Высушенны ешарик ипомещаю тс втеклянную банк ус итерилизую т в сушильном шкаф упрт иемператур1 е80 � Ст в ечени.ч 5,1 е Перер даботок йорпу смашины протираю тмарлевос йалфеткойд ;-е талн ,иепосредственнс ооприкасающиесс с яоломинам ис итеклянным и шарикам( ибункер а дл я шарико в и соломи ,н укупориватели ,) обраб-а тываюс тпиртовымт ампоном .Наконечник ис иопл ,амедицински еполивинилхлоридныт ерубк иу иплотнителс итерилизуюк типячением. Коробк у с маркированным и стерильным и соломинам и фиксирую т рычагом у механизм а подач и и х н а бараба ,н подсоединяю т поливинилхлоридную трубк у с соплом дл я подач и спермы , коне ц трубк и с надетым наконечником погружаюе в тмкост с ьразбавленнос йпермой . Посл е включени я машины сперм а нагнетаетс я в соломинк у с обеи х сторо н з иакупориваетс я двум я стерильным и цветным и стеклянным и шарикам .и В процесс е работы следя ,т чтобы столби к воздушног о пузырьк а бы л длино й 5–1 2 мм , а стеклянны е шарик и заталкивалис ь н а глубин5,1 у– 2мм . Наполненны е спермо й соломины беру т в рук у воздушным и пузырькамв ини зв истряхиваю тнесколькр оад злт яогч ,отобы пузырьк и переместилис ьнс аередин .у Есл и используютс я пайеты Касст ,у о спермз ааполняетс я с одног о свободног оконц адс омачивани япробочк ии зполивиниловогс опирт а и бумаг ,и а второ й коне ц запаиваетс я ультразвуком . В ни х пузыре к воздух а отсутствуе .т Пайеты этог о тип а могу т имет ь различны й цве т (всег о 1 8 цветов ,) чт о позволяе т легч е идентифицироват ь пород у и клас с производител,я удобне е и быстре е извлекат ь нужны й образе ц спермыд л яиспользовани .я Послз еаполнени я соломины раскладываю т п о 14 3 ш .т в металлически ерамк ис иверх уприжимаю тдержателем .Рамк икладу тодн ан а другую п 5 ошту ,кпомещаюк в торобк ус итавя в тхолодильни кХЖС30к в ,0отором поддерживаетст яемпературо акол4 о � С .Вх олодильникс еперм апостепенн о иравномерн оохлаждаетс ядт оемпературы 4 � С т вечени ечасс( ас окоростью 3,0–5,0 � С вмин .)Выдерживаюс тперм у прт иакот йемператур ет вечени е3– 4 ч ипотомз амораживаю т вбиологически х хранилища х н а замораживающем устройств е – медном щит ,екоторыз йакрепляю тн арасстояни и6–с 8м о тповерхност ижидкога озот .а Дл я поддержани я стабильно й температуры н а щит е (мину с 131...050 � С ) послз еагрузк и рамо к с соломинам и и обеспечени я оптимально й скоростз иамораживани я спермы необходим о по д давлением 2,0– 3,0 атм . подават ь газообразны й азо т с вентил я газосброс а тран-с портно йцистерны .Коне цшлангд аолжел нежат ьнд анб еиологическог о хранилищ .а Есл и замораживани е производитс я бе з обдува , тогд а щиз тамораживающег оустройств адолже нкасатьс яповерхност ижидкога озот.а
Замораживанис епермыв едетст в яечени е 7ми .нПослэ етогс ооломины перенося т с помощью специально й воронк и в пластмассовы е стаканы ,наполненны ежидкима зотом з иакрепленныв е гнезда хщит а замораживающег о устройств .а Затем стаканы с соломинам и быстр о перенося т в подготовленны е канистры и размещаю т и х в биологич-е ских хранилища хХБ-и 5,0л иХБ-2,0-.1 Многиз еарубежныо ерганизаци ип оискусственномо усеменению и большинств о племпредприяти й Беларус и использую т высокотехнологично е оборудовани( еMINITUB ) дл я маркировк и соломи ,н наполн-е ни я и укупорк и и х стеклянным и шарикам и ил и п о метод у Касс ,у дл я автоматическог о контрол я замораживани я и упаковк и замороженны х соломи .нЗамораживанис епермы баран .аРазбавленнуюс перм уохл-а ждают в течени2 е–д ч 3 о+4...2 � С .Прэ итом флаконы( полиэтиленовы е капельницы ) с о спермо й погружаю т в кювет у с тепло й (22...05 � Св )одо йс итавя в тбытово йхолодильни .кПосл еохлаждени я кювет с уфлаконам и погружаю тт вающи йле дд омоментз аамораживанис япермы. Спермз уамораживаю т н а поверхност и сухог о льд а ил и н а охлажденно йд омину с80 � С фторопластово йпластин .еДл яобеспеченит я-а ко й температуры пластин у посл е охлаждени я в жидком азот е поднимаю т и устанавливаю т с помощью штатив а н а уровн е верхнег о кра я широкогорлогс оосуд ав иыдерживаю т4– 6ми .