ходимы специально е оборудовани ,е материалы , растворы , инструмен .т Пере д использованием он и должны быт ь соответствующим образом подготовленыб :ытч ьистымс ,иухим ис итерильным .иЭт онеобходим одл япредотвращени яповреждени йилг иибелс иперматозоидо в пр и контакт е спермы с ним .и Подготовк а проводитс я в специальн о оборудованны хпомещения.х Предприяти я п о искусственном у осеменению имею т отдельны е комнаты дл ямыть яс итерилизаци иинструмент ,априборо в ипосуды , которы еиспользуютс япр иполучени ,иобработк е ихраненис ипермы . Стены в эти х комната х облицованы глазурованно й керамическо й плиткоп ,йолыв ыстланы метлахско йплитко .й В моечно й комнат е долже н быт ь водопрово( дхолодна я г иоряча я водт с )арапам идлс ятокв аоды .Пр иотсутстви имагистральногв оодопровод в аней устанавливаюг тазовуюк олонк уилэ илектронагревател ь дл я подогревани я воды . Дл я мыть я искусственны х ваги н размещаю т ванн .уДлр яазмещени яиспользованно й иподготовленно йпосуды н-е обходим о имет ь столы . Шкафы стеклянны е нужны длз яапасны х и-с кусственны хвагис ,нпермоприемнико в идругог оинструмент .аПлат-я но йшкаф необходимд лс япецодежды . В моечнор йазмещают такжс етиральную машин.у Вс терилизационно йкомнат еустанавливаютсс яушильны ешкафы , автоклавы , стерилизаторы , газова я ил и электрическа я плит ,а дистилляторыв одыт ,ермостад тл яподготовленныв хаги.н Дло ябеззараживанив яоздух ап иредметос в втерилизационно йв и о все хпомещения хлабораторик в ,иоторыв хедетс яработс ас опермо ,й т аакж в еманеж еустанавливаютсб яактерицидны елампы – источник и ультрафиолетовыл хуче.й Использованна я ил и нова я посуд ,а инструмен т иматериалы должны быт ь соответствующим образом вымыты и обеззаражены . Новую стеклянную посуд у мою т теплым раствором соды ил и специальным моющим средством т(ип а "Чистоль ,)" удаля я наклеенны е этикетк ,и жировы епятн а идруги емеханическиз еагрязнени .яМою с тпомощью ерш ,а поролон а ил и куск а ваты ил и марл ,и укрепленны х н а деревянны е палочк .и Посл е мыть я посуд у выдерживаю т в течени е суто к ил и боле е в раствор е соляно й кислоты( одн а столова я ложк а дымящейс я кислоты н а 3 л дистиллированно й воды ;) посуд а должн а быт ь полностью погружен а в раство р кислоты . Посл е этог о посуд у тщательн о мою тпроточнов йодо йз иатемо поласкиваю тнесколькр оад зистиллированно й водо й и высушиваю т н а специально й доск е с колышкам.и Посуд а считаетс я хорош о подготовленно ,й есл и н а е е наружно й и внутренне йповерхностп иослс еушк ино естаетс япяте.н Использованную стеклянную посуд у мою т такж е в содовом ра-с твор еилт иеплов йодот ,йщательн оополаскиваю тпроточнов йодо й и затем нескольк ора здистиллированно .йПрс иильномз агрязнени и по-
суды синтетическим и средам и дл я разбавлени я спермы , которы е содержа т желто к ил имолоке ,о епогружаю т вхромовуюс мес ьн а2 4 ч (иногд адостаточн ообработатс ьмесьюв нутреннюю поверхностт в ь-е чени е нескольких мину )т и многократн о промываю т проточно й водопроводно йводоз ,йатемс поласкиваю тдистиллированно йводо й ивысушиваю.т Новы епипетк ис итеклянныт ерубк имою тпроточно йводо й ипомещаюн тс ауткр в иаствос ролянок йислоты .Использованнып еипетк и достаточн овымытв ьодо йт иолькс оильнз оагрязненны емою тхромово й смесью . Кислот у ил и хромовую смес ь наливаю т в высоки й цилинд р в инег опомещаю тпипетк .иЖидкост ьпостепеннз оаполняе ти х просве .т Посл е выдержк и пипетк и тщательн о промываю т проточно й водоз а ,йатем дистиллированно .йВв орем ямытьс яледя ,тчтобыв од а полностью заполнял а просве т пипетк .и Удобн о пользоватьс я специальным ицилиндрамс с иифоном( пипеткомойками )ил иж едистиллированную вод у помещат ь в бутыл ь с патрубком вниз ,у к котором у присоединяюэ тластичную( резиновую ил ии зполимерног оматериал )а трубк у с зажимом . Посл е промывани я пипето к водо й и х поочередн о присоединяют к трубк и епромываюд тистиллированнов йодо .й В современны х лаборатория х обычн о используютс я дозаторы пипеточны е с одноразовым и полиэтиленовым и наконечникам .и В таки х случая хнен теобходимост ииспользованис ятеклянны хпипето.к Новы е издели я и з резины( цилиндры и камеры искусственны х в-а гик ,натетерыд ло ясемененик яобыт ,лрубк и ипробки )моют в теплом 2–3%-ном раствор е соды , затем тщательн о ополаскиваю т проточно й водов и йысушиваю.т Загрязненны ецилиндры мерны е имензурк ,икоторы еиспользую-т с я дл я отмеривани я жидкосте ,й моют тепло й проточно й водо й и ополаскиваюн тесколькр оад зистиллированнов йодо.й Термосд алх яраненис япермы – сосуды Дъюард авр аазг в ао дподвергаю т мойк е и дезинфекци .и Посл е освобождени я и х о т жидког о азот ав иыравниванит яемпературыв нутреннис хтенот с кемпературо й воздух( аотогревани )яи хмою2 т%-нымр аствором натриг яидрокарбонатз ,аатемо поласкивают теплов йодо .йОстаткв иоды удаляю тмарл-е вымс иалфеткам.и Подготовленную чистуюв ысушенную посуд упере диспользованием стерилизую т сухим жаром ил и другим общепринятым способом.
