Количество лейкоцитов у коров с субинволюцией матки отличается от здоровых незначительно, в то время как при гнойно-катаральных эндометритах этот показатель выше на 5,87% до и 10,1% после родов (Багманов М.А., Мухаметгалиев Р.Н., 2001).
По данным Пикаловой Т.А. с соавт. (1988), проводившими исследования проб крови от беременных коров, начиная с 5-го месяца беременности и до родов, у животных с физиологическим течением родов и послеродового периода на 5-м месяце беременности количество лейкоцитов составляло 9,7±1,1х109 /л, к шестому месяцу оно снижалось до 6,6±0,3х109 /л и постепенно повышалось к девятому месяцу до 9,1±0,1х109 /л. У животных с патологией родов и послеродового периода отмечалось более низкое содержание лейкоцитов на 8-м и 9-м месяцах беременности, соответственно 5,7±0,3 и 6,6±0,2х109 /л. Содержание эритроцитов и гемоглобина у коров с родовой и послеродовой патологией на 9-м месяце беременности также было ниже – 5,6±0,1 против 6,2±0,1х1012 /л и 93±5,7 против 104±3,1 г/л. В лейкоформуле у коров по мере увеличения сроков физиологически протекающей беременности отмечалось повышение содержания эозинофилов с 11,5±0,8 до 16,2±1,1%. Остальные показатели достоверно не изменялись, в то же время у коров с патологией родов и послеродового периода по сравнению со здоровыми животными на всем протяжении исследований относительное содержание лимфоцитов было ниже (на 4-8%) на фоне повышения количества палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов (2-4%).
Результаты исследований, проведенных В.И. Слободяником (1994), свидетельствуют, что у коров в середине и конце лактации (3-7 месяцы беременности) количество лейкоцитов в крови остается стабильным, а в начале снижается на 29,1%, что автор обусловливает перераспределением их из кровяного русла в репродуктивные органы во время и после родов, для обеспечения нормального протекания инволюционных процессов. Наряду с этим в начале лактации была отмечена активизация гемопоэза и изменение содержания форменных элементов в крови (простая регенерация нейтрофилов и моноцитов).
К важнейшим факторам специфической и неспецифической защиты организма животных относится фагоцитоз - способность к активному захвату и внутриклеточному перевариванию микробов и
других посторонних для организма частиц (Мечников И.И., 1951). Фагоцитарная активность лейкоцитов, в частности нейтрофилов, их количественные и качественные изменения зависят от вида, пола и возраста животных, индивидуальных особенностей организма, состояния его здоровья, типа высшей нервной деятельности. При этом лейкоциты играют большую роль и в процессах размножения животных.
Исследованиями А.А. Сысоева и Г.Н. Григорова (1973, 1974) установлено, что в период охоты фагоцитарная активность нейтрофилов находилась на относительно высоком уровне и составляла 65,3±3,6%, тогда как первая треть стельности сопровождалась его снижением до 47,05-52,8%. С третьего по седьмой месяц беременности авторы отмечали повышение фагоцитарной активности до 60,964,8%, к восьмому месяцу она снизилась до 54,05±3,0%, а затем повышалась и достигала в момент отела максимального уровня (66,7±2,6%).
По данным А.Г. Нежданова (1981), фагоцитарная активность лейкоцитов перед родами более выражена у животных, предрасположенных к патологии послеродового периода (63,2±6,13 против 45,0±6,45 у здоровых коров или выше на 40,4%). В послеродовой период автором было отмечено снижение процента фагоцитировавших лейкоцитов у больных животных до 48,0±6,15%, что на 6,8% ниже клинически здоровых коров, а также фагоцитарного числа на 12,3% и фагоцитарного индекса на 29,7%.
Аналогичные изменения данных показателей установлены Р.Ч. Моцкалюнасом (1988) – более высокая фагоцитарная активность нейтрофилов в предродовой период отмечена у коров, предрасположенных к развитию акушерской патологии (53,5±2,6 против 46,7±3,1%), а в послеродовой - у здоровых (на второй неделе- 58,5±2,5 против 45,5±2,6%). С развитием воспаления матки отмечено снижение и фагоцитарного индекса - 2,9±0,2 против 3,5±0,3.