нПослэ етог в олунк и пластины накапываюс тперм уп 2,0 ом .лКат колькс опермз аатвердее ,т пластин у опускаю т ниж е и выдерживаю т на д поверхностью жидког о азот ан арасстояни и3–с 5мт в ечени е5,1– 0,2миз а ,натем погружаю т н а 1 ми н в жидки й азо .т Посл е окончаниз яамораживани я пластин у извлекаю тиа ззот ас иобираюг транулыа в люминиевыт еубы ил им-е шочк иит зонкоа йлюминиево йфольг .иЕмкост идолжны быт ьпромаркированы .Замороженнуюс перм упомещаю тс восу дДъюар ан а карантиннох ераненин е2 ад 8не.й Замораживани е спермы жеребц.а Дл я замораживани я и длительногх оранени в яжидкома зотс епермр уазбавляю тЛХЦЖ-средо й с добавлением глицерин .а Разбавляю т такж е в соотношени и ,3:1 в оди нприем .Разбавленнуюс перм уобъемом н еболе е10 0м лпр ивысотс елос 5,2 ямк в олбв еыдерживаюх в толодильник ч 2 ез иамораживаю тн аповерхностс иухог ольд аила в илюминиевы хпакета в хпара х жидкога озот .аПрз иамораживани в иформ егранус лперм унанося т каплям ип о 2,0м в ллунк ин аповерхностс ьухог ольдв ;аыдерживаю т т вечени е 5ми ,нпосл ечегг оранулыс обираю т иупаковываюа в тлюминиевыт еубы ил ипластмассовыс етаканы и помещаю т н а хранени е вжидкиа йзо .тВк аждоу йпаковкд еолжнб оыт1 ь25–13г 0рануч ,лт о составляео ткол2 о 5мо лттаяннос йпермы . Пр ииспользованиа илюминиевыт ху( бпакетовз в )ависимост ио т ив хеличиныс пермр уасфасовываю тп2 о 5м лил1 и 3м .лВо боис хлу-
чаят холщин апакетс ас опермо йнд еолжн абытб ьольш е4– 5мм .П-е ре д использованием пакеты охлаждаю ,т а посл е заполнени я спермо й осторожн о вытесняю т и з ни х возду х и концы закатываю т дважды . Пакетыс с опермо йпомещаюс в тпециальныд еержател с ипенопластовым и поплавкам и и перенося т в широкогорлы й сосу д Дьюара . Выдерживаю т в течени е 5– 7 ми н в пара х жидког о азот ,а н а расстояни и 10–1 2ммо е тг оповерхност .иПослэ етог опакеты помещаю в тжидки й азон тх аранени .е Прз иамораживанис ипермы г в иранула х в ипакета х водно йдоз е (125–13г 0рануо ,лди нпакео тбъемом 2 5м лил2 и– 3пакет ап1 о 3мл ) должнс оодержатьсо якол о80 0млс .нперматозоидо а ,впосло еттаив-а ни я– 300–40 0млп .нодвижнык хлето.к .3.7Хранени ,еперевозк аио ттаиваниз еамороженнойс пермы Сосудыд лх яраненис япермы. Замороженнуюс перм ухраня в ту-з когорлыс хосуда хДьюар .аТакис еосудыр азличное ймкост и– 2 ,55 ,0 0 и50 0литро .вИзготовляютс яон ии знержавеющес йтал ,идвустенны .е Пространств омеждс утенкамз иаполняетс я порошково йил ипорошково-вакуумнот йермоизоляцие .йНг аорловинс еосуд аподвешиваютс я металлическик еанистры ил имарлевы емешочк идлс япермы .Крышк а сосуд а имее т пенопластовую втулк ,у котора я размещаетс я г ворловин .е Чтобы температур а спермы в о врем я хранени я н е повышалас ,ь в сосуд елюбогт оип адолжн ооставатьс ян емене е30–40% жидкого за о- т( ао т полно й емкости ,) поэтом у сосу д необходим о регулярн( очере з 30–6с 0уп )тополнята ьзотом . Техник а безопасности при работ е с жидким азотом . Жидки й азо т – прозрачна ,я бесцветна я и легк о испаряющуюс я жидкост ,ь удельныв йее ск 8,0 ек ,л/гипип тр итемператур емину1 с96 � С . Азо тнт еоксичео ,нднакр в оезультат еиспарени я инакопление яг о в помещени и содержани е кислород а в воздух е уменьшаетс ,я чт о можев тызыват ь улюдег йоловнуюб олг ,ьоловокружени ед иаж епотерю сознани .яПр ипопадани ин аоткрыты е участкт иел авызывае тобморожени( еожо.)г Помещени ,е в котором находятс я сосуды Дьюар а ил и стационарных еранилищ с ажидкима зотомд ,олжнб оыто ьборудован оприточновытяжно й естественно й ил и принудительно й вентиляцие .й Курени е в таком помещени и категорическ и запрещаетс .я Температур а жидког о азот аподдерживаетс ян апостоянному ровн( е–196 � Ср в )езультате ег о беспрерывног о испарени .я Поэтом у горловин а сосуд а Дьюар а н е должн абыт ьплотнз оакрыт ,аособенн опр иперевозк .еПерсонал ,ур-а ботающем у с азотом , следуе т закрыват ь горловин у сосуд а Дьюар а крышкам ,и предназначенным и тольк о дл я ни .х Есл и плотн о закрыт ь
