Коррекция иммунобиологической реактивности организма коров биотехнологическими методами

Количество В-лимфоцитов данной группы снижалось на 14,3 % (с 28,8 ± 1,24 до 25,2 ± 1,39 %), в то время как у оплодотворившихся коров, напротив, повышалось (рис. 15). Фагоцитарная активность нейтрофилов крови (процент фагоцитоза) подопытных животных была аналогичной на уровне 1-3-го дня после осеменения, в то время как у оплодотворившихся коров снижалась (рис. 16).

Интересные данные, на наш взгляд, были получены при изучении ЦИК в крови неоплодотворившихся коров. Так, в одинаковой концентрации ЦИК при осеменении животных к периоду имплантации зиготы у оставшихся бесплодных животных по сравнению с оплодотворившимися коровами отмечалось более выраженное снижение концентрации ЦИК на 6,3 % (с 114,6 ± 0,92 до 107,8 ± 1,10 усл.ед., Р<0,001) против 2,3 % у оплодотворившихся коров (рис.17). Снижение ЦИК, по всей видимости, свидетельствует о неадекватном иммунном ответе материнского организма на антигены плода, приводящем к неполноценному течению процессов имплантации и отторжению развивающегося зародыша.

Таким образом, высокая иммунобиологическая реактивность организма коров в период их осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие их организма со сформировавшимся зародышем.

У неоплодотворившихся коров к периоду имплантации, напротив, отмечалась активизация защитных сил организма, пренатальная гибель чаще всего происходит именно в этот период.

Влияние иммуномодулятора «Полирибонат» на уровень иммунобиологической реактивности и оплодотворяемость коров

Предыдущее исследование по изучению динамики иммунологических показателей крови коров в период их осеменения и имплантации зигот показало, что высокая иммунобиологическая реактивность организма коров в период их осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие их организма со сформировавшимся зародышем. Это явилось теоретической основой для разработки эффективных методов коррекции иммунобиологической реактивности, направленных на повышение оплодотворяющей способности коров.

В этом отношении представляют интерес иммуномодуляторы – препараты, обладающие иммунотропной активностью, которые в терапевтических дозах восстанавливают функции иммунной системы (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2000). Учитывая актуальность данной проблемы, мы решили использовать иммуномодулятор «Полирибонат», обладающий способностью увеличивать количество антителобразующих клеток, содержание Т-лимфоцитов и активизировать функцию макрофагов.

Исследования проводили в условиях молочно-товарной фермы учебно-опытного хозяйства «Байкал» Бурятской государственной сельскохозяйственной академии имени В. Р. Филиппова и в лаборатории клинической иммунологии Республиканской больницы им. Н.А. Семашко с целью определения эффективности иммуномодулятора полирибонат на оплодотворяющую способность коров. Эффективность препарата изучили на коровах симментальской породы. Коровы находились в одинаковых условиях содержания и кормления.

При выполнении данного раздела научные исследования были проведены в три серии:

В первую серию опыта было включено 55 коров, которые были распределены по принципу аналогов на четыре группы. Коровам первой опытной группы (n=13) с целью стимуляции иммунобиологической реактивности на 1-3-й день после осеменения внутримышечно в область крупа инъецировали 0,1 мг/кг полирибонат, животным второй опытной группы (n=13) инъекцию препарата проводили на 11-13й день после осеменения, коровам третьей опытной группы (n=12) иммуномодулятор инъецировали двукратно – на 1-3-й и 11-13-й день после осеменения. Животным четвертой (контрольной) группы (n=17) препарат не назначали.

67% подопытных коров осеменялись первый раз после отела (продолжительность периода от отела до осеменения (сервис-период) составила 39±3 дня), 25% животных подвергались осеменению вторично (продолжительность периода от отела до учитываемого осеменения составила - 74±5 дней), 7% животных подвергались осеменению третий раз (132±13 дней).

Осеменение животных проводили искусственно замороженнооттаенной спермой быка-производителя Дунай, которая хранилась длительное время в жидком азоте при температуре –196?С в сосуде

Дьюара. При осеменении коров мы использовали ректоцервикальный метод искусственного осеменения, двукратно, с 12-часовым интервалом и только при наличии у них явных клинических признаков проявления половой охоты и течки. Оттаянную сперму перед проведением искусственного осеменения согласно Инструкции по искусственному осеменению коров и телок подвергали исследованию и определяли ее пригодность для осеменения.

Результаты исследования за подопытными животными, представленные в таблице 8, свидетельствуют о том, что использованные схемы применения полирибоната не только не оказывает положительного влияния на воспроизводительную функцию коров, но и ведет к снижению их оплодотворяемости. В частности, после учитываемого осеменения беременность наступила у 64,7% коров контрольной группы, а при применении полирибоната на 1-3-й день после осеменения – у 53,8%, на 11-13-й день – у 46,1% и при двукратном применении полирибоната с 10-дневным интервалом – у 41,6% коров.

Таблица 8 – Влияние иммуномодулятора «Полирибонат»

на оплодотворяемость коров при искусственном осеменении

Таблица 9 – Влияние полирибоната на оплодотворяемость коров в зависимости от времени введения препарата

Проведение более детального анализа полученных данных по оплодотворяемости коров позволило выявить интересную закономерность. При применении полирибоната на 1-2-й день после осеменения оплодотворяемость коров составила 83,3%, или в 1,28 раз выше, чем в контрольной группе (64,7%). Применение полирибоната в другие сроки после осеменения привело к снижению оплодотворяемости коров, особенно в предимплантационный период – при применении полирибоната на 13-й день после учитываемого осеменения стельными стали всего лишь 30 % коров (табл. 9).

дит к повышению активности иммунной системы материнского организма, что способствует распознаванию антигенов плода и адекватному иммунному ответу на них со стороны матери, приводящих к формированию и развитию беременности. Данное исследование согласуется с результатами иммунологических показателей крови исследуемых в предыдущей главе, когда высокая иммунобиологическая реактивность коров в период осеменения обеспечивает нормальное течение процессов оплодотворения и иммунотрофическое взаимодействие материнского организма с развивающимся зародышем.

Таким образом, стимуляция иммунной системы матери в период имплантации (в который при нормальном развитии беременности свойственно снижение уровня неспецифической резистентности) приводит к усилению иммунного ответа материнского организма на антигены плода и, вследствие этого, к неполноценному течению имплантации и отторжению развивающегося зародыша.

Во второй серии опытов мы более детально исследовали влияние иммуномодулятора «Полирибонат» на уровень иммунобиологической реактивности и оплодотворяемость коров при его однократном назначении на 1-2-й день после осеменения.

В опыт были отобраны 32 коровы в период осеменения, распределенные по принципу аналогов на 2 группы. Животным опытной группы (n=20) однократно внутримышечно в область крупа инъецировали по 0,1 мг/кг полирибоната на 1-2-й день после осеменения. Коровам контрольной группы (n=12) инъекции не проводились. Взятие проб крови для иммунологических исследований проводились на 1-2-й и 15-16-й день после осеменения.

75% подопытных коров осеменялись первый раз после отела (продолжительность периода от отела до осеменения составила 46±4 дня), 25% - второй раз (продолжительность периода от отела до учитываемого осеменения - 92±3 дня).

Результаты иммунологических исследований проб крови от подопытных коров представлены в таблице 10.

Можно предположить, что применение биологически активных препаратов, стимулирующих иммунную систему коров в период осеменения (на 1-2 день после осеменения), по всей видимости, приво-