Одним из важнейших компонентов гуморальной защиты являются иммуноглобулины сыворотки крови, способные вступать в реакцию с веществами, вызвавшими их образование – антигенами. Образование иммуноглобулинов происходит в плазматических клетках (В-лимфоциты) под воздействием антигенной стимуляции. По своей структуре Ig относятся к белкам гамма-глобулиновой фрак-
ции, измененным в процессе синтеза воздействием антигенов (Сысоев А.А., 1978).
Сысоев А.А. (1978) при исследовании гуморальных механизмов защиты у коров в разные периоды половой функции отметил высокий уровень иммуноглобулинов в период осеменения (68±2,7 ед.), который снижался в первый месяц стельности до 30±1,4 ед., а затем повышался и достигал к концу беременности 92,5±3,0 ед.
А.Г. Нежданов (1981) отметил, что у коров с патологией родов и послеродового периода в последние дни беременности выявляется более высокий уровень иммуноглобулинов (46,8±3,39 ед. против 41,1±4,03 ед., выше на 13,9%), разница в содержании которых в родах достигает 21,0% (45,1±2,91 против 37,7±2,90 ед.).
Исследования М.А. Багманова, Р.Н. Мухаметгалиева (2001) показали, что у коров с субинволюцией матки содержание иммуноглобулинов А, М, G было ниже на 6,38%, 10,76 и 10,9% соответственно до родов и на 12,72%, 24,47 и 17,13% после родов. При эндометритах содержание иммуноглобулинов А, М, G было также ниже, чем у клинически здоровых животных, и эта разница составляла до родов 3,97%, 6,46 и 11,56% соответственно и после родов 20,12%, 16,7 и 18,87% (Р<0,05).
Изучая содержание отдельных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови на протяжении лактации, В.И. Слободяник (1994) выявил возрастание Ig G на 43,5% в конце лактации по сравнению с серединой и их снижение на 25,8% после отела, что автор объяснил активным транспортом Ig G в молочную железу в качестве защитного фактора для новорожденных. При этом не было отмечено изменений в концентрации Ig М при различных функциональных состояниях молочной железы.
Основанием для изучения циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови послужило признание того, что в развитии многих воспалительных процессов немаловажное значение имеют иммунокомплексные повреждения (Первиков Ю.В., Эльберт Л.Б., 1984; Стручков П.В. и др., 1985). Известно, что образование иммунного комплекса (ИК) антиген-антитело является реакцией, способствующей элиминации попавших в организм эндогенных антигенов. Но в ряде случаев, особенно при нарушении функции системы фагоцитирующих мононуклеаров, удаление ИК из организма задержива-
ется, что создает предпосылки для проявления патогенного эффекта ИК, в основе которого лежит повреждение базальной мембраны сосудистой стенки (Белозеров Е.С., Макарова Т.А., 1982). К наиболее патогенным ИК относятся ИК среднего и малого размера, способные фиксировать комплемент. Эти ИК, взаимодействуя со свертывающей, калликреин-кининовой и другими регуляторными системами организма, вызывают развитие реакции повреждения. Крупные ИК, как правило, быстро элиминируются из циркуляторного русла. В настоящее время разработан достаточно простой и информативный метод преципитации ИК полиэтиленгликолем (ПЭГ-6000), который дает возможность оценить концентрацию ИК и их размеры.
По данным А.Д. Исаевой с соавт. (1986), в конце физиологически протекающей беременности содержание ЦИК в крови женщин возрастает и достигает максимальных значений за несколько суток до родов, что свидетельствует о выраженности иммунологических перестроек в системе мать-плацента-плод, определяющих наряду с другими регуляторными механизмами начало родовой деятельности. В околоплодных водах ЦИК не обнаруживались. При переношенной беременности по мере увеличения сроков перенашивания и приближения родов авторами не выявлено изменения содержания ЦИК в сыворотке крови, в то же время отмечено повышение их уровня в амниотической жидкости, что свидетельствует о недостаточности гуморальных факторов иммунитета при переношенной беременности и развитии плацентарной недостаточности.
По данным Л.К. Фавлеевой (1987), при физиологически протекающей беременности изосенсибилизация в системе мать-плод обеспечивается, в основном, тканевыми структурами плаценты с малой молекулярной массой. При позднем токсикозе беременных изосенсибилизация более выражена, причем структурами плаценты с большей молекулярной массой (более 100000), что обусловлено повышенной проницаемостью плацентарного барьера, и свидетельствует о вовлечении в иммунологические процессы качественно других органоспецифических антигенов. Об участии в иммунологических процессах при позднем токсикозе беременных антиплацентарных антител свидетельствует также выраженная связь их титра с уровнем ЦИК, изменение иммуноглобулинового спектра сыворотки крови в виде повышения уровня общих Ig Е, снижения уровня Ig G
соответственно тяжести токсикоза. Наличие у новорожденных Ig A и Ig M свидетельствует о внутриутробной антигенной стимуляции плода при позднем токсикозе матери.
