Выше приведен регламент оттаивания спермы, подходящий для большинства поставщиков. В настоящее время в Россию поставляется сперма разных производителей. При этом, в случае рекомендации других параметров, важно соблюдать температурный режим и временной регламент, рекомендованные поставщиком, т.к. возможно использование различных криопротекторов.
По истечении времени разморозки (20-40 секунд) соломинку следует достать из воды пинцетом, находящимся в правой руке, твердо удерживая как можно ближе к запаянному концу. После извлечения соломинку встряхивают, чтобы пузырьки воздуха поднялись к запаянному концу и протирают теплой стерильной салфеткой одним движением левой руки, чтобы удалить остатки воды.
Если этого не сделать, то при срезании кончика соломинки вода может попасть в семя и вызвать гибель сперматозоидов. При этом нельзя касаться голыми пальцами (т.е. без свернутой салфетки) той части соломинки, где находится семя, чтобы не вызвать температурный шок и гибель спермиев. Также нельзя допускать вспенивания и расслоения семени, поэтому соломинки следует держать только вертикально.
Вставлять соломинку в шприц надо ватной пробочкой вниз до упора. При этом левой рукой берут подготовленный чистый шприц с выдвинутым заранее поршнем, а правой рукой пинцетом заправляют соломинку. Важно помнить, что, достав соломинку из воды, заново ее пинцетом не перехватывают, а держат в одном положении. У правильно заправленной соломинки запаянный конец оказывается вверху и выступает из шприца примерно на 1 см. Далее шприц с соломинкой держат в левой руке, не касаясь выдвинутого поршня, а в правую руку берут ножницы для обрезания соломинок, и под прямым углом отрезают запаянный конец в 3-5 мм от края шприца. Категорически запрещено обрезать соломинку вровень со шприцом – тогда при осеменении часть семени останется в полости пипетки. Во время этого этапа и одевания пипетки необходимо соблюдать осторожность, чтобы не коснуться выдвинутого поршня.
Сразу после обрезки соломинки, в правую руку берут подготовленную заранее пипетку (немного выдвинутую из надрезанного упаковочного чехла голубым поршнем наружу) и надевают на шприц, держа только за часть с голубым поршнем, чтобы соблюсти стерильность инструмента. При этом упаковочный чехол с пипетки не снимают – он остается на ней до самого осеменения! После хорошей фиксации пипетки на шприце, кончик обрезанной соломинки должен почти касаться внутренней стороны верхушки пипетки. Важно помнить, что количество пипеток равно количеству поставленных доз семени, а пипетки других производителей могут не подойти к используемым шприцам и соломинкам.
Если готовится несколько доз семени для осеменения, то заправленный шприц с пипеткой в чехле (инструмент) кладется на теплую +35…+37°С стерильную салфетку и заворачивается, чтобы избежать переохлаждения. Помните, что от извлечения семени из азота до осеменения должно пройти не более 15 минут. Поэтому не рекомендуется готовить за один раз больше 2-3 доз семени или надо привлекать для помощи второго специалиста.
Чтобы избежать переохлаждения семени, перед тем, как идти осеменять корову, инструмент помещают в термочехол. В случае его отсутствия надо спрятать инструмент в санитарном чехле запазуху или подмышку так, чтобы выдвинутый поршень торчал наружу.
Техника осеменения.
Осеменение производится ректоцервикальным способом в тело матки, отступая примерно на 0,3-0,5 см от шейки матки под контролем руки через прямую кишку (рисунок 16).

