важная роль принадлежит макрофагу (Coleman D.L., 1986). Макрофаги принимают активное участие в процессе антителообразования, вступая в кооперацию с Т- и В-клетками. И.Я. Учитель (1978), Шевак Итан М. (1987) указывают на большую роль макрофагов, фагоцитирующих и перерабатывающих антигенный материал с последующей передачей их лимфоцитам. Макрофаги преобразуются из моноцитов и содержат различные рецепторы: Fc для JgG и JgE для С3компонента комплемента, гистамина, лимфокинов и лимфоцитов (Nathan C.F. et al., 1980; Kurlander R.J., Batker J., 1982).
Нейтрофилы являются одним из главных источников ферментов, ответственных за повреждение тканей при воспалительных процессах. Эти клетки выделяют вещества не только вызывающие, но и тормозящие воспалительную реакцию, в частности гистаминазу (Беклемишев Н.Д., 1986). Наряду с осуществлением своей главной функции фагоцитоза нейтрофилы принимают участие в специфическом звене киллерного эффекта. Функции нейтрофилов тесно связаны с антителами, с системой комплемента, эозинофилами, базофилами. Нейтрофилы вместе с макрофагами образуют ретикулоэндотелиальную систему организма (Грин Н. с соавт., 1990).
Основная функция эозинофилов, базофилов и тучных клеток – участие в развитии иммунитета. Эозинофилы играют важную роль в реализации как клеточного, так и гуморального иммунного процесса, имея рецепторы к иммуноглобулинам различных классов и компонентам комплемента, им свойственен фагоцитоз. Базофилы играют важную роль в реакциях клеточного иммунитета (Йегер Л., 1990).
Н.Д. Беклемишев (1986) указывает на функциональную значимость базофилов и тучных клеток (тканевых базофилов) заключающуюся в том, что в них образуется, накапливается и высвобождается ряд биологически активных веществ.
К гуморальным факторам защиты организма относят комплемент, который представляет собой совокупность факторов крови, тесно связанных с иммунной системой, обеспечивающих неспецифическую защиту организма от бактерий, вирусов, простейших, паразитов (Ломакин М.С., 1990). Это терминальная система, состоящая из девяти компонентов, включающих 11 протеинов, которые составляют 5-10% общего количества сывороточных белков ( α , β , γ ), преимущественно β -глобулинов, участвует в разнообразных им-
мунологических реакциях (гемолиз, бактериолиз, фагоцитоз) (Кашкин К.П., Кубась В.Г., 1981; Шляхов Э.Н., Андриеш Л.П., 1985). Комплемент может быть активирован спонтанно патогенами (альтеративный путь активации) или антителами, связывающими патоген (классический путь активации). В результате этой активации либо образуется «комплекс клеточной атаки», приводящий к гибели патогенов, либо чужеродное тело опсонизируется белками комплемента, что облегчает удаление патогена путем фагоцитоза. Активированные компоненты комплемента действуют в определенном порядке – в виде каскада ферментов; при этом продукт предшествующей реакции служит катализатором для включения в последующую реакцию компонента и субкомпонента (Ройт А., 1991). Ключевыми являются два фермента – С3-конвертаза и С5-конвертаза. После расщепления ими С3 и С5 компонентов комплемента образуется ряд их фрагментов, обладающих биологической активностью. Так, С3а, С4а и С5а являются пептидными медиаторами воспаления, а С3в является фактором, «прилипающим» к поверхности микробной клетки и вызывающим активацию альтеративного пути комплемента. Эффекторным звеном классического и альтеративного пути активации комплемента является комплекс белков (С5в, С6, С7, С8, С9), который вызывает гибель патогена. Функции компонентов комплемента и их фрагментов многочисленны. Одни из них участвуют в непосредственном киллинге внеклеточных паразитов, другие усиливают воспалительные реакции, в которые вовлекаются гранулоциты и моноциты. Опсонизация бактерий фрагментами комплемента ускоряет элиминацию патогена.
К врожденным факторам защиты организма относится лизоцим (Плецитный Д.Ф., 1972; Емельяненко П.А., 1987). Лизоцим – это фермент мурамидаза (Ермольева Е.В., Вейсберг Г.Е., 1976). В основе влияния его на микробную клетку лежит разрушение пептидополисахаридов клеточных стенок бактерий. Синтезируется и высвобождается лизоцим в моноцитах и макрофагах. Нейтрофилы, отличающиеся более высоким содержанием лизоцима, освобождают его лишь при дегрануляции. Установлено, что очень важным свойством лизоцима является его способность стимулировать фагоцитоз, агглютинацию бактерий, усиливать восприимчивость микробных клеток к другим агентам, например антибиотикам. Д.Ф. Плецитный (1963) выяснил
влияние лизоцима на иммунитет у животных.
