистрам и ил и марлевым и мешочкам ,и пеналыс( таканчики ) дл я соломи ,н металлическа я воронк а дл я сбор а грану ,л лопатк а дл я съем а грану л с пластины , корнцанг и и пинцеты , фторопластовы е пластины ; ле ,д жидки й азо ;т синтетически е соломины( пайеты ) дл я расфасовк и спермыс ,теклянны ешарик идл яукупоркс иоломив ,накуумны йнасо ,с машины дл ямаркировк( иМ6-ММС- 2ил иМ6-ММС-3 ,)наполнени я и укупоркс иоломи( нМ6-АПА ;)прямоугольнат яеплоизолированнае ямкост( ь3 0 � 4 0 � 3с 0м )ил иширокогорлы йцилиндрическо йформыс о- су дДьюар ;абиотермостаты ,микроскопы ,подогревательныс етолики ; 2 2
бюретк а с резиново й трубко ,й зажимом и стеклянным наконечником дл я дозировани я спермы ил и автоматическо е устройств о дл я расф-а совкс ипермып рз иамораживаниг в иранула .х В настоящев еремд ялс яохраненис япермыс амцос вельскохозяйс-т венны х животны х применяю т кратковременно е хранени е ил и долгосрочноз в еамороженномс остояни.и Прк иратковременном храненис иперм убыкос вохраняю тд о7 2 ,ч жеребцо в– д о7 2 ,чбарано в– д о2 4 чпрт иемператур е+...2+4оС .Пр и этоми спользуюх толодильник иил иширокогорлыт еермосыс л оьдом. Сперм у хряко в сохраняю т 3 –1 4 су т пр и температур е +1...7+18оС , используд ялх яраненит и яранспортировкт иермосы-ящик.и Длх яраненис япермыб ыкоб ,варано ,вжеребцо вх ирякот в вечени е длительног о времен и бе з потер и оплодотворяюще й способност и применяюз тамораживание е в ежидкома зотп ер и–196 .С
.1.7Храненис епермы прит емпература хвыш0 е � С
Хранени е спермы хряк а при температур е 17–18 � С . Дл я разбавлени я ихраненис япермы хряк апрт иемператур е17–18 � Ст в ечени е 3 – 1( 0д1 о4с )уто кприменяюс тоответствующис еинтетическис ереды . Разбавляю т сперм у посл е получени я и определени я е е качеств .а Дл я разбавлени як ираткосрочног охранени( яд ос 3у )тиспользуюэ тякуляты с концентрациес йперматозоидо вн емене е10 0мл в .н 1мс лпермы .Длб яолед елительногх оранени янеобходимыэ якулятыв с ысоким содержанием сперматозоидо .в Обычн о эт о наиболе е качественна я част ь второ й фракци ,и собираемо й пр и мануальном получени и спермы .Степенр ьазбавленив яарьируео тд 2:1 т .9:1 оПослр еазбавлени я 1 вмс лпермыд олжнс оодержатьсо якол3 о 0млс .нперматозоидо в а ,в дозд ело ясеменени( я10 0мл )– н еменее 5,2млрп .додвижнык хлето .к Разбавленную сперм у расфасовываю т в полиэтиленовы е флаконы , бутылочк ,и пакеты , флекситюбик ,и в специальны е катетеры дл я ос-е менени я ихранят в темнот епрт иемператур е17–18 � Сс в терильном боксе-термостат е ил и в специальны х термоса х дл я хранени я и тран-с портировк .иВв орем яхраненис яперм уосторожн оперемешиваю тн е менед евур хас в зутк .иПр ихранени ит иранспортировк енеобходим о строгс оледитз ьт аемпературным режимом .Отклоненит еемпературы о топтимально йотрицательн овлияе тн аоплодотворяющуюс пособностс ьпермы . Хранени е спермы при температур е 2–5 � С . Сперм у быка , сохр-а няемую пр и 2–5 � С , фасую т в стерильны е стеклянны е флаконы , одноразовы е полиэтиленовы е ампулы ил и в пайеты . Расфасованную сперм у оставляю т пр и комнатно й температур е (18–25 � С ) н а 20–3 0 ми ,н
упаковываю т ипомещаюх в толодильни кпрт иемператур2 е–5 � С ил в и пищевыт еермосс ал оьдом . Быстро еохлаждени еразбавленнос йпермы нежелательн .оПоэтом у целесообразн ,очтобы пониженит еемпературы о т32 � С д о2–5 � С происходил опостепеннт в оечени2 е– .ч 3Длэ ятогс оначал анеобходим о поместит ьразбавленнуюс перм у с втеклянныс йтака н ил и ванночк с у водо й тако й ж е температуры , ка к и температур а спермы( 32 � С ,) з а-а тем перенест иив в ходяную банют емпературы 22 � С н а2 0минут ,послч еег опроизводит ьфасовк уд иальнейшео ехлажденис епермы .Хр-а нят в теченит ере хдне .йИспользуюс тперма с уктивностью н ениж е 7 балло .в Этос тпосох браненип ярименяетсо яченр ьедк .о Хранени е спермы баран.а Пр и искусственном осеменени и ове ц широк оиспользуюс твежеполученную неразбавленнуюс пермк ,уоторао ябеспечивае тнаиболев еысокуюо плодотворяемост ьмато .кРа-з бавлени е ихраненис епермы нескольк оухудшае трезультаты .Однак о рационально еиспользовани еценны хпроизводителе йлегч едостигае-т с я пру исловир иазбавлених и яраненис япермы . Дл яразбавлени я и храненис япермы прт иемператур е н е ниж е 0 � С используюс тинтетическис ереды ГЦЖ иГФЖ .Разбавляюс тпермс в уоотношени 1:1 и– п 2:1рт иемператур2 е5–30 � С . Посл е разбавлени я сперм у можн о использоват ь дл я осеменени я в течени е 4е ,чсл ихраните ь епрт иемператур ен ениж е16 � С .Есл иж е сперм уохлаждаю тд о2–5 � Ст ,с оро кхранени я увеличиваю тд о2 4 .ч Храня т сперм у в холодильника х ил и в пищевы х термоса х с о льдом . Пере дпомещением т вермо сфлаконыс с опермо йобвертываю твато й ил ивставляю тг внездс апециальны хпоролоновыа хмортизаторо в и затем упаковываю т в полиэтиленовы е мешочк .и Мешочк и кладу т н а лет в дермос а ,сверх уит хакжп еомещаюн тебольшок еоличествл оьд.а Храненис епермы жеребц.а Дл яразбавлени я икраткосрочног( о в течени е4 8ч )храненис япермы прт иемператур е2–5 � С используетс я сред а ЛХЦЖ . Разбавляю т свежеполученную сперм у с подвижностью сперматозоидо вн енижб 6 еалло вк ионцентрацие1 й5 0миллионо в в м л в соотношени и ;3:1 температур а среды в момен т разбавлени я должн а быт ь 25–30 � С . Расфасовываю т сперм у в стерильны е флаконы емкостью 50–10 0 м л с притертым и пробками ; пробкз иакрепляю т р-е зиновым кольцам .и Флаконы с о спермо й заворачиваю т в марлевы е салфетк иил ибумаг у иупаковываю т вполиэтиленовы епакеты .Пак-е ты с о спермо й помещаю т в термо с с о льдом . Охлаждени е спермы должн о проходит ь постепенн .о Поэтом у особо е внимани е уделяю т подготовкт еермосо вт иеплоизоляционны хпрокладо ;кле дт вермо с помещаюп в толиэтиленовы хмешочка .х