Исследования В.И. Слободяника (1994) показали, что концентрация ЦИК в крови и их размер подвержены значительным изменениям в зависимости от функционального состояния молочной железы. Так, в конце лактации (7-й месяц беременности) концентрация ЦИК существенно не изменяется по сравнению с серединой, однако их размер уменьшается на 33,6%, что автор связывает со значительным наличием в крови гетерогенных аутоантигенов, образовавшихся в результате деструктивных изменений в молочной железе и быстрым их взаимодействием с иммуноглобулинами. В начале лактации концентрация ЦИК и их размер значительно снижаются, возрастая к середине лактации (3-5 месяцев беременности) в результате физиологической стабилизации антигенного раздражения иммунокомпетентных клеток при нормальном формировании лактогенной функции и умеренной выработки иммуноглобулинов.
Таким образом, уровень иммунобиологической реактивности организма тесно связан с его воспроизводительной способностью. Иммунологические расстройства в различные периоды воспроизводительной функции в конечном итоге приводят к бесплодию, патологии беременности, родов и послеродового периода, в связи с чем возникает необходимость коррекции иммунобиологической реактивности организма животных.
Повышение воспроизводительной функции коров на фоне коррекции иммунобиологической реактивности организма
Необходимость стимуляции иммунных реакций вызвана у сельскохозяйственных животных различными проявлениями иммунодефицита. Развитие иммунологической недостаточности может быть связано с различными нарушениями иммунологического равновесия: уменьшением количества иммунокомпетентных клеток, нарушением их дифференциации и кооперации, изменением активности различных субпопуляций, угнетением процессов фагоцитоза и т.д. (Wood С.В., 1977; Hobbs J.R., 1984; Поздеев О.К., 1998). А.Т. Семенюта (1981, 1983), А.В. Селиванов и др. (1984) также отмечают, что многие заболевания сельскохозяйственных животных имеют в своей основе врож-
денные или приобретенные дефекты иммунной системы.
С.С. Абрамов, И.Г. Арестов, И.М. Карпуть (1990) указывают, что иммунные дефициты у животных (иммунная недостаточность) характеризуются тем, что организм не в состоянии реагировать полноценным иммунным ответом на чужеродные антигены. Авторы считают, что иммунные дефициты бывают врожденные (первичные), возрастные (физиологические) и приобретенные (вторичные).
В последнее десятилетие формируется новое направление в фармакологии – иммунофармакология. Ее основной задачей является фармакологическая коррекция нарушений иммунной системы с применением иммуноактивных средств, направленных на стимуляцию или угнетение функции клеток, участвующих в иммунном ответе.
Применение средств неспецифической стимулирующей терапии – иммуномодуляторов – направлено на повышение воспроизводительной функции у животных.
Иммуномодуляторы – это лекарственные средства, обладающие иммунотропной активностью, которые в терапевтических дозах восстанавливают функции иммунной системы (эффективную иммунную защиту) (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2000).
Профилактическая эффективность иммуномодуляторов в целях повышения воспроизводительной функции самок, особенно у коров, изучена недостаточно, хотя имеющиеся публикации показывают перспективность этого направления исследований.
Б.Т. Артемов, Л.И. Ефанова, Т.Е. Соловьева (1994) изучили эффективность иммунокоррекции глубокостельных коров с помощью нуклеината натрия. Препарат вводился за 30-45 дней до родов двумя курсами с 10-дневным перерывом. Курс включал две внутримышечные инъекции с интервалом в 72 часа 10-процентного водного раствора (500 мг) нуклеината натрия. В ходе проведения исследований было установлено, что у подопытных коров на 11,4% повысился уровень лейкоцитов за счет лимфоцитов, при этом повышался уровень как Т-лимфоцитов, так и В-лимфоцитов, а также фагоцитарная активность нейтрофилов.
М.Ф. Васильев (1996) рекомендует с целью коррекции иммунодефицита у стельных коров и повышения резистентности родившихся от них телят вводить один из иммуномодуляторов: лейкоген, тимоспленин, тималин.