К показателям, отражающим состояние гуморального иммунитета, относят гетерофильные агглютинины. Гетерофильные агглютинины относятся к группе так называемых нормальных антител и являются компонентом сыворотки крови (иммуноглобулины). Образуются агглютинины в результате спонтанной иммунизации антигенами, которые широко распространены в природе. Повседневно, сталкиваясь с антигенами в крови животного, образуются соответствующие антитела. В нормальных условиях естественные антитела содержатся в низких титрах. Однако при определенных патологических состояниях, сопровождающихся нарушением обменных процессов, повышенным уровнем эндогенных веществ или их метаболитов, происходит индукция иммунологических механизмов, приводящая к повышению уровня нормальных антител (Мягкова М.А. с соавт., 1999). В современном представлении защитная роль антител заключается в том, что, соединяясь с антигеном, они изменяют его, переводя в неактивное состояние, и таким образом дают возможность действовать неспецифическим факторам защиты.
Иммунный ответ осуществляется как путем непосредственного контакта между клетками-участниками иммунного ответа, так и гуморальным путем. Гуморальное звено регуляции обеспечивается олигопептидами, получившими название «цитокины». Они являются регуляторами многих функций лимфоцитов, акцессорных и стволовых клеток. В основе механизма их действия лежит свойство вызывать дифференцировку, пролиферацию или гибель клеток. Цитокины представлены семействами пептидов, называемых интерлейкинами, интерферонами, факторами некроза опухолей, трансформирующими факторами роста, колониестимулирующими факторами. Интерлейкины осуществляют гуморальную связь между макрофагами и лимфоцитами, а также с другими клетками организма; интерфероны – естественную защиту организма от вирусов; колониестимулирующие факторы способствуют продукции форменных элементов крови; факторы некроза опухолей обладают противовоспалительными, иммуностимулирующими и гемопоэтическими свойствами; факторы, трансформирующие рост клеток, характеризуются противовоспалительным действием, участвуют в качестве ингибиторов антителообразования и дифференцировки цитотоксических
клеток. В процессе иммунного ответа цитокины начинают продуцироваться клетками только в ответ на антиген (Галактионов В.Г., 1998).
Таким образом, в создании иммунитета участвует весь организм как целая система, защитные механизмы которого взаимосвязаны и взаимообусловлены в этих функциях. Наряду с факторами специфической защиты (антитела, сенсибилизированные иммунокомпетентные клетки) действуют многочисленные неспецифические факторы и механизмы: кожно-слизистые и гематогенные (лимфатический и кровеносный) барьеры, лизоцим, комплемент, цитокины и фагоцитоз.
Взаимосвязь показателей иммунобиологической реактивности организма животных c их воспроизводительной функцией
Состояние здоровья животных в значительной мере определяется уровнем их иммунобиологической реактивности, которая у самок варьирует в зависимости от их физиологического состояния, связанного с воспроизводительной функцией (Сысоев А.А., 1978; Семенюта А.Т., 1981; Селиванов А.В. и др., 1984; Денисенко В.Н. и др., 1987; Гугушвили Н.Н., 2000 и другие).
Изучение иммунобиологической реактивности организма животных в различные стадии их репродуктивной деятельности позволяет выявить критические периоды с целью корректирования иммунобиологического статуса.
Скопец Б.Г. (1988), изучая активность клеточных иммунных реакций методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК) в модификации Бронской и др. (1980), а также в кожной пробе с фитогемагглютинином, заметил, что отклонения от активности клеточного звена иммунной системы от средних величин как в сторону повышения, так и понижения через 1-2 месяца после отела (то есть в период, предшествующий осеменению), наблюдаемые в обеих реакциях у 20-30% коров, совпадают со значительным удлинением продолжительности бесплодия (20-40 дней).
Как свидетельствуют исследования Е.П. Кота с соавт. (1986), показатели Т- и В-клеточного иммунитета у коров и телок находятся в определенной взаимосвязи с их воспроизводительной функцией.