Непосредственно перед осеменением аккуратно извлекают из термочехла (или из запазухи) инструмент правой рукой и вставляют прямо в чехле в половые пути коровы до упора в заднюю стенку влагалища. Затем левую руку в перчатке вводят в прямую кишку, после чего находят и захватывают шейку матки, а правой рукой немного вводят в нее инструмент в чехле, не касаясь поршня. После этого левой рукой аккуратно фиксируют шейку матки с инструментом в ней, правой дергают за чехол назад, чтобы он прорвался, и его можно было оттянуть назад, а в шейку матки вошла только стерильная пипетка. Это действие требует некоторой ловкости или посторонней помощи! Давление на поршень осуществляют только после введения инструмента в тело матки, медленно считая до пяти или семи, на поршень нажимают до упора, иначе в инструменте останется не использованное семя. После осеменения шприц с пипеткой и прорванным чехлом правой рукой извлекается наружу, а левой рукой в течение 10-15 секунд делается легкий массаж матки. Использованный чехол с пипеткой выбрасывается, шприц дезинфицируется к следующему осеменению. Если предписано ветврачом, то осеменатор проводит дополнительные процедуры или инъекции осемененной корове. При беспривязном содержании осеменение, как правило, производится в зоне ветеринарно-санитарной обработки в доильном зале, после доения. При этом важно записывать номер группы, из которой отделена для осеменения корова, и возвращать ее обратно.
Учитывая, что сразу после доения активность матки минимальная, желательно осеменять коров до или через 1-2 часа после доения. Во время выдержки до и после осеменения у коров обязательно должен быть доступ к воде и минимум корма (например, сено), что устраняет излишнее беспокойство и стресс у коровы, негативно отражающиеся на ее
оплодотворении. Осемененной корове для предупреждения выбрасывания семени назад при движении животного, важно обеспечить неподвижность в течение 6-12 часов или инъекционно повысить сократительную активность матки.
Подготовка коров к осеменению производится заранее осеменатором или его помощником, ДО РАЗМОРОЗКИ СЕМЕНИ И ЗАПРАВКИ ИНСТРУМЕНТОВ! Во время подготовки корову надежно фиксируют в станке, затем зачищают щеткой заднюю часть бедер, обмывают наружние половые органы и вход во влагалище дезинфектантом (слабый раствор марганцевокислого калия, фурациллина). После этого наружние половые органы коровы вытирают насухо одноразовой салфеткой и фиксируют у животного хвост на сторону или вверх. Такая корова считается подготовленной к осеменению и можно идти размораживать семя. Перед разморозкой необходимо вымыть с мылом руки, сменить рабочую обувь и надеть чистый белый халат. Для осеменения необходимо выделить рабочую одежду (удобно комбинезон), длинный фартук и нарукавники. При осеменении обязательно использовать одноразовые перчатки.
Улучшение показателей оплодотворяемости во время и после искусственного осе-
менения.
Низкая оплодотворяемость яйцеклеток у клинически здоровых животных может быть обусловлена следующими причинами:
-
Снижение транспортной функции матки;
-
Задержка овуляции;
-
Низкое качество яйцеклетки;
-
Воздействие вирусных и бактериальных инфекций;
-
Низкое качество сперматозоидов;
-
Неадекватная среда в половых путях;
-
Иммунное бесплодие.
Из выше перечисленных причин последние три требуют комплексного подхода, т.к. обусловлены в первую очередь неадекватным кормлением и неудовлетворительной стратегией подготовки животных к осеменению.
Снижение транспортной функции матки. Транспортная функция матки обеспечивает своевременно и в достаточном количестве поступление спермы в верхнюю треть яйцевода, где и происходит оплодотворение яйцеклетки. Снижение транспортной функции может произойти по ряду причин. Одной из основных, но мало освещенных в литературе, является блокирующее действие прогестерона выделяемого так называемыми «остаточными» желтыми телами. Это не полностью лизировавшие желтые тела предыдущих половых циклов, сохранившие секреторную функцию (рисунок 17).
Непосредственной причиной их сохранения является недостаточный синтез ПГF2α эндометрием. Часто наблюдаются при хронических эндометритах и поражении слизистой химическими веществами в результате неправильного лечения эндметритов. Они не мешают функции основного желтого тела и половой цикличности, но секретируют прогестерон в достаточном для снижения маточного тонуса количестве. По данным, полученным в наших исследованиях, его уровень в период охоты достигает 1-1,5 нг/мл в сыворотке крови таких коров.
Для профилактики данной патологии в первую очередь нужно определить причины, приводящие к снижению секреции ПГF2α, повысить контроль за уровнем хронических эндометритов у новотельных животных.
С целью повышения транспортной функции матки и снижения уровня прогестерона, непосредственно после осеменения или в течение 30 минут до или после него внутримышечно вводится 2-3 мл Магэстрофана®.
