6. Бромтимоловая проба.
Используют 0,2% раствор бромтимоловой синьки на 65% спарте. В луночке молококонтрольной пластинки вносят 1мл молока и прибавляют к нему 2 капли бромтимоловой синьки.
Молоко здоровой коровы имеет желто-зеленый цвет (салатовый). Зеленый или синий цвет свидетельствует о щелочной реакции молока.
Желтый – о кислой.
7. Проба с индикаторными карточками.
Индикаторные или «маститные» карточки представляют собой бумажные пластинки, на которые нанесен индикатор в виде четырех желтых пятен.
На карточках пишут клички исследуемой коровы и дату анализа. На каждый кружок, соответствующий определенной четверти вымени, выдаивают 2-3 капли молока. Цвет бумажных кружочков изменяется в зависимости от щелочности молока – желтый, зеленый с разными оттенками или синий.
Молоко, которое при реакции с димастином или другими индикаторами дало положительный, или сомнительный результат, исследуют дополнительно пробой отстаивания.
8. Лейкоцитарная проба.
Проводится в специальных пробирках с суженым концом.
Пробирку заполняют молоком до метки 10, центрифугируют 5 минут при 2000 оборотах в минуту.
В молоке из здоровых четвертей уровень осадка меньше 1, а в случае заболевания маститом уровень осадка доходит до 1 и выше.
Из осадка делают мазок, окрашивают его по Грамму и просматривают под микроскопом. В случае мастита в осадке секрета можно обнаружить микробы, лейкоциты, гнойные тельца, эпителиальные клетки.
Для всех видов названных лабораторных методов исследования молока берут следующим образом. Первые 2-3 капли секрета из четвертей удаляют, а затем молоко выдаивают в одинаковые по диаметру и цвету пробирки или на пластмассовую пластинку с углублениями (лунками). Причем держать такую пластинку нужно отверстием по направлению к голове коровы, что позволяет определить, из какой четверти взято молоко в ту или иную лунку.
9. Определение каталазы с помощью бумажного диска.
Из хроматографической бумаги марки фильтрак ф-1 готовят диски диаметром 12мм и 3% раствор перекиси водорода на М (15 фосфатном буфере рН 7,2) готовится в день проведения пробы.
Анатомическим пинцетом захватывают бумажный диск и погружают его в тщательно смешанную пробу молока. Для удаления излишков секрета диск поворачивают в вертикальное положение и, притрагиваясь к стенкам пробирки, как бы вытирают его. После этого диск погружают в раствор перекиси водорода, который наливают в количестве 5мл в пробирку размером 60х16 мм. Время, прошедшее от момента погружения диска в раствор до всплывания его на поверхность, отмечают по секундомеру. При малом содержании лейкоцитов (до 100 тас. в 1 мл) время всплытия диска равно 1-5 минет, а иногда больше. При увеличении лейкоцитов (свыше 200тыс. в 1мл) диск всплывает за 3-5 секунд или моментально.
При заболевании коровы маститом диск всплывает за 3-5 секунд или моментально.
Данный метод исследования каталазы можно использовать при проведении массовых исследований проб молока от коров непосредственно на ферме.
В одной пробирке с одним и тем же реактивом можно проводить до 10 анализов.
10. Проба молока с мастотестом Воронежским.
Он представляет собой сухой порошок темно-зеленого цвета, который хорошо растворяется в воде. Рабочий 10%-ный раствор готовят следующим образом: 10 г препарата вносят в мерную емкость и доливают до метки 100 мл дистиллированной или питьевой свежепрокипяченной водой, подогретой до 50-600 С. Постановка пробы и учет реакции по вязкости желе аналогичны с мастидином.
Цвет смеси молока с мастотестом:
-
желто-салатный или светло-зеленый – нормальная слабокислая
-
реакция молока рН 6,5-6,8;
-
зеленый – сдвиг в щелочную сторону рН 6,8-6,9;
-
темно-зеленый, синий – повышение щелочности, рН 7,0 и выше.
11. Пробы с сульфанолом.
20%-ный раствор сульфанола (основной) представляет собой жидкость желтого цвета, полученную путем растворения сульфанола в воде. Для этого в мерную посуду вносят 20 г порошкообразного сульфанола и доливают дистиллированной или прокипяченной водой до 100 мл.
В хозяйствах непосредственно перед исследованием коров на мастит при контрольном доении основной 20%-ный раствор сульфанола разбавляют в два раза обычной питьевой водой – получают 10%-ный рабочий раствор сульфанола.
Процесс постановки пробы и учета результатов аналогичны с мастидином и мастотестом.
Основным диагностическим признаком предполагаемого заболевания коровы маститом является образование желе на +++ или ++++ креста, а изменение цвета смеси служит ориентировочным признаком.
12. Выявление больных маститом животных по пробам секрета из четвертей вымени.
С целью определения пораженных маститом четвертей вымени пробы молока отбирают из каждой четверти от всех животных или давших положительную и сомнительную реакцию с БМТ с молоком из удоя.
Для этого 1 мл молока выдаивают в соответствующую лунку молочно - контрольной пластинки и смешивают с 1 мл одного из быстрых маститных тестов – 2% р-ра мастидина, 2%р-ра мастотеста Воронежского, 5% р-ра димастина или 2,5% р-ра сульфанола.
Постановка пробы и учета реакции аналогична при работе с
10% растворами.
Для приготовления 2% раствора мастидина или 2% раствора мастотеста Воронежского к 100 мл соответствующего основного 10% р-ра добавляют 400 мл дистиллированной или прокипяченной теплой воды.
Для приготовления 5% раствора димастина в 100 мл дистиллированной или теплой прокипяченной воды растворяют 5 г димастина (порошок желтого или оранжево-желтого цвета). В каждое углубление пластинки из соответствующих четвертей вымени надаивают по 1 мл молока, добавляют по 1 мл раствора димастина и перемешивают в те-