.1.8Приготовлени ерастворо ,вмарлевыс халфеток , ватныт хампоно ,вфильтров
Целз ьанятий :приобрест инавык иприготовлени ярастворо в им-а териало ,в необходимы х дл яработы п оискусственном уосеменению и трансплантациз иародыше.й
Объекты исследований , материалы и оборудование : натри я хлори( дNaC ,)lнатриг яидрокарбона( тNa2HCO3 ,)натри йлимонноки-с лый трехзамещенны й двухводны й (Na3C 6H 5O 7� 2H 2O ;) спиртректифика ,т фурацили ,н кали й двухромовокислы ,й серна я кислот ,а дистиллированна я вод ;а стеклянна я посуд а (флаконы емкостью 10 0 м ,лмерны ецилиндры н1 а02 ,05 05 и0 0м ,лмернык еолбы н2 а55 ,00 0 1 и00 0м ,лколбыс теклянны ен5 а1 ,002 ,055 ,00 01 и00 0млт ;)ампонницы с притертым и крышкам ,и баночк и н а 10 0 м л с притертым и пробкамс ,итеклянныв еоронкс ,итеклянны епалочки ;марлг ,яигроскопическа яват ,абумаг афильтровальна я ипергаментна ;яножницы прямыв ;еесы аналитически еилл иабораторныв ,еесыа птечныр с еазнов-е сомс ,пиртометры ;магнитна ямешалка ;автокла ,вмембранны ефиль-т ры4,0 5мкмг ;азоваи ялэ илектрическа яплит.а Методически е указания . Заняти я проводятс я в лаборатори и к-а федры ил и учебном пункт е искусственног о осеменени .я Сначал а студенты знакомятс я с правилам и приготовлени я растворо ,в тампоно ,в марлевы х салфетоз ,катем самостоятельнг оотовя т оди н и з растворо в илс иалфеткт ,иампоны ,фильтры .Целесообразнс отудентамр аботат ь парам .и Приготовлени ефизиологическог ораствор .а Нужно еколичеств о дистиллированно( йочищенной ) воды отмериваю т цилиндром и пер-е ливаю в тконическую колб .уНв аеса хотвешиваю тхимическ ичисты й натри йхлори ди зрасчет а г 9,0н а10 0мв лоды ипомещаю в тколб с у водо .йЕсл инатри яхлори драсфасоват в наблетка хпт ,г 9,0 о онк аажды1 е0 0мв лодыб еруо тднт уаблетк .уКолбз уакрываю тпергаментно й бумаго ,йпомешиваю тд ополног орастворени янавеск и иподогреваю т дк оипени .яВместд оистиллированнов йоды можни оспользоватв ьод у очищенную , приготовленную путем фильтровани я вбытовы хочистителяв ходопроводнов йоды .Готовяр таствое ржедневн.о Применяю тфизиологически йраство рдл япромывани явнутренне й поверхност и инструмент а дл я осеменени ,я обеззараженног о 70%-ным спиртомс( теклянны е шприцы-катетеры и микрошприцы ,) резиновог о катетер а дл я осеменени я кобы л посл е стерилизаци и кипячением , увлажнени явлагалищногз оеркал а илс итеклянног орасширителт а ,яакжп еро иценкк еачествс апермы. Приготовлени е 70%-ног о спирт.а Дл я приготовлени я 10 0 м л 70%-ног оспирт в амерны йцилинд рналиваюд тистиллированнов йоды 7 3 м л и добавляю т д о метк и (2 7 мл ) 96%-ног о спирт а этиловог о с(пирта-ректификат .)а Расче т дл я приготовлени я спирт а проводя т п о формуле
96% – 10 07 0· 100
70% – х х = ----------------- =7 8,2
9 6
