чаят холщин апакетс ас опермо йнд еолжн абытб ьольш е4– 5мм .П-е ре д использованием пакеты охлаждаю ,т а посл е заполнени я спермо й осторожн о вытесняю т и з ни х возду х и концы закатываю т дважды . Пакетыс с опермо йпомещаюс в тпециальныд еержател с ипенопластовым и поплавкам и и перенося т в широкогорлы й сосу д Дьюара . Выдерживаю т в течени е 5– 7 ми н в пара х жидког о азот ,а н а расстояни и 10–1 2ммо е тг оповерхност .иПослэ етог опакеты помещаю в тжидки й азон тх аранени .е Прз иамораживанис ипермы г в иранула х в ипакета х водно йдоз е (125–13г 0рануо ,лди нпакео тбъемом 2 5м лил2 и– 3пакет ап1 о 3мл ) должнс оодержатьсо якол о80 0млс .нперматозоидо а ,впосло еттаив-а ни я– 300–40 0млп .нодвижнык хлето.к .3.7Хранени ,еперевозк аио ттаиваниз еамороженнойс пермы Сосудыд лх яраненис япермы. Замороженнуюс перм ухраня в ту-з когорлыс хосуда хДьюар .аТакис еосудыр азличное ймкост и– 2 ,55 ,0 0 и50 0литро .вИзготовляютс яон ии знержавеющес йтал ,идвустенны .е Пространств омеждс утенкамз иаполняетс я порошково йил ипорошково-вакуумнот йермоизоляцие .йНг аорловинс еосуд аподвешиваютс я металлическик еанистры ил имарлевы емешочк идлс япермы .Крышк а сосуд а имее т пенопластовую втулк ,у котора я размещаетс я г ворловин .е Чтобы температур а спермы в о врем я хранени я н е повышалас ,ь в сосуд елюбогт оип адолжн ооставатьс ян емене е30–40% жидкого за о- т( ао т полно й емкости ,) поэтом у сосу д необходим о регулярн( очере з 30–6с 0уп )тополнята ьзотом . Техник а безопасности при работ е с жидким азотом . Жидки й азо т – прозрачна ,я бесцветна я и легк о испаряющуюс я жидкост ,ь удельныв йее ск 8,0 ек ,л/гипип тр итемператур емину1 с96 � С . Азо тнт еоксичео ,нднакр в оезультат еиспарени я инакопление яг о в помещени и содержани е кислород а в воздух е уменьшаетс ,я чт о можев тызыват ь улюдег йоловнуюб олг ,ьоловокружени ед иаж епотерю сознани .яПр ипопадани ин аоткрыты е участкт иел авызывае тобморожени( еожо.)г Помещени ,е в котором находятс я сосуды Дьюар а ил и стационарных еранилищ с ажидкима зотомд ,олжнб оыто ьборудован оприточновытяжно й естественно й ил и принудительно й вентиляцие .й Курени е в таком помещени и категорическ и запрещаетс .я Температур а жидког о азот аподдерживаетс ян апостоянному ровн( е–196 � Ср в )езультате ег о беспрерывног о испарени .я Поэтом у горловин а сосуд а Дьюар а н е должн абыт ьплотнз оакрыт ,аособенн опр иперевозк .еПерсонал ,ур-а ботающем у с азотом , следуе т закрыват ь горловин у сосуд а Дьюар а крышкам ,и предназначенным и тольк о дл я ни .х Есл и плотн о закрыт ь
сосут ,дв оозможее нгв озры .вНд еопускаетсэ яксплуатацис яосудо ,в у которыв херхняч яастг ьорловиныо брастаел тьдом. Пр идлительноэ йксплуатацис иосудо вДьюар априходитс япостоянн о доливат ь жидки й азо ,т в котором имеютс я примес и кислород .а Кислоро д кипи т пр и боле е высоко й температур е – мину с 183 � С . Поэтомк уонцентрацие ягс в оосуд епостепеннв оозрастае т иостающаяс я смес ь газо в становитс я огнеопасно .й Племпредприяти я должны контролироват ь содержани е кислород а в сосуда х и пр и достижени и содержани я ег о 15% перенест и сперм у в друго й сосу ,д а и з контролируемог о– слито ьстатка изотв адало и тпредметоо врганическог опроисхождени я (дерев ,а бумаг ,и тряпо ,к особенн о промасленных ) и н-а полните ьгс овежима зотом .В оизбежанив езрывз аапрещаетсу ядалят ь обогащеннуюк ислородом жидкости ьс зосуд апутемв ыпаривани.я Работат с ьжидкима зотом необходимз в оащитныо хчка хс ивободны х кожаны х рукавица ,х чтобы пр и необходимост и и х можн о был о легк о сбросит .ь Брюк и должны быт ь бе з манже т и прикрыват ь верхнюю част ь обув .и Есл и жидки й азо т попадае т н а незащищенную кож ,у е е следуе т обмыт ь водо .й Особую осторожност ь следуе т соблюдат ьпр иоттаиванис ипермыз ,амороженнос в йоломина .хПр иплохо й герметизаци и и быстром испарени и азот а в перио д нагревани я може т резк о повыситьс я давлени е в соломин ,е чт о приведе т к разрыв у е е оболочк.