Проявление половой охоты у коров и телок сопровождается повышением у них количества лейкоцитов и циркулирующей крови, а процент лимфоцитов, относительное и абсолютное число среди них Т- и В-лимфоцитов, наоборот, снижается.
По данным И.М. Грязновой с соавт. (1987), у женщин с физиологически протекающей беременностью показатели клеточного иммунитета претерпевают циклические изменения. При сроках беременности до 8 недель активность ЕК (естественные клетки-киллеры, обладающие способностью лизировать клетки опухолевых линий без предварительной сенсибилизации) значительно снижена. В период с 9 по 16 нед. отмечается некоторое ее восстановление, а во 2 и 3 триместрах она постепенно снижается вплоть до 36-й недели, статистически достоверно отличаясь от контроля. Аналогичные изменения претерпевают и количественные показатели Т-лимфоцитов. С 36 недели их количество начинает увеличиваться и к родам достигает цифр, характерных для небеременных женщин. Относительное количество и абсолютное число В-лимфоцитов и «нулевых» лимфоцитов в динамике физиологической беременности изменяются мало. На основании этого автор делает вывод, что снижение показателей клеточного иммунитета при физиологически протекающей беременности совпадает с критическими периодами развития плода и, по всей вероятности, направлено на предотвращение реакций отторжения фетоплацентарного комплекса.
Аналогичные изменения показателей клеточного иммунитета в динамике физиологически протекающей беременности отмечены и Л.В. Тимошенко с соавт. (1989).
По данным Р.М. Васильева (2001), процентное содержание Т- и В-лимфоцитов до и после родов у коров достоверно не изменялось. Так, за 3 дня до родов показатели Т-лимфоцитов составляли 39,95±1,24%, а через сутки после них - 43,15±1,25% (Р>0,05). Процент В-лимфоцитов соответственно равнялся 18,7±1,02 и 17,6±0,9 (Р<0,05).
Иным было абсолютное содержание субпопуляций лимфоцитов, так число Т-лимфоцитов до отела составляло 1,95±0,1 Г/л, а после него уменьшалось до 1,6±0,09 Г/л (Р<0,05). Что касается В-лимфоцитов, то их количество, хотя и имело тенденцию к снижению, но было статистически недостоверным.
Н.Б. Кукушкин с соавт. (1999) предполагают, что в периферической крови количество Т-лимфоцитов повышается преимущественно за счет Т-хелперов. Данная популяция лимфоцитов имеет важное значение в формировании иммунного ответа организма на антигенную стимуляцию бурно развивающейся микрофлоры матки. На ранних стадиях воспаления эндометрия Т-хелперы способствуют распознаванию чужеродных антигенов бактерий и индуцируют трансформацию В-лимфоцитов в плазматические клетки, синтезирующие антитела. Позднее роль данных клеток в формировании иммунного ответа ослабевает, и их уровень в крови постепенно снижается до нормы.
При угрозе прерывания беременности у женщин О.К. Баргесян и Н.Ю. Сотникова (1989) установили следующую динамику показателей клеточного и гуморального иммунитета: в первом триместре отмечалось повышение содержания лейкоцитов, лимфоцитов, абсолютного содержания Т- и О-лимфоцитов, снижение относительного содержания В-лимфоцитов. Содержание иммуноглобулинов достоверно не изменялось. Во втором триместре наблюдалось снижение абсолютного и относительного количества Т-лимфоцитов, Ig G b; Ig A, повышение абсолютного и относительного содержания О-клеток.
Исследования, проведенные В.Н. Серовым и др. (1986), позволили установить, что у женщин при нормальном течении беременности к концу 3-го триместра отмечается тенденция к восстановлению иммунобиологической реактивности до уровня небеременных. Абсолютное количество и функциональная активность иммунокомпетентных клеток возрастают, соотношение их субпопуляций восстанавливается. Отсутствие данных изменений у беременных, по мнению автора, может осложнять период родоразрешения и послеродовой период.
А.А. Сысоев, М.П. Рязанский (1971) отметили, что количество лейкоцитов в крови коров во время охоты находится в пределах 7,72±0,10х109 /л, затем в динамике развития беременности оно снижается до 7,04±0,10х109 /л на 6-м месяце беременности и возрастает к моменту отела до 8,57±0,10 х109 /л. При этом в крови коров в первой половине стельности отмечается увеличение процентного содержания лимфоцитов с 60,4% до 63,2% и их снижение к моменту отела до 51,3%.
