Химический состав и физико-химические свойства.
Секрет вымени у больных скрытым маститом животных характеризуется глубокими изменениями. У коров снижается на 19,2-33,3% молочная продуктивность, происходит уменьшение плотности до 1,025 г/см? и титруемой кислотности до 5-13°Т. В начальной стадии заболевания pH секрета имеет кислую реакцию (до 5,0), а в последующем — нейтральную или слабо щелочную (7,0-7,2 и более). В результате воспаления в молочной железе происходит нарушение синтеза белков, жиров и лактозы. Поэтому в значительной степени изменяется химический состав секрета. При этом заметно снижается массовая доля казеина, а содержание растворимых белков, в частности сывороточного альбумина и иммунных глобулинов, повышается. Происходит уменьшение массовой доли лактозы до 3,6% и жира на 0,160,27%. Данные изменения обусловливают общий дефицит сухого вещества. Субклинический мастит является причиной значительного повышения в секрете содержания натрия и хлора (до 300 мг%). При этом концентрация кальция имеет тенденцию к снижению. Помимо нарушений химического состава и физических свойств в секрете изменяются и биологические параметры. В нём снижается уровень лизоцима или он может отсутствовать, уменьшается количество витаминов и вместе с тем значительно увеличивается количество ферментов, особенно каталазы, патогенных микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности.
Цитологические методы исследования.
В молоке (секрете) содержатся лейкоциты, эритроциты, клетки плоско-
го, цилиндрического и кубического эпителия, колостральные тельца, которые
объединены в общее название соматические клетки (СК) (рис. 16, 17, 18, 19
по И.И. Архангельскому, Т.11. Коле- Co ОО ле ey Cae 9%
синой). В зависимости от функцио- & p о, оо.
нального состояния молочной желе- ig ee о a bis Hah $
зы количество СК подвержено зна- № м 3 6 1” Е
чительным колебаниям. Присутствие №” 4 y т м. ck, gees 4
в молоке лейкоцитов обозначено Ко mom oS a ьо _ :
участием их в процессе фагоцитоза, + я т в. ее ; cee |. 5
следуети повышениесвязывать количества этих клетокс раздражением ‚99&О мА% ag aeie
(при нарушении работы доильных | вы omBay ig 2 3 :
аппаратов, при резкой смене рацио- ъ. г ee ыы
Ha, при заболеваниях желудочно Ч И Ш и
кишечного тракта т.д.) или воспале- Рисунок 16 — Клетки из соскового
нием в тканях вымени. канала в молоке коровы
(ae а Зе Ss
\ Ра - eG * о... Ч Е wag te Se
Рисунок 18 - Колостральные клетки: пенистые, альбуминофоры, лейкоциты
Кроме этого установлено, что существует прямая зависимость между количеством лейкоцитов в молоке и его бактериальной обсеменённостью. Позможно и физиологическое повышение числа СК, которое отмечают в конце лактационного периода, в течение стадии возбуждения полового цикла, в молозивный период (табл. 4).
Таблица 4 — Количество соматических клеток в секрете вымени в различные периоды лактации и при заболевании коров маститом
Функциональное состояние вымени
(Средний период лактации (2-6 мес.)
ПериодМолозивныйстародойностипериоди запуска - 1509354639875 j
— Ранний период мастита 16026600 _
a РА ie Ve ра В соответствии с ГОСТ Р
®. ы Ae № «52054-2003 «Молоко натураль-
ЕЕ В PY =) в молоке высшего сорта должно
ae
+ Sak, a =! содержаться He Gonce 0,5 млн./мл
. С ee. ное коровье — сырое» (M.,2003),
Г о № соматических клеток, в молоке
а. 1 490 первогои второго сорта— не бо-
а —
rtsСА at Дифференциацию раздра-
ara ee 1,0 mon /un.
Рисунок 19 - Альбуминофоры или эпители- Gaelic От воспалитель-
альные клетки, захватившие лейкоцитов ного процесса проводят путем
повторного через 2-3 суток подсчёта СК в молоке из тех же долей вымени после устранения причины. При раздражении молочной железы через указанный срок количество СК снижается и приходит к исходному значению. Подсчёт числа СК осуществляют прямыми и косвенными методами.
Прямые методы подсчёта соматических клеток.
Для определения содержания СК в значительном количестве проб и установления качества молока, разработаны такие приборы, как «Фоссоматик», «Целлоскоп», «Пикоскель», «Культер-Каунтер», «Автоанализатор» и другие. ® Подсчёт соматических клеток на приборе «Фоссоматик». Работа прибора основана на флуоресцентно-оптическом принципе, где подсчитываются только клетки, имеющие ядро. Специфика методики основана на образовании флуоресцентного комплекса, в результате взаимодействия люминесцентного красителя с ДНК ядра клетки. Перемешивание пробы молока, отбор образца для исследования, разбавление его, окрашивание флюорохромовыми красителями (бромистым этидием) клеток и все другие операции, включая перевод результата исчисления в цифровое значение на светящемся экране и печатание его на специальной ленте, производятся в автоматическом режиме. Полученные результаты, умноженные на 1000, показывают число соматических, содержащих ядра клеток в 1,0 мл молока. Производительность аппарата составляет 150180 проб молока за | час.
® Подсчёт на электронных счётчиках частиц («Целлоскоп», «Культер-Каунтер», «Пикоскель», гемоцитометр копдуктометрический марки ГЦМК-3). Принцип действия этих приборов основан на изменении электрического сопротивления частиц, подлежащих подсчёту. При прохождении соматических клеток через капиллярное отверстие скачкообразно повышается сопротивление, что служит импульсом, который регистрируется и подсчитывается электронным путём. Перечисленные счётчики снабжены дискриминатором — устройством, которым вычисляют только частицы определенной величины.
® Метод подсиёта соматических клеток по И. И. Архангельскому и др. Предварительно готовят солюбилизирующий раствор по следующей прописи. К 0,9%-му раствору натрия хлорида, содержащего 1% формалина и 12,5% этилового спирта, добавляют 1% солюбизатора и нагревают при 60°C в течение 20 минут. В качестве солюбизатора используют синтанол ДС-10 (оксиэтилированные жирные спирты фракции Сь-Съь с 10 молями окиси этилена) или ПП-40 (полиоксиэтилированное производное пентола с 40 молями окиси этилена). После растворения солюбилизатора к раствору добавляют 1% насыщенного спиртового раствора основного фуксина и
