ных влияют на течение беременности и другие факторы, которые негативно сказываются на эмбриональном периоде. Критическим периодом в развитии эмбрионов является срок от разрыва у них прозрачной оболочки до перехода их на плацентарный тип питания. В этот период гибнет значительное количество зародышей по причине губительного действия иммунных тел матери. Иммунная система матери обладает тонкой способностью распознавать чужеродные антигены, но вместе с тем между эмбрионом и организмом матери создаются отношения взаимной терпимости-толерантности. Оказывается, такие гормоны, как прогестерон или хорионический гонадотропин связаны с иммунными реакциями матери при беременности, позволяя материнскому организму приспосабливаться к эмбриональному аллотрансплантанту. Очевидно, прогестерон, являясь одним из необходимых гормонов для поддержания беременности, во время стимуляции секреции эмбриотрофа маточными железами, в то же время снижает иммунные реакции в матке. Кроме того, ранний зародыш, который образовался, уже в первые часы после оплодотворения яйцеклетки образует иммуннодепрессорный фактор, который затрудняет лимфоцитам распознавание чужеродных антигенов эмбриона.
Из сказанного можно предположить, что искусственное ослабление иммунных реакций организма самки (создание иммунодефицита) может способствовать повышению процента приживления (имплантации) эмбриона.
В настоящее время стало известно, что распознавание чужеродных антигенов зародыша материнской иммунной системой приводит не к формированию реакции отторжения, а к становлению иммунотрофического взаимодействия в системе самка – зародыш. При этом часть эмбриональных потерь может быть обусловлена нарушением становления названного иммунотрофического взаимодействия.
В связи с вышеизложенным, исследования были направлены на изучение динамики иммунологических показателей крови коров в период осеменения и имплантации, поскольку в последнем случае отмечается наиболее высокая эмбриональная смертность, связанная с неадекватным ответом материнского организма на антигены плода.
Из 18 подопытных животных 50% осеменялись первый раз после родов (продолжительность периода от отела до осеменения составила 38±4 дня), 23% - второй раз (продолжительность периода то
отела до учитываемого осеменения - 81±4 дня), 18% - третий раз (150±11 дней), 9% - четвертый раз (244±40 дней).
В результате проведенных иммунологических исследований не было выявлено достоверного различия между животными, осеменявшимися неодинаковое количество раз и в различные сроки после отела.
Результаты иммунологических исследований проб крови показали, что у оплодотворившихся коров (n=7) по сравнению с оставшимися бесплодными (n=11), независимо от кратности осеменения, показатели иммунобиологической реактивности на 1-3-й день после осеменения находились на более высоком уровне (табл. 5), (рис.1-6).
Таблица 5 – Иммунологические показатели крови оплодотворившихся и неоплодотворившихся коров во время осеменения
| ПОКАЗАТЕЛИ | первая группа (оплодот.) | вторая группа (неоплодот.) |
|---|---|---|
| Лейкоциты, тыс./мкл | 7,96 ± 0,13*** | 7,50 ± 0,04 |
| Лимфоциты, % | 58,4 ± 2,53 | 61,3 ± 1,28 |
| Т-лимфоциты, % | 42,4 ± 0,92** | 34,8 ± 1,14 |
| Т-хелперы, % | 26,2 ± 0,95* | 23,2 ± 1,04 |
| Т-супрессоры, % | 11,2 ± 0,77** | 16,4 ± 1,18 |
| В-лимфоциты, % | 24,6 ± 0,83** | 28,8 ± 1,24 |
| Фагоцитоз, % | 50,2 ± 0,77 | 48,2 ± 0,71 |
| ЦИК, усл.ед. | 115,8 ± 0,77 | 114,6 ± 0,92 |
-
- Р<0,05 по сравнению с неоплодотворившимися коровами
** - Р<0,01 по сравнению с неоплодотворившимися коровами
***- Р<0,001 по сравнению с неоплодотворившимися коровами
Исследованиями последних двух десятилетий было доказано, что иммунный механизм организма срабатывает на чужие клетки и ткани.
Известно, что белые кровяные клетки в первую очередь реагируют на внедрение чужеродных антигенов. Лейкоциты, выполняющие защитную функцию организма, находятся в определенной связи с воспроизводительной функцией животных.
Из таблицы 5 видно, что количество лейкоцитов во время осеменения оплодотворившихся коров по сравнению с неоплодотворившимися (рис.1) было выше на 6,1% (7,96±0,13 против 7,50±0,04 тыс./мкл, Р<0,001).
Что касается второй, наиболее крупной группы клеток крови – лимфоцитов, то и здесь были отмечены характерные изменения (рис. 2). Количество лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров по сравнению с оставшимися бесплодными находилось на более низком уровне, соответственно на 4,8 % (58,4±2,53 против 61,3±1,28 %).
В современной клинической иммунологии для оценки функционального состояния лимфоидной системы иммунитета учитывают количественные показатели Т- и В-лимфоцитов как главных элементов иммунной системы, которые, обладая антигенными рецепторами, способны распознавать чужеродный агент и организовывать иммунный ответ.