и Прз иаправкс еосудо вил ибиологически ххранилища зотомг ибки й шлан г опускаю т д о дн а заправляемо й емкост ,и чтобы предупредит ь выброк сонц ашланг аиг зорловиныс осуд а ипопаданиа езот анс атоящир хядомл юдеЗ .йаливата ьзос в тосун дад омедленн.о Есл и пр и испытани и сосуд а Дьюар а обнаруживаетс я нарушени е теплоизоляци и – утрат а вакуум( апокры т вблиз и горловины слоем ине ,)я егз оапрещаетс я оставлят ь н а отогре в в помещениг ,ид е могу т находитьс я люд .и Необходим о посл е слив а азот а поместит ь сосу д н а 3–с 5уто в кизолированном помещени.и Оттаиванис епермыг в ранула.х Дло яттаиванио ядног йранулы необходим оимет 1 ьм9,2 л%-ногр оаствор анатри яцитрат( авыпуск-а етса в ямпулах )в иодянуюб аню илб ииотермостат с температуров йоды 38–40 � С . У основани я шейк и ампулы с натри я цитратом делаю т кругово й надре з пилко й п о стекл .у Надпиленны й участо к протираю т спиртовымт ампоном иотламываю тверхнюю часта ьмпулы .Есл ио-т версти е недостаточн о дл я прохождени я гранулы , т о ег о расширяю т путемо ткалыванис ятерильным пинцетом небольши хучасткос втекл .а Длэ ятог ооднв уетв ьпинцетв аставляюа в тмпул ,упк оруг упродвиг-а ю тпинце т иобламываюс ттекл .оЗатема мпул с уцитратом натриз я-а рываюс ттерильнымв атным шариком ипомещаюв в тодянуюб анюз -а благовременнз( о3 а– 5минд )лп яодогрев .а
Корнцан г дл я извлечени я спермы обтираю т спиртовым тампоном , снимаюк трышкс с уосуд аДьюар ак иладуе т ерядом пробков йвер а ,х корнцан гпомещаюв тнутрс ьосуд адл яохлаждени .яПослэ етог оподнимаюк танистрс ус опермод йг оорловиныс осуд ак иорцангом извл-е каю т одн у гранул ;у канистр у опускаю т в азо .т Сня в ватны й шари ,к быстр опереносяг транул уа вмпул с уподогретым цитратом натри ,я и опятз ьакрываюа тмпулв уатным шарикомз а ,атемз акрываюк трышк у сосуд а Дьюар .а Оттаиваю т сперм у д о полног о растворени( я8–1 0 )с слегк а враща я ампул у межд у пальцами ; достаю т ампул у с оттаянно й спермо ,й вытираю т е е насух о салфетко й и ставя т н а сто .л Размороженнас япермд аолжнб аыти ьспользовант в аечени1 е 5ми.н Оттаиванис епермы в пайета.х Дл яоттаиванис япермы в пайета ,х включаюо тттаивател( ьбиотермоста )тд иоводят температурв уодыд о 38 � С (пайеты длинно й 1 0 см ,) 37−3 8 � С (пайеты длинно й 1 5,3 см ,) 35−38 � С( канадски епайеты длинно й1с 5,3м )ил ид оинот йемпературыу ,казываемо йпроизводителям .иКорнцанд гл яизвлеченис япермы обтираю т спиртовым тампоном , снимаю т крышк у с сосуд а Дьюар ,а кладуе т ерядом пробко йввер ,хохлаждаю ткорнцан .г Поднимаю тк-а нистрс ус опермод йу оровн1 яс 0мо в терхнеч йастг иорловиныс осуд а к иорнцангом извлекаюо тдн упайето ,упускаюк танистра в узо ,тпер-е хватываю т пайет у пинцетом , легк о встряхиваю т е е 1– 2 раз ,а чтобы удалит ь азо т и быстр о помещаю т в оттаивател .ь Закрываю т крышк у сосуд а Дьюар ,а оттаиваю т сперм у в течени е 10–1 1 ( сотечественны е пайеты ,) 35−4 0 с (канадски е пайеты ) ил и в течени е иног о времен ,и указываемог опроизводителям .иВв одяноб йанп еайетту удерживаю в т вертикальном положени и ипостоянн оперемещаюв в тод .еВынимаю т пайет уио зттаивателв ,яытираюе т енасухс оалфетко йк иладу тн аподставк .уСалфеткв уыбрасываюв в тедр .оПослр еазмораживанис яперм а должнб аыт ьиспользовант в аечени1 е 5мин . Перевозкс апермы . Перевозяс тперм с уплемпредприяти я врайонныс етанци иил ин апункты искусственного осеменени янс апециальн о оборудованны хмашина .хНередкс оочетаю тдоставка узот ас ипермы . Сосуды Дьюар аиле имкостз ,иаполненны ежидкима зотом ,необходим о надежн о закрепит ь н а транспортном средств .е Сосуды , которы е предполагаетст яранспортироватс ьамолетом ,надз оаполнят ьн еболе е чемн п аоловине умкост.и Транспортируюс тперм ухряк а вбоксе-термостат еил ис впециальны х термоса х дл я хранени я и транспортировк ,и бытовы х сумкаххолодильникат ,хермосах-ящикахк в ,оторыд хлт яеплоизоляци иприменяетс я пороло .н Н а перио д транспортировк и колбы и флаконы плотну окупориваю а ,тпослд еоставк ин апунко тслабляюр тезиновы е кольц ,афиксирующи ебумаг ун акольца ,хил ирасслабляю ткрышк и флаконо .вСпермт уранспортируюч тере3 з 0мип нослр еазбавлени .я
