са нППК ,полигек ,номбиспермоса нЛАП д и .рВса ентибиотикд иолжныб ыт ьпроверенын б аезвредностд ьлс яперматозоидо .в Пр ихраненис ипермы возможн оразвити е вне ймикроорганизмо .в Попадаю тон в имомен тполучени яил иобработкс ипермы .Размножаяс ,ьмикроорганизмыв ыделяюс в тред упродуктыо бменк ,аоторы е отрицательно сказываютс я н а выживаемост и сперматозоидо .в Пр и осеменени и внесенны е с о спермо й в половы е пут и самк и микроорг-а низмы могу т препятствоват ь оплодотворению ил и развитию бер-е менност .и Особенн о большую опасност ь представляе т загрязнени е спермы возбудителям и специфически х половы х инфекци .й Дл я пр-е дупреждени я размножени я микроорганизмо в в сперм е и инфициров-а нис япермыв носяс тульфаниламидыа и нтибиотик.и Среды готовя т н а дистиллированно( йжелательн о дважды ди-с тиллированной) вод .е Проводит ь дистилляцию необходим о в цельностеклянном дистилляционном аппарат ,е чтобы вод а н е соприкасалас ь металлическимд иеталям .иХраняз в такрытыс хтеклянныс хосуда.х Среды дл я разбавлени я спермы бык .а Сперм у бык а храня т пр и температур е–196оС( вжидкома зот ,)еиногд апр5..0 иоС ипрк иомна-т ныт хемпература .х Разбавляю т сперм у средам ,и соста в которыз хависи т о т технологи и расфасовк и и хранени .я Многи е средыз апатентованы. Прз иамораживанис ипермы( г вранула хс иоломинахр )азбавл-е ни е проводя т ЛЖГ л(актозо-желточно-глицериновой) средо й ил и ЛЖЦГ л(актозо-желточно-цитратно-глицериновой) .Ве с еостав:е
Водд аистиллированна1 ........... я0 0м1 л0 0мл Лактоз. а…..................…1 ...........1 г 5,1г 5,0 Натри яцитра ........................... т – г 2,0 Желток куриныя хи2 ................ ц 0м2 л 0мл Глицери...................... н… 5 ..........м 5 лм л Спермосан-............ 3…5 ..............т 0ы .сЕД5 .т 0ые .сд Многи е организаци и п о искусственном у осеменению использую т двухфракционныс ереды с ипермр уазбавляюд тважды .Нс еодержаща я глицерин а фракци я А используетс я дл я начальног о разбавлени я и охлажденис япермыв ,тора я фракци яБ у сдвоеннымс одержаниемг лиц-е ринд аобавляетс япослт еогк ,оас кпермо ахлажденд а о+5оС .Введени е глицериново й фракци и посл е охлаждени я уж е разбавленно й спермы предотвращае т возможны еповрежденис яперматозоидо в иобеспечивае т проявлени е действи я антибиотико .в Наиболе е проста я сред а – желточно-цитрато-глицеринова( яЖЦГ) , состоящаи яд зву хфракций: Ф я и ц к а р А Цитратныб йуфе9,2 р%-ны....... й………………4 ..........0 0мл Желтос квежи( х1–д 2нк )яуриныя хи ц………………10 0мл
Ф я и ц к а р Б
| Ц и т р а т н ы й б у ф е р ............................. … … … … … … .. 3 3 0 м л |
|---|
| Ж е л т о к .................................................. … … … … … … 1... 0 0 м л |
| Г л и ц е р и н ................................................ … … … … … … 7.... 0 м л |
Финально е соотношени е фракци и А + сперм а и фракци и В – .1:1 Прт иакомс оотношенис иодержани е компоненто( в в % )с вмеси : б-у фец ритратны й – 7 ,3 желто к – 2 0 и глицери н – .7Вэ тс уред( уо вдн уило иб ефракции )можнв оключат ьфруктоз уилг илюкозк ;уонечна я концентрацис в яредо ед 1 т2,1 о5% .ЖЦГс редд аолжн аиметр ьН8,6 – о и 9,6смотическод еавлени2 е85–30 0миллиосмомоле .й Медведе вГ.Ф . иГуминска яЕ.Ю( .2007 )предложил имодифицированную цитратно–лактоза–желточно–глицериновую среду (ЦЛЖГ) . В соста в это й среды входя :т натри я цитра т 3-замещенны й 2-водны й (Na3C6H5O7 2·H2O ,) лактоз( ахимическ и чиста я С12Н 22О 11·H 2O ,) желто к куриныя хи( ц1–д 2нг и )ялицери.н

