При проведении 6-го опыта из числа коров с длительным бесплодием (неоднократно осемененных, не имеющих клинических признаков гинекологических заболеваний) отобрали 45 коров и сформировали по принципу аналогов III группы, по 15 голов в каждой. Животные I группы служили контролем, аналогам других групп через 1–2 часа после осеменения в период одной охоты вводили в шейку матки по 5 мл биосана, используемого для повышения репродуктивной функции коров (А. Шубин, А. Шубина, Н. Гущин, 1996) (II группа) и лактобактерина (III группа).
Перед постановкой опыта изучалось состояние воспроизводительных функций коров хозяйства, их рост, развитие и молочная продуктивность в условиях повышенного содержания тяжелых металлов в организме.
Кормление животных проводили, исходя из детализированных норм кормления, кормами, имеющимися в хозяйстве, а недостаток отдельных микроэлементов восполняли дачей соответствующих солей (А.П. Калашников и др., 2003).
Для определения влияния кормового фактора на эколого-физиологический статус коров изучали химический состав кормов в хозяйстве по методике Н.И. Дрозденко и др. (Н.И. Дрозденко и др., 1981).
В качестве показателей, характеризующих воспроизводительные качества коров, выступали время проявления первой охоты после родов у коров, оплодотворяемость по месяцам ее возникновения, а также в порядке очередности половых циклов. Также учитывали количество покрытий на одно оплодотворение, продолжительность стельности, родов, выделения последа и сервис-периода.
Коровам всех групп перед осеменением проводили массаж матки и яичников по 3–5 минут и внутримышечно вводили бицилин – 3 в дозе 10 тыс ЕД на 1 кг живой массы для профилактики инфекционного агента.
По случаям повторной охоты коров после установления стельности регистри ровали эмбриональную смертность.
Последующие после стимуляции роды у коров проходили в родильном отделении, куда их переводили за 2 недели до отела. Наблюдения за животными вели круглосуточно с периода максимального проявления предвестников родов до отделения последа.
Оценка родового процесса проводилась по 5-балльной шкале, которая устанавливалась по мере снижения частоты дистоций, т.е. затрудненных родов.
С учетом того, что наступление доминанты лактации (когда основные физиолого-биохимические функции организма коров в основном направлены на молокообразование) и нормативная продолжительность сервис-периода совпадают и приходятся на 90-й день после отела, в этот срок провели ряд морфологических и биохимических исследований.
Влияние техногенного фактора на половую активность коров оценивали по содержанию тяжелых металлов в крови и молоке на атомном спектрографе; по активности щелочной фосфатазы в крови и фолликулярной жидкости в соответствии с методикой Боданского; по содержанию гормона прогестерона в крови и фолликулярной жидкости – радиоиммунологическим методом.
Гематологические показатели у исследуемых животных (4-й опыт) определяли до введения препаратов, затем – на 2-й, 5-й и 10-й дни после начала эксперимента.
Для характеристики физиологического и биохимического статуса коров в разные периоды воспроизводительной функции: в 210-й и 240-й день стельности, за 3 дня до родов, во время родов, в стадии полового возбуждения, половой охоты и через 20 дней после родов (5-й опыт), полового возбуждения, половой охоты и через 20 дней после родов (6-й опыт) проводили анализ крови для определения эритроцитов и лейкоцитов путем подсчета в камере Горяева, гемоглобина – по Сали, общий белок – рефрактометрически, его фракции – методом электрофореза на бумаге (П.С. Ионов и др., 1957).
Состояние иммунной системы, являющейся одним из индикаторных показателей вредного воздействия на организм факторов внешней среды, определяли в периоды воспроизводительных функций: за 1–3 дня до отела и во время родов.
Для выявления резистентности коров определяли бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) по О.В. Смирновой, Т.А. Кузыкиной (1966), лизоцимную активность (ЛАСК) – по В.Т. Дорофейчук (1968), фагоцитарную активность (ФА) – по В.Ф. Матусевичу (1970), фагоцитарный индекс нейтрофилов (ФИ) – по С.И. Плященко, В.Т. Сидорову (1979), количество Т- и В-лимфоцитов – по В.В. Дмитриенко, В.В. Новикову (1988), сывороточные иммуноглобулины IgM, IgG и IgA – по В.Н. Чеботкевичу, С.И. Лютинскому (1998).
В связи с тем, что воспроизводительные и продуктивные качества коров тесно связаны между собой, определяли молочную продуктивность путем проведения контрольного учета молока один раз в месяц с определением процентного содержания жира в молоке, как одного из главных показателей качества молока, а также количество молочного жира и коэффициент молочности.
Для установления характера лактационной деятельности коров вычерчивали лактационные кривые в связи с использованием различных препаратов.
На основании данных воспроизводительных функций устанавливали экономическую эффективность применения разных препаратов согласно методике А.С. Митюкова и З.И. Эскелевой (1988).
На рис. 1 приводится общая схема исследований.
Основной цифровой материал подвергался статистической обработке с установлением уровня вероятности (Е.К. Меркурьева, 1970).
