Смесь молока с реактивом перемешивают палочкой в каждой луночке поочередно в течение 10-15 секунд. На МКП-2 молоко с реактивом смешивают одновременно во всех лунках путем горизонтального вращения пластинки.
Образование сгустка (желеобразного) и малинового цвета молокапризнак положительной реакции на скрытый мастит. Отрицательная реакция-жидкость однородная (желтая, оранжевая) без образования сгустка.
2. Проба с мастидином.
Готовят из 10%-ного и 2%-ного раствора мастидина. Для приготовления 2%-ного раствора мастидина к 100 мл 10%-ного раствора добавляют 400 мл дистиллированной или заранее прокипяченной теплой воды. Ставят пробу и учитывают реакцию по образованию сгустка и изменению цвета, как при исследовании молока с 5%-ным раствором димастина.
Показания проб с димастином или мастидином не имеют самостоятельного значения для постановки диагноза на мастит. Их в обязательном порядке нужно подтверждать пробой отстаивания.
3. Проба отстаивания.
Проба отстаивания ставится с молоком из четвертей вымени, давшим положительный результат на димастин и мастидин. Для этого в конце доения коровы берут в пробирку 10мл молока (секрета) и ставят на 16-18 часов в холодильник или холодное место, чтобы молоко не прокисло. На второй день пробы осматривают и учитывают результат. Обращают внимание на наличие осадка. Количество и характер сливок, и цвет молока.
Молоко здоровых коров белого или слегка синеватого цвета осадка не образует; от больных маститом коров оно водянистое, консистенция сливок изменена, они становятся тягучими, слизистыми, хлопьевидными.
4. Исследование молока ПЭДМ.
В каждое углубление пластинки прибора из соответствующей четверти вымени надаивают 1-2 мл молока. Положительно реагирующим или из больной четверти считается молоко, когда при надавливании кнопки прибора соответствующая лампочка (углубление) горит красным цветом, а отрицательный результат – зеленый свет. Работа прибора основана на электропроводности молока. При воспалении молочной железы сопротивляемость молока превышает и составляет выше 12%.
Согласно рекомендациям по борьбе с маститом при клинически выраженном мастите коров исследуют ежедневно при доении, а для диагностики скрытых (субклинических) маститов – 1 раз в месяц.
5. Проба Уайтсайда
Основана на косвенном учете повышенного содержания в молоке лейкоцитов и эпителиальных клеток. Ее можно использовать для сравнения с другими методами диагностики скрытых маститов.
Вариант 1. В лунки МКП внести по 1 мл (1 части) молока из каждой доли вымени и добавить по 2,5 мл (2,5 части) 4%-ного раствора едкого натра. Молоко с щелочью смешивается палочкой, а реакция читается в течение 10-15 секунд. Сгусток и хлопья указывают на большое количество соматических клеток, и проба считается положительной на скрытый мастит. Спустя 30 секунд признаки могут исчезнуть.
Вариант 2. На обезжиренное стекло наносят 1 каплю молока и 2 капли 4%-ногоедкогонатра. Реакция читается в течение 10-15 секунд:
-
если смесь представляет однородную беловатую жидкость – реакция отрицательная (-);
-
при наличии мелких, едва заметных хлопьев – проба сомнительная (+-);
-
если на стекле заметны мелкие хлопья, водянистость, просветле-
-
ние молока – реакция положительная – (+);
-
когда хлопья крупные, молоко просветлело, водянистое – (++);
-
масса просветленная, с осадком, вязкая и тягучая – (+++);
-
когда смесь густеет, в центре капли студнеобразный сгусток, по
-
краям ее прозрачная жидкость – (++++).
МИМ-1 – механические индикаторы мастита – используются для выявления коров больных маститом.
6. Бромтимоловая проба.
Используют 0,2% раствор бромтимоловой синьки на 65% спарте. В луночке молококонтрольной пластинки вносят 1мл молока и прибавляют к нему 2 капли бромтимоловой синьки.
Молоко здоровой коровы имеет желто-зеленый цвет (салатовый). Зеленый или синий цвет свидетельствует о щелочной реакции молока.
Желтый – о кислой.
7. Проба с индикаторными карточками.
Индикаторные или «маститные» карточки представляют собой бумажные пластинки, на которые нанесен индикатор в виде четырех желтых пятен.
На карточках пишут клички исследуемой коровы и дату анализа. На каждый кружок, соответствующий определенной четверти вымени, выдаивают 2-3 капли молока. Цвет бумажных кружочков изменяется в зависимости от щелочности молока – желтый, зеленый с разными оттенками или синий.
Молоко, которое при реакции с димастином или другими индикаторами дало положительный, или сомнительный результат, исследуют дополнительно пробой отстаивания.
8. Лейкоцитарная проба.
Проводится в специальных пробирках с суженым концом.
Пробирку заполняют молоком до метки 10, центрифугируют 5 минут при 2000 оборотах в минуту.
В молоке из здоровых четвертей уровень осадка меньше 1, а в случае заболевания маститом уровень осадка доходит до 1 и выше.
Из осадка делают мазок, окрашивают его по Грамму и просматривают под микроскопом. В случае мастита в осадке секрета можно обнаружить микробы, лейкоциты, гнойные тельца, эпителиальные клетки.
Для всех видов названных лабораторных методов исследования молока берут следующим образом. Первые 2-3 капли секрета из четвертей удаляют, а затем молоко выдаивают в одинаковые по диаметру и цвету пробирки или на пластмассовую пластинку с углублениями (лунками). Причем держать такую пластинку нужно отверстием по направлению к голове коровы, что позволяет определить, из какой четверти взято молоко в ту или иную лунку.
9. Определение каталазы с помощью бумажного диска.
Из хроматографической бумаги марки фильтрак ф-1 готовят диски диаметром 12мм и 3% раствор перекиси водорода на М (15 фосфатном буфере рН 7,2) готовится в день проведения пробы.