Ф я и ц к а р Ас реды
Цитратныб йуфек с ронцентрацие9,2 й% – 10 0м л Лактоз а– 5,3г 8 Желток куриныя хи ц– 2 5мл Смеса ьнтибактериальныв хещест в– 2мл
Ф к а р я и цБс реды Цитратныб йуфек с ронцентрацие9,2 й% – 8 5,2м л Лактоз а– 5,3г 8 Желток куриныя хи ц– 2 5мл Глицери н– 1 5,7м.л В дву х м л стерильног о водног о раствор а антибактериальны х в-е щестд волжнс оодержатьс1 я 0мт гилозинт аартрат5 ,а 0мг гентамицин а3 и6/0 0мл гинкоспектин .аОсмотическод еавленис ереды – 335–38 0 миллиосмолер ,йН9,6 – .0,7 В предыдущиг еоды широк оиспользовалас ь молочнас яреда .Та в ,к США в199 .г 2 4/1част ьвсес йпермы был аразбавлен амолочнос йр-е до .й Единственны й серьезны й недостато к это й среды – эт о наличи е оптическр иазличимы хжировы хшарикок ,воторыз еатрудняюо тценк у подвижностс иперматозоидо.в Готовяд тв ефракцис иреды.

Фракци яА

Прогрето емолок о………………………5 ...0 0мл
Фракци яБ
Прогрето емолок. о………………………4 ..3 0мл Глицерин а...........………………………7 ...... 0мл
Молочнас яредд аолжн аиметр ьН5,6 – 6,6о исмотическод еавлени е 260–29с 0реды миллиосмоле .й Сперм убык аможн охранит ь ипрт иемператур е+5...2оС т вечени е 7р ,ч 2азбави в глюкозо-цитрато-желточной средо.й
Вод адистиллированна я…………… ...…1 ..0 0мл Глюкоз............................... а……..………г 3 ... Натрил йимоннокислы... й………………г 4,1 .... Желток куриныя хи... ц……………2 ............. 0мл Спермосан-...... 3…………………………7 ..5–9т 0ые .с.д В США широк о использовалас ь желточно-фосфатная среда : фосфатныб йуфе и ржелток куриныя хис в цоотношени .1:1 и Фосфатный буфе( ррН7,6 –8,6с )одержи1 в т0 0мд листиллированнов йоды г 2,0KH2PO 4 и г 0,2Nа2HPO4.12H2O .Смес ьподогреваетс в я кипяще йводяно йбан ед орастворения соле .йХранитс япрт иемпер-а о тур1 е5 С .Пере диспользованиемд обавляетс янеобходимок еоличес-т в ожелтк .а Рекомендуетс яд иругас яред а– Corn lleUvine ytisrEetxnder б :уфе р– 80%( объем ,)ажелто к– 20%( объем ,)апенициллин а– 100е 0 дс итрептомицин а– 100 0е .д
| Н а т р и я л и м о н н о к и с л о г о ( N a 3C6H5O7 .. 2 H 2 O ) … .. 1 5,4 г |
|---|
| Н а т р и я б и к а р б о н а т а ................... … … ................... 1,2 г |
| К а л и я х л о р и д а ................................. … .................. 4,0 г |
| Г л ю к о з ы ..... ........................................ … ............... 0,3 г |
| Г л и ц и н а ................................................ … ............. 4,9 г |
| Л и м о н н о й к и с л о т ы ............................... … ........... 9,0 г |
| С у л ь ф а н и л а м и д а с( т р е п т о ц и д )а ........... … ........ 0,3 г |
| Д и с т и л л и р о в а н н о й в о д ы … … … … … … … … .. д о 1 л |
В НовоЗ йеланди иширок опрактикуетсх яраненис епермыт в еч-е ни е тре х дне й пр и комнатны х температура х (18–24о С .) Осеменени е скотс аезонно е– с середины сентябр яд одекабр .яОсеменяюе тжегоднд о 8,1 омл .нживотны .хВ1 99с .г 1пермоб йыкг аолштинско йпороды Crock stteTervoб rыл опроведент в оеченит ере хмесяце3 в8000о 0сем-е нени.й Дл я разбавлени я спермы использую т желточно-цитратную ср-е до в ,усновк уоторой положе нцитратныб йуфе .рСред унасыщаюа тзотомд и обавляюк тапроновуюк ислот .у