Уровень Т-лимфоцитов в крови животных обеих групп существенно отличался (рис. 3). У оплодотворившихся коров процентное содержание Т-лимфоцитов выше на 21,8 % (42,4±0,92 против 34,8±1,14%, Р<0,001).
Существуют разновидности Т-лимфоцитов: Т–хелперы, и Т- супрессоры. Т-хелперы – помощники возникновения иммунного гуморального ответа и усиления реакции клеточного типа. Из таблицы 5 видно, что уровень Т-хелперов выше на 12,9 % (26,2 ± 0,95 против 23,2 ± 1,04 %, Р<0,05), а Т-супрессоров ниже на 31,7 % (11,2 ± 0,77 против 16,4±1,18 %, Р<0,001). Т-супрессоры блокируют антителообразование В-лимфоцитами и подавляют активность Т-хелперов (рис. 4).
Существенные количественные различия отмечены в клеточном звена иммунитета у В-лимфоцитов – основных продуцентов антител (рис. 5). Уровень В-лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров оказался ниже на 14,6%, чем у неоплодотворившихся (24,6±0,83 против 28,8±1,24%, Р<0,01).
Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов, или процент фагоцитоза (50,2±0,77 и 48,2±0,71 %), и циркулирующих иммунных комплексов, возникающих в ходе иммунного ответа (115,8±0,77 и 114,6±0,92 усл.ед.) в крови животных обеих групп, находились примерно на одном уровне (рис. 6).
| 8,2 8 7,8 7,6 лейкоциты (тыс./мкл) 7,4 7,2 7 6,8 6,6 Рис. 7. Динамика содержания лейкоцитов в крови оплодотворившихся коров | 58,9 58,8 58,7 58,6 лимфоциты, % 58,5 58,4 58,3 58,2 Рис. 8. Динамика содержания лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров |
|---|---|
| 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Т-лимфоциты, % Т-хелперы, % Т-супрессоры, % Рис. 9. Динамика содержания Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-супрессоров в крови оплодотворившихся коров | |
| 35 30 25 20 В-лимфоциты (%) 15 10 5 0 Рис. 10. Динамика содержания В-лимфоцитов в крови оплодотворившихся коров | 140 120 100 80 60 40 20 0 Фагоцитоз, % ЦИК, усл.ед. Рис. 11. Динамика содержания фагоцитарной ак- тивности нейтрофилов и циркулирующих иммун- ных комплексов в крови оплодотворившихся коров |
– 1-3-й день после осеменения; 15-17-й день после осеменения
В то же время показатели иммунобиологической реактивности у оставшихся бесплодных коров отличалась от таких же показателей оплодотворившихся коров (табл. 7, рис. 12-17).
Таблица 7 – Иммунологические показатели крови неоплодотворившихся коров во время осеменения и имплантации
| ПОКАЗАТЕЛИ | 1-3-й день после осеменения | 15-17-й день после осеменения |
|---|---|---|
| Лейкоциты, тыс./мкл | 7,50 ± 0,04 | 7,90 ± 0,11* |
| Лимфоциты, % | 61,3 ± 1,28 | 58,4 ± 1,22 |
| Т-лимфоциты, % | 34,8 ± 1,14 | 41,6 ± 0,83* |
| Т-хелперы, % | 23,2 ± 1,04 | 29,2 ± 0,77* |
| Т-супрессоры, % | 16,4 ± 1,18 | 11,2 ± 0,76* |
| В-лимфоциты, % | 28,8 ± 1,24 | 25,2 ± 1,39 |
| Фагоцитоз, % | 48,2 ± 0,71 | 48,4 ± 0,83 |
| ЦИК, усл.ед. | 114,6 ± 0,92 | 107,8 ± 1,10* |
-
- Р<0,001 по сравнению с 1-3 днем после осеменения
Так, при изучении иммунологических показателей крови подопытных животных было установлено, что количество лейкоцитов в крови оставшихся бесплодными животных во время имплантации зигот (рис.12), по сравнению с периодом осеменения животных увеличивалось на 5,1 % (с 7,50 ± 0,04 до 7,90 ± 0,11 %, Р<0,001), а у лимфоцитов отмечена тенденция к снижению (рис.13) на 4,9 % (с 61,3 ± 1,28 до 58,4 ± 1,22 %).
Противоположная динамика отмечена в количестве Т-лимфоцитов. Так, процентное содержание в крови Т-лимфоцитов у неоплодотворившихся коров к 15-17-му дню после их осеменения оказалось выше на 16,4 % (с 34,8 ± 1,14 до 41,6 ± 0,83 %, Р<0,001), к тому же отмечено более высокое содержание Т-хелперов на 20,5 % (с 23,2 ± 1,04 до 29,2 ± 0,77 %, Р<0,001), а содержание Т-супрессоров резко снизилось на 46,4 % (с 16,4 ± 1,18 до 11,2 ± 0,76 %, Р<0,001), (рис. 14).
