Для гистологических исследований достаточно кусочков ткани толщиной 5 мм. Если предполагается проводить послойное исследование, то величина пробы не должна превышать размер столика (рисунок 4.1.5) для замораживающего микротома или кассеты для заливки в парафин (рисунок 4.1.6). Необходимо учитывать, что сложно сделать срез с пробы тканей, если она слишком велика или если она состоит из тканей, значительно различающихся по плотности (в этом случае срез получится неоднородным по толщине и будет сворачиваться на стекле).
Рисунок 4.1.5 - Столик для замораживающего Рисунок 4.1.6 - Кассеты для заливки в парафин микротома фирмы MICROM Перед началом исследований необходимо четко представлять, какие ткани копытец будут исследоваться и какими методами. От этого будет зависеть как отбор проб, так и фиксация тканей. Необходимо учитывать положение в копытце тканей, которые будут отбираться для исследований. Для этого кусочек нужно вырезать в форме, например, неравнобедренной трапеции (рисунок 4.1.7), основание которой будет направлено к подошве копытца, верхушка - к венчику, а скошенная сторона будет соответствовать передней копытцевой стенке. а - направление роста роговых трубочек; 1 - поперечный срез сосочкового слоя дермы; 2 - продольный срез сосочкового слоя дермы Рисунок 4.1.7 - Сагиттальный распил медиального пальца коровы. Форма проб при отборе тканей разных частей пальца
Например, при исследовании дермы нужно помнить, что в дерме подош
вы сосочки идут практически перпендикулярно к поверхности опоры, несколько
наклоняясь в сторону зацепа, а на копытцевой стенке - под острым углом к за
цепу (рисунок 4.1.8).
Sectio paramediana
Dermis limfci
(PapiUae Oermaies Imtsij — •
Epidermis limbn— —
Dermis corof'ae
(Papdlae derma les coronaaj—
Ж w
^ шЖ?л
E p id e rm is ы н о ^ я е — — -----------— -№ш ЛИМИТ >.
/вшвят . AJ
РарМ^эе o e rm a io s
g a ie a re s p ro x tm a le s ----------- — — —
ЖШ'ШШ:, 1
l ! 1 — Dermis panels
T i'
] (L a meiiae d em al cs
Jjy W r panels)
Ш /'Ш
< j - — Papillae dermal as
f>ap:|iae dermaies
galea res di stales — — -** — ------ * f psnelis iefmina.es
f l i t ' ’ / . f ' i Derm m soieae
.■/' (P a p illa e tfe rm a tes (Papillae
E.puderrpis pariens — ■— ^ ■ . J j f so.eae)
i i
Ш В А
t
Im m iM
ш д .
РЕПОЗИТОРИЙ УО ВГАВМ
Учитывать положение в копытце тканей, которые будут отбираться для ис
следований, необходимо для удобства дальнейшего приготовления и микроскопи-
рования гистопрепаратов. То есть на столике для резки отобранная проба будет располагаться с учетом желаемого продольного (рисунок 4.1.9) или поперечного (рисунок 4.1.10) среза тканей или роговых трубочек. 1 - роговой слой; 2 - сосочковый слой дермы; 3 - сетчатый слой дермы Рисунок 4.1.9 - Микрофото. Эпидермис и дерма (продольный срез) стенки копытца с отросшим рогом. Окраска по Маллори. Х-125 Рисунок 4.1.10 - Микрофото. Поперечный срез сосочков дермы копытца с отросшим рогом. Окраска гематоксилин-эозином. Х-250
4.2. Методы фиксации тканей
Фиксация - метод обработки ткани с целью закрепления ее прижизненной структуры. Сущность фиксации заключается в том, чтобы сохранить взятые кусочки тканей от гниения и процессов аутолиза, изменяющих их структуру. Недостаточно зафиксированный или излишне обезвоженный препарат, как правило, не
