В опытах использован пробиотический препарат «Сахабактисубтил», изготовленный на основе штаммов бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» и Bac. subtilis «ТНП-5» согласно ТУ 9384–003–00670203–06.
Культуральная жидкость из штамма бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» состоит из метаболитов штамма бактерий Вас. subtilis без бактериальных клеток. Штамм культивировали в мясопептонном бульоне при температуре 37ºС в течение 5 суток, центрифугировали при 7000 об/мин на протяжении 15 мин, после чего провели фильтрацию.
Родовую и видовую идентификацию выделенных микроорганизмов проводили согласно «Справочнику по микробиологическим и вирусологическим методам исследований» (1982), «Определителю зоопатогенных микроорганизмов» (1995), а также по «Определителю бактерий Берджи» (1997) и справочнику «Микробиологический контроль мяса животных, птицы, яиц и продуктов их переработки» (2002).
Исследования молока проведены на анализаторе КЛЕВЕР. Биохимические исследования проведены на инфракрасном анализаторе ИКА NIR SCANNER model 4250. Пробы к биохимическому анализу готовили согласно общепринятым методикам.
Математическую обработку полученных данных осуществляли с использованием прикладной программы Snedecor, Microsoft Excel, а также статистической обработки по методу Стьюдента.
Наиболее подробные методы исследований приведены в соответствующих главах.
ИЗУЧЕНИЕ ВЛАГАЛИЩНОГО МИКРОБИОЦЕНОЗА КОРОВ В УСЛОВИЯХ ЯКУТИИ
3.1. Микрофлора влагалищно-цервикальной слизи коров
с нормальным течением отела
В большинстве случаев из смывов одной коровы с нормальным течением послеродового периода в первые дни отела изолировали 2-3 вида микроорганизмов. С завершением инволюции половых органов количество микрофлоры в смывах уменьшалось, в основном выделялись сапрофитные микроорганизмы (таблица 1).
В основном в количественном отношении преобладали спорообразующие аэробные бактерии рода Bacillus (до 3,3х106 КОЕ в 1 мл слизи), заметно уступают им лактобактерии (до 2,2х106 КОЕ), также энтерококки (до 2х105 КОЕ). С первых дней после отела в небольшом количестве регистрируются бифидобактерии, непатогенные стафилококки (5,9х105 КОЕ). Во влагалищной слизи коров на третий день после отела изолировали грибы рода Candida . Также следует указать, что с десятого дня во влагалищном секрете у 20-ти коров отмечалось присутствие плесневых грибов из рода Aspergillus fumigatus и протея, что указывает на проникновение их в гениталии из окружающей среды (воздух помещений, при раздаче корма, навоз).
Таблица 1.
Видовой состав вагинальной микрофлоры коров первые 3 дня
после нормального отела
| №пп | Выделенные микроорганизмы | Количество микроорганизмов КОЕ, в 1 мл слизи |
|---|---|---|
| 1 | Лактобактерии | 2,2х106 |
| 2 | Бифидобактерии | + |
| 3 | Спорообразующие аэробные бактерии | 3,3х106 |
| 4 | Энтерококки | 2х105 |
| 5 | Стафилококки | 5,9х105 |
| 6 | Протей | + |
| 7 | Дрожжеподобные грибы рода Candida | + |
| 8 | Иерсинии | н.р. |
Примечание: н.р. - нет роста микроорганизмов
Таким образом, установлено, что в условиях Якутии у здоровых коров с нормальным течением родов в первые дни после отела во влагалищном секрете преобладают бактерии рода Bacillus , заметно им уступают лакто- и бифидобактерии, отмечено присутствие дрожжеподобных грибов рода Candida .
3.2. Микрофлора влагалищно-цервикальной слизи коров с послеродовыми эндометритами
Диагноз эндометрит животных в хозяйствах ставился на основании клинических симптомов болезни, гинекологических обследований, анамнестических данных.
Как показывают данные исследований (таблица 2), если послеродовой период у коров осложняется разными патологическими процессами в гениталиях, то видовой состав микрофлоры и степень инфицирования половых органов меняется.
Таблица 2.
Видовой состав вагинальной микрофлоры коров с послеродовыми эндометритами
| № пп | Выделенные микроорганизмы | КОЕ в 1 мл слизи |
|---|---|---|
| 1 | Лактобактерии | н.р |
| 2 | Бифидобактерии | н.р |
| 3 | Спорообразующие аэробные бактерии | 3х103 |
| 4 | Энтерококки | 6х102 |
| 5 | Эшерихии | 14,7х107 |
| 6 | Стафилококки | 3,2х107 |
| 7 | Протей | + |
| 8 | Дрожжеподобные грибы рода Candida | + |
| 9 | Токсигенные грибы | А. fumigatus, A. flavus, A. niger, Muсor, Rhizopus |
| 10 | Иерсинии | + |
В вагинальной микрофлоре коров с послеродовыми эндометритами также изолированы спорообразующие аэробные бактерии (до 3х103 КОЕ), отмечено отсутствие представителей нормофлоры – бифидо- и лактобактерий, уменьшение энтерококков (до 6х102 КОЕ), увеличение количества условно-патогенных микроорганизмов, особенно патогенных стафилококков (до 3,2х107 КОЕ), эшерихий (14,7х107 КОЕ), присутствие иерсиний и протея. Следует отметить, что в отличие
